摘要：背景:载脂蛋白e是血浆主要载脂蛋白之一,具有多形性,参与机体脂质代谢及调节胆固醇平衡,同时参与神经系统的正常生长和损伤后的修复过程。目的:对血管性痴呆患者的载脂蛋白e基因多态性进行分析,并与脑梗死、健康者进行对照,探讨载脂蛋白e基因多态性与血管性痴呆的关系。设计:病例-对照实验。单位:解放军济南军区总医院神经内科。对象:选择2001-08/2003-10解放军济南军区总医院门诊或住院的脑血管病患者以及健康查体者,包括35例血管性痴呆患者,36例脑梗死患者,以及40例健康者。方法:全部受检者禁食12h后,采取肘静脉血4mL,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,检测35例血管性痴呆患者、36例脑梗死患者以及40例健康人的载脂蛋白e基因型,同时检测其血脂及载脂蛋白的含量。主要观察指标:①所有被检者的载脂蛋白e等位基因频率。②不同载脂蛋白e等位基因的血管性痴呆患者三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白A以及载脂蛋白B水平。结果:35例血管性痴呆患者、36例脑梗死患者以及40例健康对照者血样均进入结果分析。①血管性痴呆组和脑梗死组患者ε4频率均高于对照组(22.86%,22.22%,7.5%,P0.05)。②血管性痴呆患者载脂蛋白eε4等位基因携带者三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B水平均较载脂蛋白eε2,ε3携带者高([5.85±1.03),(4.73±0.29),(4.96±0.87)mmol/L;(3.91±0.87),(3.12±0.65),(3.06±0.33)mmol/L;(1.34±0.21),(1.00±0.28),(0.94±0.32)g/L(,P<0.05)]。结论:载脂蛋白e基因多态性与血管性痴呆的发病有关,ε4基因可能为该病的危险因子,且可能与其在脑梗死中的作用相似。

摘要：背景:动脉粥样硬化性脑梗死与载脂蛋白e、B基因多态性的研究有所报道,然而结果不尽相同。载脂蛋白e、B基因多态性与青年人动脉粥样硬化性脑梗死的相关性研究国内未见报道。目的:应用聚合酶链反应技术分析载脂蛋白e、B基因多态性对青年动脉粥样硬化性脑梗死发病的意义及其相关性。设计:以青年动脉粥样硬化性脑梗死患者为研究对象,病例-对照分析。单位:中国医科大学盛京医院神经内科。对象:实验于1998-01/2000-12中国医科大学盛京医院完成。选取神经内科动脉粥样硬化性脑梗死患者36例作为脑梗死组,男30例,女6例,平均年龄(41.6±6.54)岁;对照组为100例体检健康的沈阳籍汉族青年,男66例,女34例,平均年龄(36.16±6.12)岁。方法:两组患者于空腹12h后抽取静脉血8mL,测定血清脂类及载脂蛋白。采用聚合酶链反应技术检测载脂蛋白e和载脂蛋白B的基因多态性;酶法测定血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇含量;免疫比浊法测定血清载脂蛋白AI.B浓度;酶联免疫法测定血清脂蛋白a的含量。主要观察指标:①载脂蛋白e、B基因型频率在两组人群中的分布特征。②载脂蛋白e和载脂蛋白B基因多态性与血脂、脂蛋白和载脂蛋白的含量的关系。③载脂蛋白e、B基因型与青年人动脉粥样硬化性脑梗死发病中的关联强度。结果:①脑梗死组患者ε3/4型频率为36.1%,ε2/4型频率为27.7%;对照组分别为12%和7%;梗死组ε4等位基因频率为0.320,明显高于对照组的0.095(P0.05)。结论:载脂蛋白e等位基因ε4是青年人动脉粥样硬化性脑梗死的一种遗传易感性因子;XbaⅠX+X-可能是另一种遗传标记;载脂蛋白e与载脂蛋白B基因型并存时与年青人动脉粥样硬化性脑梗死的关系需进一步研究。

