摘要：背景血小板因子4（PF4）是体内和体外检测血小板激活和α-颗粒分泌的标记物。PF4同时也是保存期间释放的主要的CXC细胞因子。血小板保存期间释放的细胞因子是引起非溶血性输血反应的原因。PF4的定量测定需要一种既可靠又灵敏的实验。为了达到这个目的，作者利用商业用的抗人类PF4抗体研制出一种灵敏、经济的三明治酶联免疫吸附实验（ELISA）。研究设计及方法研制的ELISA法用于检测人类血小板或激活的血小板分泌的PF4。

摘要：目的:探讨设计一种教学成本低、便于教学使用、有助于培养医学生综合实验设计能力和提高实验基本操作技能的酶联免疫吸附实验抗原抗体系统。方法:以提纯的人IgG免疫家兔获取兔抗人lgG抗体,再用其包被酶标反应板,以人血清(人IgG)作抗原,用酶标记羊抗人IgG抗体结合抗原及催化底物显色反应。结果:该双抗体夹心法,底物显色反应清楚肉眼即可作出判定,非特异干扰极小。结论:我们设计的酶联免疫吸附实验——双抗体夹心法原理清晰、便于理解和掌握、教学成本较低、结果易于观察、便于教学大量使用。

摘要：液相芯片技术由于其高通量,灵敏度高,信噪比高,液相条件下反应,操作简便,耗时短等优点,已被美国FDA批准成为临床的检测手段。主要介绍了结直肠癌血清肿瘤标记物液相芯片制备条件的优化及其在CEA抗原检测中的初步应用。首先将CEA抗原的捕获抗体与微球载体进行偶联,制备液相芯片,然后对影响反应的微球与抗原的反应时间,生物素化检测抗体的浓度及avidin-PE荧光染料的反应浓度等因素进行正交设计,确定出最优的反应条件;用该液相芯片反应体系检测55例临床样本,与ELISA试剂盒检测结果相比:在同样的样本浓度范围内,两者的检测结果基本一致,但液相芯片检测的浓度范围更大而且液相芯片可将多种肿瘤标记物在一个反应进行检测,节省检测的时间和人力。

摘要：从组织病料中提取CAV核酸,根据GenBank上发表的序列设计两对引物,分别扩增出vp1的139 bp～83 bp和547 bp～1337 bp两个基因片段,然后分别将其充隆到原核表达载体PMXB10上,经PCR和酶切鉴定,证明成功构建了重组表达载体PMXB10-vp1C和PMXB10-vp1D。在0.3 mM的IPTG诱导下,融合蛋白在大肠杆菌ER_(2566)以分泌型得到大量表达,经大量表达后,用几丁质柱挂柱切割纯化后,得到切割蛋白E、F,在Western blot免疫分析印迹中,两组融合蛋白和切割蛋白与CAV阳性血清均能发生特异性反应。用ELISA方法检验,纯化的两组蛋白与CAV阳性血清均能发生特异性反应。用两组蛋白免疫SPF鸡后,用全病毒ELISA试剂盒检测血清呈阳性,表明两组蛋白均可诱发机体产生抗CAV的抗体。

摘要：目的:建立一种CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的快速检测方法。方法:采用梅花形双向琼脂扩散实验检测酶蛋白与抗体反应最适比;根据双抗体夹心法原理设计酶联免疫吸附实验(ELISA)检测试剂盒;平行测定30次BL21-pET-28a-CTX-M-38转化子表达产物,检测批内变异;分别采用所建立的ELISA法与PCR技术对146株产ESBLs大肠埃希菌进行检测,评价方法特异性;对27株非产CTX-M-38型产酶大肠埃希菌进行检测,计算假阳性率;对产CTX-M-38型ESBLs菌株不同时间段培养液进行检测,明确最适检测时间。结果:抗体与4 h培养物反应最适比为1∶64;批内检测结果变异系数为1.525%;PCR及所建立的ELISA法检测产CTX-M-38型ESBLs菌株的检出率分别为4.11%和7.53%(χ2=2.286,P=0.131);交叉反应中存在假阳性现象(1/27);产酶菌株培养4 h后进行ESBLs检测较为合适。结论:所建立的方法适用于临床产CTX-M-38型ESBLs菌株的检测。

摘要：不同蛋白来源的改性纤维成本差异较大,为区分纤维的蛋白来源,建立了一种简单、准确的大豆蛋白复合纤维鉴定方法。根据大豆蛋白现有的氨基酸序列和蛋白交联的位点设计一段特征肽半抗原,将该特征肽段偶联载体蛋白,免疫实验动物,并制备得到特异性单克隆抗体。将优化浓度的抗原包被于酶标版,抗体偶联辣根过氧化物酶,建立针对大豆蛋白复合纤维的酶联免疫吸附实验(ELISA)。该方法采用7M尿素作为提取剂,检出限为1.8%氨基酸含量的大豆蛋白复合纤维,检测时间不超过70 min(含前处理)。该方法对常见的纤维无非特异性识别,纤维染色不会对检测结果造成干扰。

摘要：目的设计并探索开展一个综合性实验,包含抗血清的纯化和酶联免疫吸附实验（ELISA）等知识和技能。方法用盐析法对兔抗人全血清中的Ig G进行粗分离,凝胶过滤层析法脱盐,并用自制ELISA包被板,摸索最佳包被、封闭及酶标二抗显色的条件,对分离产物进行效价和相对纯度的测定。结果 ELISA法测得抗血清分离产物的效价在1：4 000~1：8 000;分离产物中特异性Ig G纯度均高于该稀释度的抗血清。结论该实验易于实施,结果稳定易出,有效利用时间。

摘要：目的:探索疫情期间,医学免疫学实验课网上教学与学生自主实践相结合的教学模式应用情况。方法:选择2018级检验本科4个班级的168名学生试行居家免疫实验课教学,开展“酶联免疫吸附实验”和“胶乳凝集法测类风湿因子实验”线上教学和学生居家自主实验相结合的教学模式,课后对学生进行实验结果考核和教学满意度评价。结果:“ELISA法测表面抗原”实验中,166人检测结果与预估一致,符合率占98.81%;在“胶乳凝集法测类风湿因子”实验中,162人检测结果与预估一致,符合率占96.43%;教学方法的满意度问卷调查,160人认为在疫情期间能够居家实验,总体安排和设计比较满意,占95.24%。结论:新的教学模式取得了良好教学效果,即保障了实验教学任务,又完善了在线实验教学模式,可为今后的实验教学提供参考和依据。

摘要：1肿瘤标志物与检测概述在细胞发生恶性病变过程中,某些在正常细胞中不存在或量很少的物质,可以产生并分泌人体液中.由CA242单克隆抗体识别的CA242抗原决定簇,是存在于多种器官恶性肿瘤中呈粘液型糖蛋白的唾液酸化糖类抗原(命名为CanAg).可用CA242单克隆抗体的免疫学方法检测出来.目前,检测方法有多种,但大多采用酶联免疫吸附实验(ELISA)二步定量的方法,即分光光度仪比色后手工报结果的方式.由于分光光度仪不与计算机连接,则检测数据就不能脱机保存和联网打印,为临床和教学、科研带来不便,且肉眼观测数据和手工填写报告方式落后,易出现人为的错误.为了提高CA242肿瘤标志物报告的先进性、质量和效率,我们通过计算机软件的设计,实现了检测标本的数据采集、传输、储存、处理、联网[1]并自动打印功能,可以完成检测标本的智能化报告的全过程,并应用于临床.