摘要：基于菌株L10608所产天然酶水解木聚糖底物时具有良好的水解木聚糖底物特性,通过设计简并引物,经巢式PCR克隆得到L10608菌株木聚糖酶基因全长(xyn-GH10与xyn-GH11),并对其进行生物信息学分析。由分析可知酶xyn-GH10全长1 469 bp,分子质量:50.677 ku;理论等电点pI:7.98;预测该木聚糖酶的信号肽为MGIQALPRAAVRQKLRTPLPALAAGVLGLTAALVPPTNADA;该木聚糖酶蛋白序列具有明显的第10族糖苷水解酶的八叠桶型保守区域,且能编码一段由108个氨基酸组成的RicinB-lectin非催化结构域。木聚糖酶xyn-GH11全长729 bp;分子质量:24.003 ku;理论等电点pI:8.98;预测该木聚糖酶的信号肽为MHQDGSQQDRT QNPAPFGGLSRRGFLVGGTGAAALAAGSGLLLPGTAHAA。该木聚糖酶蛋白序列具有明显的第11族糖苷水解酶的“右手半握状”保守区域。xyn-GH10与xyn-GH11基因经原核表达后其中木聚糖酶xyn-GH10酶活为160 U/mL,木聚糖酶xyn-GH11酶活为55 U/mL。

摘要：看家基因的扩增与测序是进行多基因系统进化分析首先需要解决的问题。针对链霉菌这一群高(G+C)mol%革兰氏阳性细菌,选定4个看家基因:atpD、recA、rpoB和trpB,利用NCBI数据库中已有的2个链霉菌和3个分枝杆菌的全基因组序列,以及另两个链霉菌的recA基因序列,通过软件分析设计了各基因的扩增和测序引物,并优化了扩增反应条件。从所试验的55株链霉菌中,均特异地扩增出了上述4个基因的片段,并成功进行了序列测定,验证了所设计引物的实用性。所归纳的引物设计方法可用于高(G+C)mol%革兰氏阳性细菌的其它看家基因,以促进多基因系统进化研究的开展。

摘要：自从Waksman和Henrici[1]于1943年建立链霉菌属(Streptomyces)以来,链霉菌已成为细菌域中种的数量最大的一个属.目前,包括出现在专利中的种已经超过3000个,至1996年已有有效描述的种464个和亚种45个[2].由于链霉菌是产生抗生素等生物活性物质种类最多的一类微生物,因此至今各国学者仍在不断研究设计新的分离、培养、鉴定和分类方法,以指导新的天然生物活性物质的寻找.但长期以来,国际上因缺少可以接受的统一的分类鉴定标准,导致了链霉菌分类中的混乱.

摘要：蓝色素作为3种基色之一,具有广阔的应用空间。目前发现的天然蓝色素种类较为稀少。本研究从土壤中筛选出一株蓝色组分产量较高的链霉菌A1013Y并进行初步鉴定,优化其产蓝色组分的液态发酵条件。根据其形态、培养特征、基因系统发育树等鉴定该产蓝色组分菌株为脱叶链霉菌组。在单因素发酵条件优化基础上,采用Plackett-Burman试验设计对碳源含量(葡萄糖)、氮源含量(大豆蛋白胨)、初始pH值、培养温度、培养时间、接种量及转速7个因素进行考察,进而利用Box-Behnken对筛选出的碳源含量(葡萄糖)、培养温度、培养时间3个因素做响应面分析。结果表明,葡萄糖含量为2.7%,在23.5℃条件下摇瓶培养93 h,色价达304.67 U/mL,比优化前的46 U/mL提高7倍,具有较大的应用潜力。

摘要：链霉菌 139能够产生一种新的胞外多糖 139A ,该多糖具有抗类风湿性关节炎的活性。为研究多糖 139A的生物合成基因簇 ,首要策略是克隆到在多糖 139A的生物合成中起关键作用的引导糖基转移酶基因。根据其他几个种属的糖基转移酶氨基酸序列的两个保守区域设计简并引物 ,通过PCR方法扩增出相应的DNA片段作为探针 ,从链霉菌 139基因组文库中分离到引导糖基转移酶基因ste5 ,并定位于约 32kb的基因簇上。序列分析发现其蛋白序列与引导糖基转移酶具有较高的同源性 ,其C 端含有A ,B和C 3个保守区 ,N 端具有 5个跨膜区。引导糖基转移酶基因阻断突变株不能够产生多糖 139A表明其参与多糖 139A的生物合成。