摘要：目的研究载脂蛋白e(APOe)ε4基因型对糖脂代谢障碍与糖尿病相关认知障碍(DCI)关系的影响。方法病例对照研究设计, 纳入2017年1月至2022年12月于山西医科大学第一医院接受择期手术的2型糖尿病(T2DM)患者891例, 年龄(62.1±13.8)岁, 包括229例DCI患者(病例组)、662例认知正常的患者(对照组), 采集常规临床信息, 以及外周静脉血检验糖化血红蛋白和血脂, 对APOe基因单核苷酸多态性位点rs429358和rs7412做基因分型以确定APOe ε4基因型。使用逐步Logistic回归筛选DCI发生风险的独立影响因素, 使用亚组分析检验APOe ε4基因型对糖化血红蛋白和血脂与DCI发生风险间关联的影响。结果在所有T2DM患者中, 女性(OR=1.915, 95%CI:1.393~2.631, P0.05);相反, 高糖化血红蛋白在非APOe ε4携带者中与高DCI风险独立相关(OR=1.220, 95%CI:1.040~1.430, P=0.014), 但在APOe ε4携带者中与DCI之间未发现独立相关(P>0.05)。高三酰甘油在全样本和各APOe ε4等位基因型亚组中均与高DCI风险独立相关。结论 APOe基因型对糖脂代谢障碍与DCI发生风险间的关联有重要影响, 强调了脂代谢障碍和APOe风险基因在DCI发生和发展中的重要性, 对后续DCI相关临床和机制研究有重要的指导意义。

摘要：背景:神经细丝的磷酸化程度与阿尔茨海默病的发生密切相关,载脂蛋白e4是阿尔茨海默病公认的易患因子,但载脂蛋白e4对神经元细胞内神经细丝磷酸化的影响及机制尚不十分清楚。研究显示在阿尔茨海默病患者脑组织和体外培养的神经元细胞中,载脂蛋白e4蛋白C末端的272～299位氨基酸残基可被水解截去,产生truncated-apoe4片段,且与阿尔茨海默病的特征性病理改变神经纤维缠结中的磷酸化神经细丝相互作用。目的:在细胞水平观察truncated-Apoe4过度表达对培养的神经元中神经细丝磷酸化的影响。设计:非随机对照实验观察。单位:华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系。材料:实验于2005/12在华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学实验室完成。小鼠成神经瘤贴壁生长细胞株N2a由许华熙博士提供。方法:构建peGFP-T-apoe4真核表达重组体,采用脂质体介导的方法分别将peGFP-c3、peGFP-apoe4和peGFP鄄T-apoe4瞬时转染小鼠成神经瘤细胞株(N2a),24～48h后,免疫印迹技术检测神经细丝的磷酸化状态,测定糖原合酶激酶3、细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK5)的活性。主要观察指标:神经细丝的磷酸化程度及糖原合酶激酶3、细胞周期依赖性蛋白激酶5的酶活性。结果:转染组细胞内磷酸化神经细丝含量显著增多,糖原合酶激酶3酶活性显著增加,以peGFP-T-apoe4转染组最为显著(P0.05)。结论押Truncated鄄Apoe4过度表达可通过激活糖原合酶激酶3而非细胞周期依赖性蛋白激酶5引起成神经瘤细胞株(N2a)细胞中神经细丝过度磷酸化,提示truncated鄄Apoe4可能参与了阿尔茨海默病的病理过程。

摘要：目的利用杂交探针结合熔解曲线分析技术，建立一种适用于临床的快速、可靠的实时PCR检测载脂蛋白e（apoe）基因型的方法。方法应用Light Cyeler技术，优化主要反应条件，设计在1个PCR中可同时分析2个密码子的多态性方法。选取60岁以上中心性肥胖症133例和体检正常老年者108名为研究对象。首先以LC-Red640和LC-Red750标记两条针对突变位点为112和158的检测探针的5′端，相应的锚定探针在3′端被荧光标记，再从研究对象基因组DNA中快速循环PCR特异引物扩增apoe基因265bp片段，将其与特异探针杂交后，引发荧光共振能量转移，通过异源杂交的出现和错配碱基类型的熔解参数来完成和评价野生型和突变基因分型的特征性。结果峰值对应着序列特异的熔解温度点，各基因型的模板均呈现良好的峰形。中心性肥胖症组突变型以e2／3、e3／4基因型频率最高，与正常组比较差异有统计学意义（χ^2=4．210，P〈0．004；χ^2=6．328，P〈0．012），中心性肥胖症组和对照组分布频率分别为e2／3型37例（27．8％）和18例（16．7％）、e3／4型33例（24．8％）和13例（12．0％）、e3／3型56例（42．1％）和74例（68．5％）、e2／4型3例（2．3％）和2例（1．9％）、e4／4型3例（2．2％）和0例（0）、e2／2型1例（0．8％）和1例（0．9％）；其结果与测序结果一致；中心性肥胖症组apoe基因总浓度（101．2±73．6）表达水平也较对照组（50．6±27．1）显著升高（t=3．359，P〈0．001）。结论该方法操作简便省时，不易交叉污染；获得的各种基因类型特征性强，适用于临床和流行病学调查的快速诊断分型。apoe基因多态性与老年中心性肥胖症存在相关性，对携带e3／4型、e2／3型或e4／4型的个体，可提示决定个体老年中心性肥胖遗传易感性方面起到重要作用。

