摘要：以酪蛋白和聚乙烯醇为原料,基于正交试验设计,运用静电纺丝技术纺制纳米蛋白纤维膜。研究聚乙烯醇质量分数固定时,酪蛋白质量分数、纺丝电压和接收距离等参数对纳米纤维膜成膜性的影响。分别应用透射电镜、透气性测试、傅里叶红外光谱、X射线衍射、比表面积和孔隙率测试等手段研究纤维膜微观结构、透气性、成膜性及稳定性。结果表明:所制备的纳米纤维膜为介孔结构,具有良好的孔隙率与比表面积;酪蛋白质量分数对纤维膜为主要影响因素,接收距离和纺丝电压为次要影响因素;酪蛋白与PVA分子之间以氢键结合,随着酪蛋白质量分数提升,氢键和结晶度发生变化,结合更紧密但纤维膜无序且多晶粒排列,成膜性逐渐下降。由正交试验得出,酪蛋白质量分数为5%,纺丝电压为27 kV,接收距离为9 cm时纺制的纳米纤维膜具备良好成膜性、且微观结构均匀、稳定性好。

摘要：本研究以奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)为模型,研究添加不同浓度精氨酸对BMECs酪蛋白合成的影响。采用单因素完全随机试验设计,以0.70 mmol/L精氨酸(DMEM培养基中精氨酸的浓度)为对照组,试验组精氨酸的浓度分别为1.40、2.80、5.60和11.20 mmol/L,每组6个重复。采用MTT法检测BMECs的增殖率;利用酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测BMECs中精氨酸代谢关键酶活性;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测BMECs中精氨酸代谢关键酶、酪蛋白以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路基因的相对表达量;运用蛋白质免疫印迹(Western Blot)技术检测酪蛋白表达量及mTOR信号通路蛋白磷酸化水平。结果表明:1)当精氨酸的浓度为2.80 mmol/L时,BMECs的增殖率显著高于对照组和其他精氨酸组(P<0.05);当精氨酸的浓度为2.80和5.60 mmol/L时,BMECs中鸟氨酸脱羧酶活性显著高于对照组和其他精氨酸组(P<0.05)。2) 2.80 mmol/L精氨酸组BMECs中αs1-酪蛋白、к-酪蛋白、蛋白激酶B、mTOR、核糖体p70s6激酶和真核翻译启始因子4E结合蛋白1的基因相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。3)1.40和2.80 mmol/L精氨酸组BMECs中αs1-酪蛋白表达量和S6K蛋白磷酸化水平显著高于对照组和其他精氨酸组(P<0.05)。4)2.80和5.60 mmol/L精氨酸组BMECs中mTOR信号通路蛋白磷酸化水平显著高于对照组和其他精氨酸组(P<0.05)。综合上述结果,当精氨酸的浓度为2.80 mmol/L时,对BMECs酪蛋白合成的促进效果最佳。

摘要：用二次回归通用旋转设计、响应面分析法,研究三因素五水平下胰蛋白酶水解酪蛋白的反应,得到了一定条件下酪蛋白在酶作用下水解程度的变化规律。根据回归方程利用统计优选法寻优,确定了最优水解条件:温度为58℃,pH值为7.4,酶底比为0.7%。

摘要：酚类物质与蛋白质的相互作用对富含酚类物质的功能性乳制品的稳定性及生物活性具有重要影响。通过光谱分析及抗氧化活性测定,研究了芦丁和阿魏酸与酪蛋白的相互作用机制。荧光光谱分析发现,芦丁和阿魏酸均能淬灭酪蛋白的内源荧光,淬灭方式为静态淬灭;热力学参数表明,芦丁与酪蛋白作用的驱动力为疏水作用,阿魏酸与酪蛋白作用的驱动力为疏水作用和氢键。紫外-可见光谱和同步荧光光谱表明,芦丁和阿魏酸的加入影响了酪蛋白中酪氨酸和色氨酸残基周围的微环境,从而引起酪蛋白的构象改变。傅里叶变换红外光谱和圆二色谱研究结果进一步表明,芦丁和阿魏酸使酪蛋白的二级结构发生了变化,但没有破坏其二级结构。

