摘要：目的:测定慢性肝炎患者体内输血传播病毒(TTV)样微小病毒(TLMV)的全基因序列,并研究人群中TLMV感染状况。方法:采用日本学者Shunji Mishiro提供的序列选择TLMV-CBD279和CBD-231最保守区设计引物,用慢性乙型肝炎且TTV阳性患者血清制备DNA模板,进行PCR扩增;将阳性PCR产物连接至pGEMR-T质粒,碱裂解法提取质粒DNA并纯化。以T7引物为起始全自动荧光测序仪测序。结果:获得162bp基因序列,该序列与日本株CBD231、CBD279同源性为72%,丙型肝炎患者及健康献血员感染率最高。结论:在中国慢性乙型肝炎患者体内存在TLMV感染。

摘要：目的应用聚合酶链式反应(PCR)结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测输血传播病毒。方法根据输血传播病毒的核酸序列特点设计特异性引物进行PCR,将扩增产物进行DHPLC检测分析,以验证方法的灵敏度、特异性、重复性,同时进行临床检测的初步应用。结果以乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒进行特异性试验,无交叉反应,具有较好的特异性;重复性良好;灵敏度可达1.0×10~1拷贝/反应。分别应用实时荧光PCR法、普通PCR法及本文所建立的PCR-DHPLC法同时检测32份血清样本,发现有17份样本实时荧光PCR阳性,17份样本PCR-DHPLC阳性,15份普通PCR阳性。结论本文建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于输血传播病毒感染的分子流行病学调查。

摘要：目的　通过病例对比 ,进一步研究 TTV是否有致病性 ;对 1例西安地区非甲 -非戊型肝炎但血清 TTV阳性患者套式 PCR终产物纯化测序 ,在验证我们 TTV DNA检测正确性的同时初步研究西安地区 TTV流行株部分分子生物学特点 .方法　在 TTV ORF1区参照文献 [1]设计一套套式 PCR引物 ,并建立稳定的套式 PCR检测法 ,对西安地区 119例非甲 -非戊型肝炎患者及 16 2例健康有偿献血员进行 TTV对比检测和统计学处理 ;对 1例患者套式 PCR终产物纯化测序 ,用 DNAsis软件在计算机上与中国 1株做同源性比较阳性 .结果　 119例非甲 -非戊型肝炎患者中 37例 TTV DNA阳性 ,阳性率 31.1% ;16 2例健康有偿献血员中 TTV DNA阳性 30例 ,阳性率 18.5 % ;两组有明显的统计学差异 (P30 .0 % ) .其中6 2 bp序列同源性高达 75 .8% .结论　 TTV可能有致病性 ;西安地区可能存在新的

摘要：目的调查输血传播病毒(TTV)在沙眼衣原体感染者中的感染状况,探讨TTV的传播途径。方法2003年1月至2004年6月新疆维吾尔自治区人民医院等2家医院在TTVORF1保守区设计引物,建立套式聚合酶链反应(PCR),检测46例沙眼衣原体感染者和34例普通体检人群血清、宫颈分泌物中TTV-DNA。结果在46例沙眼衣原体感染者血清、分泌物中TTV-DNA阳性率分别为34·8%、32·6%,而普通体检人群血清、分泌物TTV-DNA阳性率为6·3%、3·1%,两组比较差异有非常显著性意义(P(0·01)。结论沙眼衣原体感染者是TTV感染的高危人群,性接触是TTV传播的重要途径之一。

摘要：目的分析深圳地区不同人群中 TTV(transfusion transmitted virus,TTV)感染情况及其基因型。方法在 TTV ORF1 设计引物,建立巢式聚合酶链反应,检测深圳地区不同人群血清中 TTV DNA。对 PCR 产物进行分子克隆,以荧光法(Applied Biosystems,373A)测序。结果 90例一般人群、88例有偿献血员、79例静脉毒瘾者、52例非甲～非庚型肝炎、67例乙型肝炎及72例丙型肝炎患者中,TTV DNA 阳性率分别为7.8%、9.0%、41.8%、48.0%、22.3%与27.8%。5株深圳 TTV(SZ1～SZ5)ORF1部分基因核苷酸序列同源性为66.2%～96.7%。基因分型5株中2株属Gl型(Gla亚型),3株属 G2型,其中2株为 G2b 型。结论深圳地区一般人群与职业献血员中 TTV 健康携带者较常见:静脉毒瘾者与非甲～非庚型肝炎患者是 TTV 感染的高危人群;乙型及丙型肝炎常重叠 TTV 感染;不同 TTV 分离株 ORF1部分基因序列变异可达33%,基因分型以 G1a 与 G2b 为主。