摘要：背景:近年来,国外学者发现载脂蛋白e基因与骨质疏松症及其并发髋部骨折存在相关性。国内外学者对载脂蛋白e基因采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性进行基因多态性与骨密度、骨质疏松之间关系进行了初步研究。目的:观察载脂蛋白e基因多态性,分析其与原发性骨质疏松症、骨质疏松性骨折的相关性。单位:南昌市第一医院骨科。设计:临床对照观察。对象:原发性骨质疏松患者60例,男31例,女29例,其中髋部骨折组30例均为新近骨折并有X射线片为诊断依据,单纯性骨质疏松组30例;健康对照组30例,男16例,女14例。方法:选择2002-01/12南昌市第一医院骨科门诊、住院原发性骨质疏松患者60例,骨折组30例,单纯性骨质疏松组30例,健康对照组30例。全部受检对象均禁食12h以上,于次日早晨采静脉血,从分离的白细胞中提取DNA;进行基因位点DNA扩增聚合酶链反应-单链构象多态性分析。将已明确的载脂蛋白e2/2,e3/3,e4/4纯合子个体的模板DNA(中山大学达安基因诊断中心提供)进行PCR-SSCP分析,示快泳带中e3居前,e2居中,e4置后。将样本模板DNA与之同时电泳,比较快泳带的迁移率即可确定样本模板的载脂蛋白e基因型。主要观察指标:载脂蛋白e基因型。结果:参与者全部进入结果分析。①60例原发性骨质疏松患者(骨质疏松性髋部骨折组30例)和30例健康对照组中PCR扩增产物SSCP分析检测到6种基因型:载脂蛋白e2/2,e3/2,3/3,e4/2,4/3,4/4。各组均出现载脂蛋白e基因2型、3型、4型等位基因。②载脂蛋白e基因4型等位基因频率3组比较差异有非常显著性意义(χ2=17.520,P<0.01),携带载脂蛋白e基因4型频率骨质疏松组及骨质疏松性骨折组明显高于正常人群(χ2=4.904,16.681,P<0.01);骨质疏松性骨折组高于骨质疏松组(χ2=4.658,P<0.01)。结论:载脂蛋白e4与原发性骨质疏松症、骨质疏松性骨折有密切相关性;载脂蛋白e4是原发性骨质疏松症,尤其是骨质疏松性骨折一个有用的标志物。