摘要：以酪蛋白为原料,经蛋白酶催化水解,得到蛋白水解液,进而和糖进行美拉德反应制成新型非酶棕色化香料。水解酶为胰蛋白酶和木瓜蛋白酶。本文利用正交试验设计,系统地研究了蛋白酶催化条件下酪蛋白的水解,研究了各实验因素对水解效率的影响。最佳水解条件是:水解温度50℃,pH8.0,水解时间24h,酶-底物浓度比0.5%～1.0%。美拉德反应合成的新型非酶棕色化香料,具有浓郁的烤土豆香味。可应用于食品和烟草的加香。

摘要：比较正交设计和均匀设计对酪蛋白酶水解参数的优化效果。结果表明:当采用三氯乙酸沉淀法测定水解度时,正交设计的最高水解度高于均匀设计的最高水解度,分别为79.27%和59.81%,此时的参数组合分别为底物浓度6%和4%、酶:底物比4%和4%、温度58℃和56℃、pH8.0和8.0、水解时间3h和2.33h;当采用甲醛滴定法测定水解度时,正交设计与均匀设计的最高水解度非常接近,分别为10.82%和10.73%,此时的参数组合分别为底物浓度8%和10%、酶:底物比6%和7%、温度56℃和58℃、pH7.5和8.0、水解时间3h和3h。在本实验参数水平数较少的情况下,正交设计的优化效果优于均匀设计。

摘要：为寻求食品中安全高效的亚硫酸盐脱除方法,本研究考察了酪蛋白对虾仁中亚硫酸盐的脱除效果及其机理。通过单因素试验考察了酪蛋白浓度、料液比、浸泡时间对虾仁中亚硫酸盐脱除率的影响,并应用Box-Behnken响应面设计,对脱除工艺进行优化,利用紫外光谱(UV)和傅里变换红外光谱(FT-IR)法初步探究其脱除机理。结果表明,亚硫酸盐脱除的最佳工艺条件为:浸泡时间2.37 h,料液比1∶6.8 g·mL^-1,酪蛋白浓度1.30 g·L^-1,亚硫酸盐的实际脱除率为84.13%,且处理后的虾仁在硬度、弹性、粘聚性、咀嚼性方面依然保持较优水平。UV和FT-IR结果表明,酪蛋白分子和SO32-可能存在相互作用,导致SO32-的紫外最大吸收峰发生蓝移,且亚硫酸盐能破坏酪蛋白中的二硫键,生成RS-SO3H。本研究结果为食品中亚硫酸盐的脱除提供了新途径。

摘要：采用酪蛋白同还原糖(葡萄糖∶乳糖=1∶1)发生美拉德反应,研究其美拉德反应产物(MRPs)的抗氧化活性,测定了MRPs的还原力和对DPPH自由基的清除率。根据单因素及正交实验结果表明,酪蛋白与还原糖反应得到的美拉德反应产物的抗氧化活性同反应物浓度、反应温度、反应时间、反应起始pH存在一定的量效关系,并且确定酪蛋白浓度为3%、反应温度为100℃、反应时间为6h、反应起始pH10时是最佳美拉德反应模式,此时MRPs的抗氧化活性较强,DPPH·清除率可达72.87%。

摘要：利用二次旋转回归试验设计较系统地研究了在碱性条件下酪蛋白的胰蛋白酶催化水解，得到了在一定的条件变化范围内酪蛋白水解物的水解度变化规律（回归模型），回归模型所得结果与实际试验结果相符，所以该模型可用于对水解度的预测；二次旋转回归试验设计还可同时用于对酪蛋白的限制水解进行优化条件选择。

摘要：基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱系统,建立了食品中牛奶过敏原酪蛋白的快速筛查和定量检测方法。样品经缓冲液提取后,采用5 kD超滤膜去除小分子杂质,得到蛋白质提取液。以数据依赖采集(data-dependent acquisition,DDA)方式获得全扫描质谱图,进行蛋白质定性确证,以平行反应监测(parallel reaction monitoring,PRM)技术对目标特征肽段进行定量分析。针对特征肽段,设计并合成了内标肽和内标物质,以降低基质效应和抵消处理过程中的损失。该方法应用于食品中的α-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白的快速筛查和定量检测。结果表明,该方法在5~250μg/L范围内线性关系良好,定量限为0.2~5.5μg/kg,平均回收率在68.8%~104.4%之间,RSD<6%。该方法可用于果汁饮料、果酱、面包、早餐谷物中牛奶过敏原酪蛋白的快速筛查和定量分析。