摘要：建立了基于多克隆抗体的氯噻啉间接竞争酶联免疫分析(ic-ELISA)方法。设计合成了氯噻啉半抗原,将其分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫原和包被原。用免疫原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,抗体效价为2.56×106。通过对有机溶剂含量、离子强度和pH等影响因素的优化,确定了氯噻啉ic-ELISA的最佳检测条件(含体积分数10%甲醇的磷酸盐缓冲液、Na+浓度为0.14 mol/L、pH 7.4),并建立了氯噻啉标准竞争曲线,该方法的抑制中浓度(IC50)为0.18 mg/L,最低检测限(IC10)为0.001 8 mg/L。所得多克隆抗体除与吡虫啉有较大的交叉反应外,与其他结构相似的化合物无明显交叉反应。在水、土壤和甘蓝中分别添加0.05～1 mg/kg的氯噻啉标准溶液,平均回收率为91.42%～113.82%,相对标准偏差(RSD)为0.72%～8.68%,符合农药残留检测要求。该ELISA方法可用于环境及农产品中氯噻啉残留检测。

摘要：研发一种采用竞争性免疫法检测水中草甘膦的自动检测系统。该系统包括定量进样、清洗、反应/检测、系统控制等模块。采用微流芯片、微量注射泵进行各种试剂的定量,避免交叉污染,采用三维运动机械臂进行各个加样位点的精确定位及加样,并与酶联免疫检测方法结合,设计得到一种能够自动检测水中草甘膦含量的仪器。仪器检测精密度为9.6%,检出限为0.078μg/L.用该仪器对实际水样进行对比测试,测试结果与标准方法相比,其相对误差在±16%以内。该仪器具有检测灵敏度高,试剂用量少,操作简单等优点。

摘要：介绍了流水线全自动酶联免疫工作站用于卫生部门、食品检验、科研分析，采用酶联免疫吸附（EUSA）法大规模检测艾滋病毒、肝炎病毒以及生物毒素等使用情况；流水线全自动酶联免疫工作站主要设计技术参数；其准确度及重复性与同类设备比较；与手工操作比较重复性有较大提高；提出全自动酶联免疫工作站用于食品卫生毒素检测（如黄曲霉毒素B1等）前景分析。

摘要：cry1Ah1基因是本实验室克隆的具有自主知识产权的模式基因,对鳞翅目害虫水稻二化螟等具有高毒力,具有较好的应用前景。为提高cry1Ah1基因在水稻中的表达量,探讨密码子使用频率对基因表达的影响,依据水稻密码子使用频率设计5种不同的优化方案,提高GC含量并去除剪切信号等不稳定因素后合成cry1Ah1基因杀虫活性区域。优化后的基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中正常表达了65 kDa蛋白,表达蛋白对2龄小菜蛾和水稻二化螟初孵幼虫都具有良好的杀虫活性。优化的基因转化水稻日本晴后,PCR阳性率达到87%以上,实时荧光定量RT-PCR和ELISA分析表明全部采用最高频率密码子的优化方案效果最好,Cry1Ah蛋白平均表达量占可溶性蛋白的0.104%。

摘要：研究脱氧核酶对近日钟基因period1(per1)表达的影响,进而寻找治疗和近日节律有关疾病的基因疗法.设计合成针对per1的脱氧核酶DRz164,DRz256,并构建pcDNA3-per1164:256体外转录载体,将转录产物和脱氧核酶混合,在一定反应条件下进行体外切割反应,地高辛酶联免疫及酶催化显色法检测脱氧核酶的体外切割效率.将pcDNA3-per1和DRz164或DRz256在脂质体的介导下转染NIH3T3细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术(FCM)检测脱氧核酶对近日基因表达的影响.于37℃孵育2h后,DRz164对底物的剪切百分率为63%,DRz256为50.5%.RT-PCR半定量检测per1mRNA表达水平明显下降,FCM结果显示细胞内Per1蛋白的合成受到抑制.脱氧核酶DRz164,DRz256体外具有定点切割近日钟基因per1mRNA组分的活性,使转染细胞per1mRNA和Per1蛋白表达下降.

摘要：以碱性蛋白酶水解乳清蛋白过敏原,采用三因素二次旋转正交回归设计对水解反应的工艺参数pH值、水解温度(T)、酶和底物比(E︰S)进行了优化。建立了以乳清蛋白水解物的-αLA抑制率和-βLG抑制率为响应值的二次旋转正交回归模型。方程通过F检验t、检验和应用验证,模型较好地反映碱性蛋白酶水解乳清蛋白反应体系运行的规律。确定以水解物的-αLA抑制率和-βLG抑制率为响应值的最佳水解条件分别为:pH值为9.60,水解温度为50.4℃,E︰S为5153 U(每克蛋白质中)和pH值为8.46,水解温度为47.6℃,E︰S为5310 U(每克蛋白质中)。

摘要：目的:研究超高压结合不同模拟胃肠消化对于消减乳源酪蛋白抗原性的影响。方法:以乳源酪蛋白为研究对象,采用不同的压力、温度、保压时间、超高压次数来处理酪蛋白,并对处理后的酪蛋白进行模拟成人、婴儿胃肠消化,用间接酶联免疫吸附法来检测经过处理后酪蛋白过敏原消减效果,并且使用正交设计确定消减酪蛋白过敏原最优处理条件组合。结果:在相同超高压处理条件下,对酪蛋白进行模拟成人、婴儿胃肠消化环境,其结果显示成人比婴儿胃肠消化后酪蛋白过敏原消减的效果更好;高压结合模拟成人胃肠消化的最佳条件组合是:350 MPa、温度30℃、保压时间15 min、高压3次,抑制率为22.67%;高压结合模拟婴儿胃肠消化的最佳条件组合是:350 MPa、温度30℃、保压时间20 min、高压1次,抑制率为39.95%。结论:高压结合不同胃肠消化后都可以消减酪蛋白过敏反应,而且结合成人胃肠消化比结合婴儿胃肠消化对过敏原的消减效果更好。