摘要：背景:与体能素质有关的基因研究表明:辅肌动蛋白3基因(ACTN3)、α2A肾上腺素能受体基因(ADRA2A)和睫状神经营养因子(CNTF)基因3种基因分别与个体的速度素质、耐力素质和力量素质可能相关。目的:检测中国汉族男性新入伍军人ACTN3、ADRA2A和CNTF基因的遗传多态性,分析ACTN3、ADRA2A、CNTF基因多态性分别与速度、耐力和力量素质的相关性。设计:调查分析。时间及地点:实验于2007-10在解放军第四军医大学基因实验室完成。对象:分别从某两战区3个步兵师随机选取的2007年度中国汉族男性新入伍军人326名,平均年龄(18.82±0.88)岁。方法:入选326名士兵均无训练史,113名进行18周短跑训练,测试训练后的百米成绩。108名进行18周的有氧耐力训练,测试训练后5000m跑的成绩。105名进行18周常规新兵入伍力量性训练,测试训练后的握力体质量指数。主要观察指标:①用荧光定量聚合酶链反应法分析ACTN3基因的多态性。②DNA测序分析ADRA2A基因的G6412C、T6623A、C6645C3个位点的多态性。③用荧光定量聚合酶链反应法分析CNTF基因的多态性,分析握力体质量指数与基因多态性的关系。④3种基因分别与速度素质、耐力素质和力量素质的相关分析。结果:①3种基因的多态位点分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡。ACTN3基因C/T、C/C基因型显著性多于T/T基因型(P0.05)。未发现G6412C、C6645C单点多态性与耐力素质有明显的相关性。③CNTF基因G/G基因型群体显著性多于A/G、A/A。CNTF多态性与力量素质未见显著性相关性(P=0.16)。结论:①ACTN3基因多态性可作为预测个体速度素质的基因标记。②ADRA2A基因位点T6623A多态性可作为耐力素质的基因标记,而位点G6412C和C6645C多态性不是预测个体耐力素质的基因标记。③CNTF基因可以作为CNTF基因A/G多态频率分布的代表,其多态性不能作为中国汉族男性新入伍军人预测个体力量素质的基因标记。

摘要：目的探讨散发性原发性局灶节段性肾小球硬化（FSGS）患者中ACTN4和SYNPO基因启动子区突变的致病作用。方法盐析法提取82例FSGS患者外周血基因组DNA，经引物设计及PCR扩增后测序。突变位点经转录因子结合模拟软件筛选，pGL3-Basic构建表达载体与pRL—SV40质粒瞬时共转染PCI2细胞，双荧光素酶法检测基因表达。检测患者父母头发DNA。免疫荧光检测患者肾组织α-actinin-4和synaptopodin蛋白表达。结果3例ACTN4基因突变分别为1—34C〉T、1～590delA和（1—1044delT）＋（1—797T〉C）＋（1—769A〉G）。2例SYNPO基因突变分别为1—24G〉A和1—851C〉T。1例患者分别接受父母1—1044delT和1—797T〉C变异。除1—1044delT组外，变异组荧光素酶表达强度比正常组有不同程度下降，与突变患者肾组织α-actinin-4和synaptopodin免疫荧光强度下降基本相符。结论ACTN4和SYNPO基因启动子区顺式作用元件区的变异影响基因的转录，可能在散发性FSGS发病中起作用。

摘要：目的研究足细胞裂孔隔膜(SD)复合体分子nephrin、podoein和CD2AP,以及足细胞骨架蛋白α-辅肌动蛋白(actinin)-4的作用及分子间反应。方法针对nephrin、podocin、CD2AP和α-aetinin-4mRNA序列分别设计并构建2个特异RNA干扰质粒-psiRNA-hH1GFPzeo,分别导入小鼠足细胞系MPC5以“敲低”其表达。免疫荧光染色观察其分布方式。半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测其mRNA和蛋白表达。结果(1)podocin敲低组(siPod966和siPod54):未检测到podocin及nephrinmRNA,其蛋白分别下降了92%、79%及82%、67%。而CD2APmRNA和蛋白分别增加了62%、42%及71%、46%。α-actinin-4无变化。(2)nephrin敲低组(siNep492):未检测到nephrinmRNA和蛋白。而CD2APmRNA和蛋白分别增加了35%、48%。podocin和α-actinin-4无变化。(3)CD2AP敲低组(siCda744和siCda21):未检测到CD2APmRNA,其蛋白分别下降了92%和83%。nephrinmRNA和蛋白分别下降了60%、48%及76%、72%;而podocinmRNA和蛋白分别增加了38%、22%及56%、44%。α-actinin-4无变化。(4)α-actinin-4敲低组(siAct1790和siAct319):α-actinin-4和nephrin的mRNA分别下降了69%、58%及64%、49%:蛋白分别下降了81%和55%以及71%、64%。而podocin以及CD2APmRNA分别增加了50%、34%及45%、28%;蛋白分别增加了64%、46%及65%、42%。(5)敲低nephrin、podocin和CD2AP后,这些表达量降低的分子的分布发生了明显改变,即以核周为主;而相应分子敲低后引起的podocin和CD2AP表达增加,其分布亦主要以核周染色增强为主。α-actinin-4即使表达降低,分布亦无变化,仍呈细丝状分布于胞质及足细胞伸出的突起中。结论(1)在SD复合体分子中,nephrin可能具有相对独立的作用。(2)a-actinin-4对nephrin、podocin和CD2AP有直接或间接的作用。(3)足细胞分子间的作用和联系不总是“一致的”,可能是“单向的”、也可能是“双向的”。(4)nephrin、podocin、CD2AP和α-actinin-4在足细胞的分布有赖于其表达量的正常及正常的分子间反应。

摘要：目的 通过分析地塞米松对足细胞活动力的影响特点,探讨其对足细胞固有分子α-actinin-4、nephrin的调控能力.方法 体外足细胞根据不同处理分为3组：地塞米松组（地塞米松1μmol/L＋嘌呤霉素50 mg/L）、嘌呤霉素组（嘌呤霉素50 mg/L）和正常对照组.采用划痕和Transwell实验检测各组足细胞活动力的变化.应用两室弥散系统检测各组足细胞单层膜对FITC-BSA的滤过率.使用实时定量PCR和Western印迹法分析各组足细胞α-actinin-4和nephrin的表达变化.结果 足细胞在嘌呤霉素干预后,细胞划痕修复能力及细胞迁移数均显著提高（P＜0.01）.与嘌呤霉素组比较,地塞米松预处理后足细胞再次给予同样剂量、时间的嘌呤霉素刺激后,细胞划痕修复及迁移数均未发生显著升高（P＜0.01）.实时定量PCR和Western印迹结果均提示,地塞米松预处理后足细胞α-actinin-4和nephrin的表达量显著低于嘌呤霉素组（P＜0.05）.结论 地塞米松能够减轻嘌呤霉素诱导的足细胞活动力升高,其作用机制可能与调控α-actinin-4和nephrin的表达有关.