摘要：背景:失忆性贝毒属于海洋神经毒素,是一类具有神经兴奋的氨基酸类物质,其主要成分为软骨藻酸。贝类通过滤食毒藻,将软骨藻酸富集在体内,人类因食用被软骨藻类污染的贝类而中毒。目的:建立液相色谱/四极杆-行时间质谱联用技术对贝类样品中的软骨藻酸实施有效监控,以期提高贝类的食用安全性。设计:前瞻性自身对照实验。单位:上海检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心理化实验室。材料:MUS-1B贻贝组织标样[(36±1)μg软骨藻酸/g,批号MUS-1B0159]和软骨藻酸标准溶液(100mg/L,批号软骨藻类CS-1C352)购自NationalResearchCouncilofCanada(Halifax,Canada)。实际贻贝样品取自历年在东海爆发的赤潮海域收集得到的阳性贝类,空白样品购自市集。高效液相色谱仪(Waters2695)配有紫外检测器(Waters2487)和四极杆-飞行时间质谱仪(QUltima,Micromass)。方法:样品用甲醇-水(体积比为1∶1)提取,经SAX固相萃取柱净化后,用ZorbaxEclipseXDB-18柱(250×2.1mm,3.5μm)色谱分离,流动相为乙腈/水含0.05%甲酸,梯度淋洗,流速0.20mL/min。四极杆-飞行时间质谱选择电喷雾正离子模式,以[M+H]+作为前体离子进行飞行时间质谱扫描测定。主要观察指标:①检测限。②液相色谱/四极杆-飞行时间质谱法的准确度与精密度。

摘要：组织工程技术的建立和发展为外科领域中组织缺损和器官功能障碍提供了全新的治疗模式和手段。它标志着医学将走出器官移植的范畴,步入预制、再生组织和器官的新时代。组织工程学研究涉及细胞生物学、材料学、工程学、生物化学、免疫学、发育生物学、分子生物学、临床医学及伦理学等多学科的交叉与渗透,是一项复杂的系统工程。目前,工程化软骨、皮肤、角膜、血管、肌腱、骨等的体外构建及动物移植实验研究已取得重大进展,其中组织工程皮肤和软骨已商品化用于临床治疗。进一步寻求防止种子细胞功能老化的方法、发掘新的细胞来源途径、选择更接近细胞生长微环境的支架材料以及探索增进工程化组织器官血管化的有效措施等,均是组织工程研究中亟待解决的重要问题。目前的研究热点主要集中在干细胞的研究、基因转染技术的应用、生物材料的分子设计等方面。要达到使工程化组织器官能提供“现货供应”(off-the-shelf)以满足临床应用需要的目标,尚需付出较长时间的艰辛努力。现就组织工程种子细胞的来源、支架材料的选择及组织器官体外构建与应用研究进展作一阐述。

摘要：背景:蛋白多糖是软骨终板的主要组成部分,是维持椎间盘力学性能的生化基础。目的:通过测定退行性变颈椎间盘压缩性能及观测软骨终板基质蛋白多糖的变化,为退行性变的椎间盘显现异常力学特性作一分子机制上的探讨。设计:随机对照实验研究。地点和对象:实验在浙江中医学院生物力学室完成。对象为清洁级日本大耳白家兔24只,由浙江中医学院实验动物中心提供。干预:将24只家兔随机分为对照组和模型组,模型组家兔保持45°低屈曲位5h/(次·d)。于造模后1,2,3月测量力学观察指标和糖胺多糖,分析颈椎间盘退变时基质各成分的系统变化及其对椎间盘力学性能的影响。主要观测指标:椎间盘生物力学性能,椎间盘终板糖胺多糖总量,硫酸软骨素和硫酸角质素比值和透明质酸含量。结果:模型组终板抗压强度、断裂时的最大形变、终板基质蛋白多糖总含量、硫酸软骨素/硫酸角质素比值、透明质酸含量都低于对照组(t=1.78～6.23,P<0.05),并随造模进程的深入而减小。结论:长时间的应力不均状态,造成椎间盘终板材料力学特性改变;颈椎间盘基质蛋白多糖含量和成分改变是颈椎间盘生物力学性能减退的主要原因之一。

