摘要：山东省食品发酵工业研究设计院贺家明等人1979年从海南岛分离得到嗜热链霉菌 M1033菌株。经多次实验证明,该菌株产生葡萄糖异构酶(胞外分泌型)活力高达310u/ml 发酵液,且具有一定的热稳定性,是国内有工业生产价值的葡萄糖异构酶生产菌。目前,此酶已被用于葡萄糖异构酶的蛋白质工程研究。作者对该菌株进行了鉴定,现将结果报道如下。

摘要：采用单因素和正交试验设计,通过摇瓶培养对链霉菌菌株F-15产生抑菌活性物质的发酵条件进行优化。单因素试验结果表明,其最佳发酵条件为:玉米粉作碳源,KNO3作氮源,初始pH为7,培养时间为5 d,250 mL的摇瓶装液量为60 mL,接种量为150μL。优化后的培养基配比为:玉米粉3.0%、KNO33.0%、MgSO40.2%、NaCl 0.2%。

摘要：由链格孢引起的梨黑斑病是梨树生长及采后贮藏过程中的重要病害,其防治主要依赖于化学杀菌剂,亟需开发安全高效的生物杀菌剂。我们前期筛选获得的奥唐纳链霉菌Streptomyces odonnellii SZF-179菌株对梨黑斑病菌具有较强拮抗活性。为提高其发酵水平,探究其在梨黑斑病生物防控中的应用潜力,采用响应面法对该菌株的发酵培养基进行了优化。通过单因素试验确定最佳摇瓶发酵条件、最适碳氮源与无机盐组合,Plackett-Burman试验筛选出影响菌株发酵上清液抑菌活性的3个显著因子:麦芽糖、酵母膏和碳酸钙;再结合最陡爬坡试验、Box-Behnken设计及响应面法拟合显著因子与菌株发酵上清液抑菌率的非线性方程求解,得到优化的发酵培养基配方,其组成为麦芽糖15.86 g/L、土豆淀粉10.00 g/L、酵母膏8.15 g/L、芝麻粕5.00 g/L、硫酸铵0.50 g/L和碳酸钙0.20 g/L。此模型预测发酵液上清液50倍稀释液抑菌率为70.39%,验证值为70.51%,预测值与验证值之间吻合较好,较优化前发酵液上清液50倍稀释液抑菌率(30.70%)提高了约1.3倍。优化后发酵培养物对梨黑斑病的田间防治效果达到61.21%,并使梨树的落叶率降至14.56%,显著低于对照的44.25%。本研究为新型绿色高效梨黑斑病生物杀菌剂产品的研制提供重要的技术支撑。

摘要：【目的】通过响应面法优化链霉菌(Streptomyces sp.)WS-13394株发酵培养条件及培养基成分,以提高菌株产支链蒽醌的水平,为该化合物在畜牧业领域的应用提供技术支撑。【方法】采用单因素试验确定链霉菌WS-13394株产支链蒽醌的最佳摇瓶发酵条件及最适碳氮源和无机盐组合,利用Plackett-Burman试验筛选出影响摇瓶发酵产量的显著因子;结合最陡爬坡试验、响应面设计分析,拟合显著因子与支链蒽醌产量的非线性方程,从而获得优化的菌株发酵培养基配方。【结果】优化后的最佳配方为可溶性淀粉28.12 g/L、鱼粉10.00 g/L、酵母膏6.34 g/L、碳酸钙0.71 g/L、硫酸镁0.50 g/L、磷酸氢二钾0.50 g/L,此模型预测发酵液支链蒽醌产量为408.35 mg/L。应用此优化组合进行摇瓶发酵试验,支链蒽醌产量为411.73 mg/L,产量较优化前(89.70 mg/L)提高了3.59倍。【结论】通过响应面优化获得了显著提高链霉菌WS-13394株产支链蒽醌的摇瓶发酵培养基配方,试验结果为该类化合物的抗菌活性机制研究及其在动物模型中的效果评估提供了技术支撑。

