摘要：以来源于不动杆菌Acinetobacter ***04的过氧化物酶A4-Prx的毕赤酵母工程表达菌株GS115/pPIC9K-A4-Prx为研究对象,优化其表达培养条件以提高该菌株对于目的蛋白A4-Prx的表达量。本论文首先研究了培养基成分与诱导条件对表达量的影响,结果表明培养基的pH、甘氨酸浓度和诱导温度对外源蛋白的产量均有显著影响。采用Box-Behnken设计,利用Design Expert软件进行二次回归分析得到了目的蛋白的最优表达条件为:诱导培养基pH 7.0、甘氨酸浓度为0.11%及诱导温度30℃。在此优化条件下重组蛋白的理论表达量达129.87 mg/L,约为未优化下的2倍,实验验证实际表达量达128.94 mg/L,且重组表达的过氧化物酶A4-Prx对酒糟蛋白饲料(DDGS)和食品中的玉米赤霉烯酮毒素(Zearalenone,ZEA)具有高效降解能力。本研究为过氧化物酶的工业化高密度发酵奠定了基础,推动生物降解ZEA研究的进展。

摘要：酶学实验是生物化学实验的重要组成部分。该文以马铃薯皮为实验材料，提取了过氧化物酶粗酶液，设计了一组酶促动力学实验，主要包括测定该酶的酶活性，比较了3个不同pH值对酶活性的影响；测定了粗酶液的蛋白的含量并计算了比活力。该实验取材经济方便，操作简便易行，不需要特殊仪器，一般实验室均可操作，适用于生物学及相关专业本专科酶学实验教学，取得了良好的教学效果。

摘要：采用正交设计－流动注射荧光光谱分析法。对测定过氧化物酶体系的各影响因素进行了正交直观分析和方差分折，结果表明：对羟基苯丙酸是影响反应的显著性因素：十六烷基三甲基溴化铵对反应有增敏作用，并对其增敏原因进行了探讨；提出一种过氧化物酶催化下的反应机理。

摘要：利用Hg^(2+)与Au基纳米材料形成金汞齐制备Hg/Au基纳米酶(AuNPs@Hg)。基于纳米酶表面增强拉曼光谱(SERS)活性和模拟酶催化活性,建立了比色/SERS双模式检测烟碱的方法。结果表明,AuNPs@Hg可以模拟过氧化物酶,催化过氧化氢氧化无色的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB),同时也可以作为SERS底物,检测TMB氧化产物(oxTMB)的SERS信号,而烟碱则可以显著增加AuNPs@Hg的过氧化物酶活性。基于比色法,在烟碱浓度1.25~375μg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限(LOD)为0.34μg/mL。基于SERS法,烟碱浓度在6.25×10^(-3)~1.25 mg/mL范围内有较好的线性校准曲线,LOD为1.80μg/mL。实际样品中烟碱的回收率在96.1%~105.3%范围内,相对标准偏差(RSD)为2.4%~4.7%,且实际样品中存在的共存物质对所建立的方法几乎无干扰作用,检测结果与行业标准方法测定结果一致。本研究可为多功能传感器的设计及SERS在烟草行业中的应用提供新的策略和途径。

摘要：还原型谷胱甘肽(GSH)的巯基和两个羧基分别与2,4-二硝基氯苯(DNCB)和甲醇反应,合成出半抗原Hp2;通过戊二醛将Hp2连到牛血清白蛋白(BSA)上,合成出全抗原Ag2;吸收光谱法测出Hp2在BSA上的平均连接量为30.2mol/mol.用标准的单克隆抗体(McAb)制备技术,制备出阳性McAb(IgG)-4G3;4G3对GSH和半抗原Hp2的解离常数(K_D)表明,单克隆抗体4G3对GSH具有较强的亲和力.对4G3进行两步化学诱变(Chemical Mutation),诱变后即为具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的含硒抗体酶(m4G3),m4G3的GPX活力为9337U/μmol,是兔肝GPX(RL-GPX,5780U/μmol)的 1.6倍,曾报道的含硒抗体酶m4A4(1239 U/μmol)的7.5倍,制备出活性高于天然酶的抗体酶,证实了半抗原设计思想.将m4G3拆分成Fab和Fc片段,发现m4G3的活性中心位于Fab片段上,m4G3的硒代半胱氨酸(Se-Cys)含量为1.9 mol/mol.

摘要：采用单因素及均匀设计多因素实验 ,研究究了蔗糖、CaCl2 、柠檬酸、抗坏血酸、没食子酸对龙眼果肉中过氧化物酶 (POD)、脂肪氧合酶 (LOX)的影响。结果表明 :上述试剂达到一定浓度时均对POD、LOX产生抑制作用 ,其中柠檬酸、抗坏血酸和没食子酸之间存在协同增效作用 ,当 3者的质量浓度分别为 6 .1、0 5、0 0 5g/L时 ,龙眼果肉中POD、LOX相对酶活分别为 16 7%、0 0 5 % ,抑制率分别为 83 3%、99 5 %

摘要：选用３６个优良玉米自交系，组配了３００个杂交种（其中７８个杂交种为１３个自交系按完全双列杂交设计组配），利用过氧化物酶、酯酶和醇溶蛋白多态性的综合分析，划分了我国玉米的优势类群，所得结果与材料的血缘和育种实践高度吻合。研究结果表明，我国的优势杂交模式为美国杂交种选系×四平头系等六类，综合遗传距离与特殊配合力和杂种产量的关系均为抛物线关系，相关系数分别为０．６３２＊＊和０．６７１＊＊。还对优势类群在育种上的利用提供了参考意见。

摘要：选用6个亲本组配成双列杂交设计,对普通小麦抗白粉病的配合力及基因效应进行了分析。结果表明,白粉病病情指数属于数量性状遗传,符合加性—显性遗传模型,由加性效应和非加性效应共同控制,且以加性效应为主。低病情指数为部分显性。不同亲本之间一般配合力效应及含有的有利显性基因数存在明显差别。因此,选配杂交组合应在一般配合力高的基础上,注重其特殊配合力的选择。研究还表明,感病品种过氧化物酶活性高。

摘要：为优化超高压处理对香蕉果肉多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)的酶活残存率,首先研究压力、温度和保压时间对香蕉果肉PPO和POD的酶活残存率的影响,然后采用二次回归正交旋转组合设计试验对工艺进行优化。结果表明,超高压处理香蕉果肉PPO和POD的酶活残存率影响因素的主次顺序分别为压力>温度>保压时间和温度>压力>保压时间;超高压处理香蕉果肉PPO和POD的酶活残存率最佳工艺参数为压力480MPa、温度55℃、保压时间10min,在此条件下,PPO和POD的酶活残存率分别为0.90%和3.26%。

摘要：为了获得金钗石斛(Dendrobium nobile)过氧化物酶基因(命名为DnPOD)编码序列,分析该基因的分子特征,掌握该基因原核表达数据,本研究采用同源克隆的方法,以金钗石斛cDNA为模板,设计基因特异性引物克隆DnPOD基因,分析了DnPOD基因结构,将重组质粒pET28α-DnPOD在BL21(DE3)菌株中诱导表达,构建了DnPOD蛋白3D结构以及进化树。结果表明,DnPOD基因编码区长999 bp,编码332个氨基酸,该基因具有4个外显子和3个内含子。经IPTG诱导表达的蛋白质分子量为37.31 kD。对金钗石斛DnPOD基因克隆和原核表达研究,可为进一步研究该基因的生物学功能打下基础。