摘要：旨在pet32a(+)原核表达载体中表达金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)中的转肽酶分选酶(srta)并进行鉴定。以合有pet22-srta质粒为模板,设计并合成引物,PCR扩增得到srta_(△n24)和srta_(△n59)基因,经过BamHⅠ、XhoⅠ酶切,克隆入表达载体pet32a(+)中,构建重组载体pet32a.srta_(△n24)及pet32a.srta_(△n59),并转化入大肠杆菌BL21(DE3)。经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting对表达产物分别进行分析和鉴定。然后对重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达条件进行了优化。结果显示重组载体pet32a.srta_(△n24)和pet32a.srta_(△n59)分别表达出相对分子量为约42 kD和37 kD的融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting检测显示其分子量与预期的大小相符合。成功构建了重组质粒pet32a.srta_(△n24)和pet32a.srta_(△n59),并且在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效融合表达。