摘要：背景:单份脐血难以满足成人造血干细胞移植的要求,需对其进行体外扩增,这不仅需要较长的时间和较高的培养条件,而且容易导致干细胞自身分化,从而影响移植效果。目的:克隆人白细胞介素3基因cDNA,构建其真核表达载体并转导脐血CD34+细胞,观察白细胞介素3的表达情况。设计、时间及地点:细胞-基因组学体外实验,于2008年在承德医学院完成。材料:健康成人外周血由承德市中心血站提供,脐血由承德市妇幼保健院提供,提供者对实验均知情同意。方法:采集健康成人外周血,应用Ficoll密度梯度法分离单个核细胞,免疫磁珠法分离脐血CD34+细胞。提取白细胞介素3mRNA,应用RT-PCT扩增白细胞介素3cDNA,构建真核表达载体pcDNA3/IL-3。设立2组:实验组利用基因枪技术将pcDNA3/IL-3导入脐血CD34+细胞中,对照组未行转染。主要观察指标:采用人白细胞介素3ELISA试剂盒检测脐血CD34+细胞上清液中白细胞介素3水平。结果:扩增的白细胞介素3基因cDNA理论上应为616bp,实际PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,紫外线下可见预期大小的条带,反转录合成的cDNA完整。BamHⅠ和XbaⅠ双酶切后,电泳可见616bp的插入片段,与白细胞介素3基因序列相同。转染第1～7天,实验组脐血CD34+细胞上清液中白细胞介素3水平明显高于未转染对照组(t=3.46,P<0.05)。结论:白细胞介素3基因cDNA克隆成功,并成功构建了真核表达质粒pcDNA3/IL-3,pcDNA3/IL-3能在脐血CD34+细胞中短期有效表达。

摘要：基于活性肝细胞为主要生物成分的肝细胞治疗学已逐渐成为治疗肝衰竭及先天性肝脏代谢性疾病的重要手段,但其关键是获得理想的肝细胞材料.肝细胞永生化是解决肝细胞来源的重要途径之一,这一领域的研究进展较为迅速.目前已经建立的肝细胞株包括肿瘤源性肝细胞株、由正常肝细胞经胶原凝胶夹心培养系统培养后而获得的肝细胞株、由正常肝细胞经转染/转导而获得的肝细胞株,以及p53或p19基因敲除而建立的肝细胞株等.上述肝细胞株多由肝肿瘤细胞衍变而来或经病毒转导而获得,因此存在安全性之虑.另外,多数肝细胞株的分化功能与原代细胞相比有不同程度地下降.为克服上述缺陷,国内外学者开始采用可回复性永生化方法,其基本原理是先将永生化基因SV40T导入原代细胞以获得永生化细胞株,使其获得体外增生能力,然后再以特异性位点重组技术切除SV40T基因,使细胞株回复到永生化前的状态.这样,肝细胞株既具有了永生化特性,又可解决安全性与分化功能差的缺点. 从这一技术的发展现状及趋势看,进一步改善载体设计将是近期研究的热点。

摘要：在以往的药物设计中，常用针对单一分子靶点的高特异性和高活性化合物筛选的策略（Onegene，Oneprotein，Onedrug），但愈益增多的研究表明，对于像肿瘤、糖尿病、炎症、高脂血症、老午陛痴呆以及神经精神疾病这类设及到多基因、多蛋白质分子改变的疾病（例如，与人乳腺癌相关的突变基因就多达189个），这一策略的有效性正日益受到挑战。为此，近些年来，

摘要：中药作为治疗肝癌的一种方法,因其毒副作用较小,可以稳定或部分缩小病灶,改善肝脏功能,提高患者生活质量而受到广泛重视.研究发现中药对肝癌细胞的作用机制涉及抑制癌细胞增殖、诱导分化、诱导凋亡等方面.其中在中药诱导肝癌细胞分化方面目前已有大量的研究,中药可能通过改变细胞膜生化特性、影响cAMP水平、影响细胞信号转导通路、作用于肿瘤基因以及抑制端粒酶活性等方面来诱导肝肿瘤细胞向正常细胞方向分化.

摘要：英国设计一种可放在汽车蓬上运送的独特小型双体船。它由10个部件组成，只要10分钟就可把所有部件装配成船。船的装备简单紧凑。船帆可360璇转。它设有船底中心垂直升降板。用单翻转导流尾鳍和方向舵操纵，因此操作比较简单。