摘要：根据锤头型核酶的作用模式 ,设计、合成和克隆了特异切割苹果锈果类病毒ASSVd正链 (194- 196位点 )或负链 (89- 91位点 )RNA的 2个短臂锤头型核酶基因 :42nt的RzASSVd(+)和 40nt的RzASSVd(- )。经转录获得核酶转录物和3 2 P标记的ASSVd正、负链转录物。将核酶与ASSVd混合 ,5 0℃或 37℃保温 3～ 4h ,进行 8%PAGE(含8mol L尿素 )和放射自显影分析。体外切割检测表明 :2个核酶均具有特异切割活性 ,其中RzASSVd(- )对ASSVd负链的切割活性较高 ,对ASSVd正链不起作用。RzASSVd(+)对ASSVd正链的切割活性较弱 ,对ASSVd负链亦不起作用。在此基础上 ,构建得到双价核酶基因pGEMRzASSVd(± )。

摘要：前文［１］已证实在体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）实验接近生理环境的条件下，本室设计、合成并克隆到的核酶能够高效选择性的定点切割Ｔ２４－ｒａｓ活化癌基因转录物。在此基础上，为阐明该核酶在体内（ｉｎｖｉｖｏ）的生理活性，本文又进一步把核酶基因片段克隆在真核表达质粒ｐＳＭＧ上，并将重组质粒以磷酸钙沉淀法转染由Ｔ２４－ｒａｓ基因诱导的转化细胞系。在细胞和分子水平上检测了核酶在真核细胞内的生物学活性：表现为各恶性转化细胞系的形态特征逆转，生长速度减慢，并呈现出重叠生长减弱恢复接触抑制的趋势，细胞凝集行为接近正常、软琼脂集落形成能力下降；同时，引物延伸实验结果也表明：在体内实验条件下，核酶能够特异性切割点突变Ｔ２４－ｒａｓ癌基因转录物，抑制癌变细胞的恶性行为，使其得到一定程度的逆转。

摘要：本文根据Ｈａｓｅｌｏｆｆ和Ｇｅｒｌａｃｈ发表的锤头状核酶结构，设计合成了针对ＨＢＶａｙｗ株Ｐ基因５＇－端２３６０位点（ＧＵＣ）的核酶ＲＣＰ，其作用底物为ＨＰＶａｙｗＰ基因的翻译起始区（２１４０－２４２２区段），运用基因克隆结合体外转录的方法，评价了ＲＣＰ的切割活性，结果表明，ＲＣＰ在体外成功地切割了长为３４０个核苷酸的靶ＲＮＡ分子，这一工作为我们进一步在细胞内评价ＲＣＰ抑制ＨＢＶ全基因组复制及其基因表达的研究创造了条件。

摘要：选择鸭乙型肝炎病毒作为核酶的靶病毒，设计针对病毒前基因组Ｓ基因区第１２８８位和１４６９位“锤头状”核酶序列（ＲＺ１和ＲＺ２）。经体外转录及做核酶切割，ＲＺ１和ＲＺ２均有切割作用，以ＲＺ１作用更强。鉴于核酶在相当于鸭体温（４２℃）有切割作用，因此有可能在鸭体内研究其切割作用。