摘要：对分离自浓香型白酒发酵糟醅、窖房和曲房空气中的4株链霉菌挥发性产物进行GC-MS分析,发现4株菌均可产丁酸、己酸、丁酸乙酯、己酸乙酯、乳酸乙酯及糠醛等对浓香型白酒风味有重要影响的醇溶性和水溶性挥发性产物,其中乳酸乙酯、己酸为主要产物,菌株W8A-13挥发性产物中乳酸乙酯占70.8%,菌株Z9A-32的挥发性产物中己酸占40.8%,丁酸乙酯、己酸乙酯在4株菌挥发性产物中含量均较低,没检测到乙酸乙酯。经16S rDNA序列鉴定,4株放线菌分属于Streptomyces mutabilis,***,***,***,为常见土壤放线菌。结果表明,这4株链霉菌在白酒酿造中有一定应用价值。

摘要：采用平板划线,摇瓶复筛等方法从福清近海海域泥土中分离筛选到一株林可霉素产率较高的链霉菌株6204;采用单因素试验和正交设计试验,从葡萄糖添加量、磷酸二氢钾条件两及金属离子对菌株6204产林可霉素影响,并对其发酵条件进行优化。结果表明,最适的发酵条件为葡萄糖添加量10.0%,镁离子质量浓度0.10 g/L,磷酸二氢钾添加量0.020%,在此优化发酵条件下,菌株6204产林可霉素的含量可达3 907.738μg/m L,与优化前相比较,林可霉素的含量提高了1 823.082μg/m L。

摘要：通过设计简并引物和构建基因组文库的方法从链霉菌Streptomycessp.S9中克隆得到-βl,4-木聚糖酶基因xynBS9。该基因全长1 023 bp,编码340个氨基酸。将不带原基因信号肽编码序列的xynBS9以正确阅读框架克隆到表达载体pET-22b(+)上,并在大肠杆菌BL2 l(DE3)中诱导表达。重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和疏水柱纯化后达到电泳纯。酶学性质分析表明,重组木聚糖酶最适温度为60℃,最适pH为6.5,在碱性条件下具有良好的稳定性。

摘要：将链霉菌菌株Streptomycessp .纯化后 ,测得其葡萄糖异构酶的比活力为 0 .4 1 4u/mL ,使用苯酚氯仿法抽提到的基因组DNA浓度较低 ,RNA和蛋白质较多 ,但用大量法时仍可得到大量的DNA .使用试剂盒法得到的基因组DNA浓度较大 ,但仍有大量RNA存在 .由亚精胺法得到的基因组DNA浓度较好 ,RNA很少 .自行设计的改进法得到的基因组DNA ,量特别大 ,纯度很高 ,DNA大小集中在 3 0kb左右 ,RNA很少 ,非常适用于相应的基因工程操作 .

摘要：涉及微生物代谢物生产成功的工业过程有赖于一种广泛的菌种改良程序，因为野生菌种通常以极低浓度产生所需的代谢物。对成千上万的诱变细胞群体菌落进行筛选是菌种改良程序常用的方法。另一条途径是设计合适的选育条件。

摘要：目的:采用统计实验方法优化培养条件,以增加链霉菌S-159抗真菌活性成分的产量。方法:首先采用Plackett-Burman设计以评估11个培养条件(包括2个虚拟变量)的显著性,发现大豆粉添加量、葡萄糖添加量、发酵时间和初始pH值为影响抗真菌活性的最显著因素。接下来通过最速上升路径分析确定进一步优化的中心点,并使用响应面法(RSM)中的中心复合设计(CCD)进一步优化获得的4个显著因素。结果:实验结果符合二阶多项式模型,其确定系数(R^(2))为0.986,调整后的确定系数(Adj R^(2))为0.974。求解方程得到优化组合条件为大豆粉添加量23.53 g/L、葡萄糖添加量17.04 g/L、发酵时间60.20 h和初始pH值7.61,抗真菌活性实测值为410.5 U/mL,与该模型预测的413.6 U/mL基本一致,优化后链霉菌S-159代谢产物的抗真菌活性提高了1.7倍。结论:统计实验方法可用于链霉菌S-159的发酵培养条件优化,研究结果为链霉菌S-159的大范围应用提供了数据基础。