摘要：背景:载脂蛋白e 基因多态性与阿尔茨海默病发病有关,多数学者报告载脂蛋白eε4等位基因与家族性阿尔茨海默病和散发性阿尔茨海默病有关。目的:验证乌鲁木齐市老年人群中散发性阿尔茨海默病与载脂蛋白e基因多态性的关系,并分析载脂蛋白e 基因对散发性阿尔茨海默病发病风险的预测价值。设计:病例-对照实验。单位:解放军兰州军区乌鲁木齐总医院临床医学研究所和神经内科。对象:选择2001-01/2003-01解放军兰州军区乌鲁木齐总医院神经内科住院或门诊以及老年公寓筛查阿尔茨海默病患者60例,男28例,女32例;年龄52～91岁,平均(74.2±19.5)岁;受教育时间0～16年,平均4.43年,其中文盲28例,小学13例,初中12例,高中4例,大学3例。选择2002-02/12新疆地区无血缘关系的健康查体人群90例为对照组,男59例,女31例;年龄50～101岁,平均(69.9±25.5)岁;受教育时间0～16年,平均7.96年,其中文盲14例,小学23例,初中25例,高中21例,大学7例。参与者均知情同意。方法:抽取5m L 全血,乙二胺四乙酸抗凝后采用苯酚-氯仿法自外周血白细胞中提取基因组DNA 。应用聚合酶链反应扩增载脂蛋白e 基因第4外显子中含多态性位点的DNA 片段,H ha I限制性内切酶切后进行电泳,银染色后分析阿尔茨海默病组和对照组载脂蛋白e 各等位基因、基因型的频率。主要观察指标:①阿尔茨海默病组和对照组基因型和等位基因频率。②阿尔茨海默病组和对照组不同性别、年龄、受教育程度的载脂蛋白eε4等位基因频率。结果:参加试验阿尔茨海默病患者60例,健康对照组90例,均进入结果分析。①阿尔茨海默病组ε3/ε4,ε4/ε4基因型频率高于对照组(26.67%,11.11%;3.33%,1.11%,P <0.05)。ε2/ε3基因型频率低于对照组(5.00%,14.00%,P <0.05)。②载脂蛋白eε4等位基因在阿尔茨海默病组中出现的频率高于对照组(17.50%,7.22%,P <0.05), 载脂蛋白eε2等位基因低于对照组(6.67%,13.33%,P <0.05)。③阿尔茨海默病组女性ε4等位基因频率明显高于对照组(20.97%,5.00%,P <0.01)。④阿尔茨海默病组中≥75岁患者ε4频率低于<75岁患者(8.57%,30.00%,P <0.01),而且阿尔茨海默病组<75岁患者ε4频率明显高于对照组(30.00%,7.02%,P <0.01)。⑤阿尔茨海默病组中文盲和小学程度患者ε4等位基因频率明显高于对照组(10.00%,0.56%, P <0.001;5.00%,1.12%,P <0.01)。结论:①本组结果也验证了载脂蛋白eε4等位基因与乌鲁木齐散发性阿尔茨海默病有明显相关性,其基因型以ε3/ε4为主。②ε2等位基因在阿尔茨海默病发生时具有一定保护作用。③女性、75岁以下、低教育程度、载脂蛋白eε4等位基因携带者具有更高的阿尔茨海默病发病风险性。

摘要：目的基于焦磷酸测序平台建立符合临床检验要求的载脂蛋白e（Apoe）分型检测方法，使用该方法分析中国汉族人群中帕金森病（PD）与Apoe基因型的相关性。方法扩增同时包含rs429358和rs7412位点的区段，设计两条测序引物，在同一反应体系中完成两个位点的测序反应。与Sanger测序结果进行比较，分析焦磷酸测序法的准确性。共纳入晚发散发PD患者208例和健康对照235名为受试者，分析两组受试者Apoe基因型和基因频率。结果焦磷酸测序法可准确检测Apoe基因分型，能准确分析所有6种Apoe基因型。Apoe基因ε3/ε3型在两组受试者中最为常见，其次为ε2/ε3型和ε3/ε4型，两组受试者6种基因型比较和3种等位基因比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论焦磷酸测序法是符合临床检验要求的Apoe基因分型检测方法，且Apoe基因型不是PD发病风险因素。

摘要：目的应用基因测序技术观察通心络胶囊对不同载脂蛋白e(Apoe)基因冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)的治疗效果,并探究Apoe基因多态性与治疗前后CHD中医证型证候积分、血脂水平的相关性,为中医辨证施治CHD提供分子生物学依据。方法将118例CHD患者采用随机、对照、盲法试验设计,分为2组,对照组予单硝酸异山梨酯缓释片40mg,每日1次口服;酒石酸美托洛尔片25mg,每日2次口服;阿司匹林肠溶片25mg,每日1次口服;治疗组在对照组基础上同时予通心络胶囊3粒,每日3次口服。分别检测不同中医证型的Apoe基因多态性和治疗前后血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),统计证候积分,比较通心络胶囊对不同Apoe等位基因、不同Apoe基因表型、不同证型CHD的中医证候积分和血脂水平的差异及疗效。结果 2组中医证候总积分治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05),治疗组ε4型改善率痰阻心脉证疗效最好,优于ε2、ε3型;对照组各等位基因对于气阴两虚证、痰阻心脉证、心血瘀阻证积分改善率比较差异无统计学意义(P>0.05)。2组组内各不同基因表型调脂疗效比较,TC、LDL-C降低和HDL-C升高的改善率比较差异有统计学意义(P0.05),2组组间各相同基因表型间治疗前后改善率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论通心络胶囊干预CHD疗效显著,对不同Apoe基因CHD的不同中医证型的疗效均具有影响,但对气阴两虚证、痰阻心脉证、心血瘀阻证具有明显疗效,尤以痰阻心脉证疗效最为显著;可有效降低TC、LDL-C和升高HDL-C。