摘要：以链霉菌(Streptomyces sp.)C-5为实验材料,稻草粉为唯一诱导碳源培养基,采用液体摇瓶发酵法,对其产纤维素酶进行了单因素优化试验和四因素三水平正交设计优化试验。C-5的最佳培养条件为:稻草粉5%(w/v),豆饼粉1.5%(w/v),初始pH为7.5,培养温度31℃。在此最佳培养条件下C-5的CMCase酶活达到了41.37U,是优化前CMCase酶活的3.32倍。链霉菌C-5的产酶进程长,酶活维持较高水平可达10d以上。因此,利用该菌生产纤维素酶具有一定的优越性,对提高秸秆的资源利用率有良好的应用前景。

摘要：目的采用响应面法(RSM)优化链霉菌D-8菌株产抑菌物质的发酵条件。方法采用单因素试验确定由章鱼肠道获得的链霉菌D-8菌株产抑菌物质的最佳碳源与用量、Na Cl浓度及培养时间。以金黄色葡萄球菌为指示菌,双层平板透明圈法测定发酵液的抑菌活性,采用响应面Box-benhnken试验设计,对链霉菌D-8菌株产抑菌物质的工艺条件进行优化。结果建立了该菌株抑菌性随可溶性淀粉含量、Na Cl浓度及培养时间变化的多项二次回归方程,得出该菌株产抑菌物质的最佳工艺条件是可溶性淀粉2.44%,氯化钠浓度3.50%,培养时间为100h,在此条件下,透明圈直径达到2.51cm,比优化前提高了2.21倍,与预测值(2.42cm)较为接近。结论实验结果表明预测模型可靠,用该模型对链霉菌D-8菌株的抑菌活性进行预测是可行的。

摘要：通过正交设计试验 ,找出利用链霉菌和麦草基质发酵生产木聚糖酶的试验条件。培养基 (g/L) :麦草粉 ,4 5 ;(NH4 ) 2 SO4 ,7.5 ;酵母膏 ,8;K2 HPO4 ·3H2 O ,1;MgSO4 ·7H2 O ,0 .5 ;NaCl,0 .3。接种量为 5 .0× 10 8个孢子 / 5 0mL培养基 ,振荡培养 (12 0r/min)

摘要：链霉菌天然产物因其显著的生物活性一直是新药开发的重要来源,测序技术的发展揭示了链霉菌强大的生物合成潜力。链霉菌中多数次级代谢生物合成基因簇(biosynthetic geneclusters,BGCs)在常规实验条件下表达水平低甚至不表达,这使得相关天然产物的开发受到阻碍。原位激活和异源表达是挖掘链霉菌天然产物的有效方式,启动子作为基因表达的“开关”,在其中发挥着重要作用。因此对启动子的研究可以有效地促进BGCs的激活,从而挖掘新天然产物。本文重点阐述了链霉菌启动子的结构特征及其挖掘表征和设计构建的思路,并列举了链霉菌启动子在天然产物开发中的应用,有望为链霉菌生物合成路径的优化以及全新生物活性物质的发现提供思路和方法学参考。

摘要：链霉菌M1033染色体DNA经BamH Ⅰ酶解后电泳,Southern转移。根据自测的链霉菌ML033 D-木糖异构酶氨基酸序列设计合成寡聚核苷酸探针X-2、X-3,以X-2、X-3及Ampullariella sp3876 D-木糖异构酶基因(1.17kb)为探针进行杂交,确定与上述探针杂交最强处在15kb左右。从胶上分离出9—20kb大小的片段,克隆到EMBL 3载体中,经杂交筛选后,得到0.6%的阳性噬斑,其插入大小为13kb。将插人DNA的Sal Ⅰ酶解片段(2.5kb)进一步亚克隆于pUC18,得到重组质粒pUB 1,经酶解图谱、部分序列分析和互补实验确定pUB1含有完整的M1033