摘要：目的 :研究乙型肝炎病毒感染患者TTV重叠感染情况及初步探讨TTV的致病性。方法 :在ORF1区设计特异性引物建立巢式多聚酶链式反应 (PCR) ,检测乙型肝炎病毒感染患者血清中TTVDNA ,对PCR产物进行分子克隆和测序。结果 :献血员、慢性乙型肝炎病毒携带者、慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者TTVDNA阳性率分别为 10 %、11%、2 7%、4 8%。其中前两者与后两者比较均有显著差异 ,慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者相比也有显著差异 (P 0 .0 5 )。慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者的ALT和TBIL在TTVDNA阳性病人组与TTVDNA阴性病人组之间比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TTVDNA阳性病人组明显高于TTVDNA阴性病人组。结论 :献血员中存在TTV感染 ,乙型肝炎病毒感染患者重叠感染TTV较常见。慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者TTVDNA阳性率明显高于献血员和慢性乙型肝炎病毒携带者的阳性率 ,提示TTV的重叠感染可能是HBV感染病情加重因素之一 ,TTV重叠感染对HBV的复制可能不存在相互作用。

摘要：【目的】调查非肝病人群中经输血传播病毒 (TTV)的感染状况。【方法】在TTVORF1保守区设计引物 ,用巢式PCR检测 12 5例医院工作人员、10 5例献血员、46例静脉透析病人、16 6例性病高危人群和 83例静脉药瘾者 ,共 5 2 5人血清中TTVDNA。【结果】TTVDNA阳性率 ,医院工作人员 3 2 %、献血员 11 4%、静脉透析病人 13 0 %、性病高危人群 2 0 5 %和静脉药瘾者 39 8%。【结论】静脉药瘾者、性病高危人群和静脉透析病人是TTV感染的高危人群。

摘要：随着检测技术的发展，对肝炎病毒的认识更加深刻。除甲～戊型肝炎和已知的其它致病因素外，仍有１０％～２０％的因输血或散发性肝炎不能用现有的检测方法检出其病毒标志。１９９７年Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等报告了一种新发现的，与人类肝炎相关的ＤＮＡ病毒ＴＴＶ。为了解新疆地区ＴＴＶ感染情况，我们用日本学者报道的ＴＴＶ核苷酸序列设计了两对引物，检测了新疆地区的１２８例各种肝炎患者和４１例血液透析患者血清，证实新疆地区存在ＴＴＶ感染的流行，现将检测结果和部分ＴＴＶ阳性核苷酸测序结果总结报道如下。材料与方法一、病例来源本组共收集１６９例各类患者血清标本，肝脏疾病者１２８例，其中男９０例，女３８例，年龄８～６５岁。肝脏疾病中急性肝炎４４例，丙型肝炎３１例，肝硬化１８例，肝癌１７例，非甲～庚型肝炎１８例，血液透析患者４１例。肝病患者均为本中心住院和门诊患者，血液透析标本采自本院血液透析中心。二、主要试剂蛋白酶Ｋ为Ｍｅｒｃｋ产品，ＳＤＳ为Ｓｅｒｖａ产品，ｄＮＴＰＳ，Ｔａｑ酶等购自上海Ｓａｎｇｏｎ产品生物工程公司。三、ＴＴＶ引物的合成参照日本株（Ｎ２２）基因序列，采用Ｇｄｄｋｅｙ软件在ＴＴＶ保守区设计两对引物，委托美国Ｃｙｂｅｒｓｙｎ合成。Ｐ...

摘要：目的 :研究血液透析 (HD)患者输血传播病毒 (TTV)的感染状况和基因型。方法 :设计特异性引物 ,建立巢式聚合酶链反应 ,对 2 0例HD患者血清标本进行TTV DNA的检测。并对阳性PCR产物进行荧光法 (AppliedBiosystems)直接测序。结果 :经过巢式PCR检测 ,HD患者TTV DNA阳性率为 2 5 %。随机选择TTV DNA阳性PCR产物进行荧光法直接测序 ,与国外报道的日本株N2 2比较 ,核苷酸同源性为 95 .8%。结论 :HD患者存在较严重的TTV感染。

摘要：[目的]建立输血传播病毒(transfusion transmitted virus，TTV)荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测方法，为快速、准确地定量检测TTV奠定基础。[方法]根据TTV ORF2区基因序列，设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的TTV的ORF2区基因片段克隆人载体，重组质粒经筛选、鉴定后，作为阳性模板，用于标准曲线的制定和样品检测。[结果]应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系。与定量对照曲线比较计算，10例TTV标本中TTV拷贝数为3．8×10^-5～8．9×10^8拷贝／μl。[结论]检测TTV的FQ-PCR方法较常规PCR技术更为简便、快速、准确，有很好的应用前景和研究价值。