摘要：背景：目前尚未见成熟的成年人退行性变椎间盘的细胞培养模型报道，而此模型为建立椎间盘组织工程的细胞学基础。目的：建立成人椎间盘细胞培养模型，奠定椎间盘组织工程研究的细胞学基础。设计及地点：对比观察的细胞学实验，在山东省创伤骨科研究所完成。材料：标本来源于青岛大学附属医院骨科5例确诊为退行性椎间盘病变患者。L2~3椎间盘1例，L4~5椎间盘3例，L5~S1椎间盘1例。方法：对5例取自腰椎间盘突出症退变椎间盘的手术标本，采用系列酶消化法细胞培养和组织块细胞培养两种方法，应用HAMF12培养基加体积分数为10%和20%的胎牛血清分别进行了细胞培养，均获得了传代，并对培养细胞进行了光镜和电镜的形态学观察。主要观察指标：①细胞生长状况。②光镜下细胞形态观察。③透射电镜超微结构观察。结果：酶消化法和组织块法均能获得大量的退变椎间盘细胞，并成功地进行细胞传代。培养细胞的分泌物质可能对细胞的生长起一定的限制作用，去除该物质后细胞可迅速增生。但在细胞生长及增殖过程中，体积分数为20%胎牛血清下细胞增殖速度明显高于体积分数为10%胎牛血清时的速度。全部退变椎间盘标本中均发现了脊索细胞。结论：成人退变椎间盘可以用来获得椎间盘组织工程所需的细胞。

摘要：目的探讨荷载RADA-16/Sox-9的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对兔退变椎间盘的修复作用及可能机制。方法40只大白兔随机分为对照组、Sox-9MSCs组、RADA-16MSCs组、RADA-16+Sox-9 MSCs组各10只,4组均采用自行设计的加压装置制备退变椎间盘模型。对照组不作处理,Sox-9 MSCs组、RADA-16 MSCs组、RADA-16+Sox-9MSCs组在造模成功后7d分别向L_(3/4)、L_(4/5)、L_(5/6)椎间隙注射Sox-9转染MSCs、RADA-16转染MSCs、RADA-16+Sox-9转染MSCs溶液各5mL。分别于转染前、转染后3个月行腰椎X线片、MRI检查测量髓核矢状径指数、根袖直径、神经根鞘袖和硬脊膜夹角、病变间隙、临近节段椎间隙高度变化;于转染前、转染后3个月分别处死5只兔,取椎间盘制作病理切片,采用免疫组织化学法检测髓核组织中Ⅱ型胶原表达。结果4组转染前髓核矢状径指数、根袖直径、神经根鞘袖和硬脊膜囊夹角比较差异无统计学意义(P>0.05);转染后3个月,对照组、RADA-16 MSCs组、Sox-9MSCs组、RADA-16+Sox-9MSCs组髓核矢状径指数(0.36±0.13、0.33±0.12、0.20±0.14、0.17±0.11)、神经根鞘袖和硬脊膜夹角[(26.92±1.10)°、(26.23±1.17)°、(25.77±1.17)°、(25.32±1.18)°]依次降低,根袖直径[(0.21±0.05)、(0.29±0.04)、(0.37±0.06)、(0.45±0.05)cm]依次增加(P0.05);转染后3个月,对照组、RADA-16 MSCs组、Sox-9 MSCs组、RADA-16+Sox-9MSCs组病变间隙[(26.89±1.11)、(24.77±1.13)、(21.28±1.12)、(16.33±1.13)cm]、临近节段椎间隙高度变化[(1.68±0.12)、(1.50±0.10)、(1.29±0.11)、(1.01±0.10)mm]依次降低,Ⅱ型胶原表达(190.65±1.35、208.80±1.40、221.34±1.56、240.95±1.45)依次增加(P<0.05)。结论荷载RADA-16/Sox-9的MSCs对兔退变椎间盘有较好的修复作用,可能与其能增加髓核组织中Ⅱ型胶原含量有关。