摘要：[目的]构建靶向COX-2基因的microRNA真核表达载体,评估其转染人喉癌细胞株Hep-2细胞后对COX-2基因的干扰效果。[方法]根据COX-2 mRNA序列设计合成4对microRNA片段,定向克隆到pcDNA6.2GW/EmGFPmiR真核表达载体上,采用测序分析鉴定插入序列的完整性;并将其转染至Hep-2细胞株中。采用实时荧光定量PCR检测其对COX-2基因表达的干扰效果以得到最佳干预效果的RNAi片段。[结果]构建的4组重组体插入片段的碱基序列完全正确。4组microRNA片段对Hep-2细胞中COX-2基因mRNA表达水平均有下降。其中COX-2 mi-1组的表达水平最低。[结论]从构建的4组COX-2 microRNA重组体中成功的筛选出最佳干扰靶点质粒,即COX-2 mi-1组,为应用microRNA靶向COX-2的基因治疗的研究奠定了基础。

摘要：目的用单染色和复合染色方法制作乳鼠骨骼透明标本,为本室开展实验动物及人体胚胎骨骼染色透明标本制作奠定基础。方法取出生后8d乳鼠为研究对象,按三种不同方法进行制作乳鼠骨骼染色透明标本。结果骨骼经茜素红单染后,成玫瑰红色;经分步复合染色法示:含钙骨成红色,软骨成天蓝色。肌肉及软组织呈肉冻状。结论阿利辛蓝-茜素红复合染色法能简化实验步骤,且染色效果较好,艺术效果较强,是简单而又实用的骨骼染色方法。

摘要：对外伤性耳廓部分缺损一期修复术式进行改进设计,以耳廓缺损前缘为蒂的耳后乳突区皮瓣,携带耳甲后软骨块;或以耳缺损缘一端为蒂,切取0.3～0.4cm宽的正常软骨条易位到耳轮缘固定、支撑,皮瓣包卷覆盖塑形。供区缺损设计两个大型V-Y滑行推进皮瓣闭合或以中厚全层皮片移植修复。应用于临床11例,最大缺损范围占整个耳轮2/3,并累及耳舟、对耳轮,宽约1～1.8cm手术均获成功,形态恢复满意。

摘要：目的研制一种引导大鼠进行定量匀速跑步运动的实验装置。方法以跑步机提供匀速运动平面，支架将自制罩盒架于跑步机上限制大鼠跑步范围。罩盒前部暗室诱导大鼠进入，中部强光刺激大鼠进入前部暗室，尾部与电击器连接的电极对大鼠进行电刺激驱赶。观察大鼠跑步情况，对跑步期间大鼠体重变化进行统计分析。结果首次跑步，大鼠仅经过数次电击，即可在跑道内匀速跑步，间断电击可完成训练。3～4d之后，大鼠即可形成条件反射，只需很少的电击即可按设定速度跑步。试验中后期基本不需电击。不同坡度运动的跑步组大鼠，体重先减轻，后逐渐增加。结论此设计充分利用大鼠趋暗本能和学习能力，减少了电击刺激的影响，并且具有成本低、易于操控的特点，是研究跑步运动对大鼠运动系统影响的理想装置。

摘要：目的:观察过量氟对绵羊肋软骨中BMP-2基因表达及分布的影响。方法:利用内蒙古内陆湖泊乌梁素海高氟水草龙须眼子菜作为饲料氟源,设计3个不同氟添加水平(50、100、150mg/kg)和1个对照组。2个月饲喂后屠宰,采用cRNA-mRNA原位杂交技术检测绵羊肋软骨中BMP-2表达及分布情况。结果:在正常生长期绵羊肋软骨中只能检测到极少量的BMP-2表达,主要集中于外边缘的成纤维细胞中;而添加高氟水草氟含量50mg/kg的试验Ⅰ组,BMP-2在成纤维细胞、幼稚软骨细胞、同源细胞群和肥大软骨细胞处均有表达;添加高氟水草氟含量100mg/kg的试验Ⅱ组,BMP-2在成纤维细胞、幼稚软骨细胞、分裂的同源细胞中表达;添加高氟水草氟含量150mg/kg的试验Ⅲ组,BMP-2在成纤维细胞、幼稚软骨细胞中表达。结论:过量氟刺激了生长绵羊软骨中BMP-2基因表达,改变了BMP-2基因的表达分布,使其在肋软骨中非正常表达;而高过量氟又直接或间接抑制了BMP-2基因在肋软骨中表达。