摘要：植物是人类所需大部分营养物质的主要来源 ,植物产品的营养品质直接影响着人类的健康。分子克隆和遗传转化技术的发展为改良植物的营养价值开辟了新途径。植物营养价值的转基因改良已在改进作物蛋白质含量及品质、淀粉和油脂成分及品质 ,提高抗氧化物水平 (如类胡萝卜素、类黄酮等 ) ,培育具有医疗效应的营养品质等方面取得了可喜的进展。迄今 ,已获得许多营养品质改良的转基因作物品系。这些转基因作物经过一系列的安全性及对人类营养有效性的验证后 ,可直接食用 ,或应用于开发具有特殊营养品质和保健作用的“功能食品”。我们实验室开展了大豆油脂改良研究 ,构建了能特异抑制大豆FAD2 1基因表达的锌指转录因子 ,获得了油酸含量显著提高的转基因材料。初步结果表明锌指转录因子的分子设计是改良植物油脂代谢的一条可行途径 。

摘要：目的通过基因沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),研究其对结直肠癌SW480细胞的生长增殖、侵袭迁移能力,及对锌指转录因子(Snail)与上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响和作用。方法利用氯化钴(CoCl2)化学诱导建立结直肠癌SW480细胞的缺氧模型,设计合成HIF-1α的小干扰RNA(HIF-1α-siRNA)并将其转染入细胞内。通过四甲基偶氮唑兰(MTT)法检测细胞的体外生长增殖活性,体外侵袭实验(Transwell法)检测细胞的体外侵袭迁移力,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫蛋白印迹(Western blot)检测细胞中HIF-1α、Snail及E-cadherinmRNA与蛋白的表达情况。结果 MTT法检测结果显示,缺氧条件下,基因干扰组的OD值及细胞存活率均降低(P<0.05);体外侵袭实验结果显示,基因干扰组侵袭迁移率降低(P<0.05);RT-PCR与Western blot检测结果显示,基因干扰组中HIF-1α和Snail mRNA和蛋白的表达明显降低,E-cadherin mRNA和蛋白的表达明显增强(P<0.05),对3种因子进行相关性分析,结果显示HIF-1α和Snail的表达呈正相关,HIF-1α和Snail均与E-cadherin的表达呈负相关(P<0.05)。结论 RNA干扰沉默HIF-1α基因可抑制结直肠癌SW480细胞的体外生长增殖和体外侵袭迁移能力,其机制可能是由于基因沉默HIF-1α导致细胞中Snail低表达,E-cadherin高表达,抑制了EMT发生、发展所致。

摘要：目的研究基因沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和不同缺氧条件下HIF-1α、锌指转录因子(Snail)及上皮钙黏蛋白(E-cadherin)在SW480细胞中的表达,及其对生长增殖和侵袭迁移力的影响。方法构建SW480细胞缺氧模型,设计合成HIF-1α的小干扰RNA并将其转染入细胞内于无氧环境培养。采用MTT法检测生长增殖活性,Transwell法检测体外侵袭迁移能力,RT-PCR检测HIF-1α、Snail及E-cadherin mRNA的表达。结果 MTT显示无氧组和阴性对照组生长增殖活性增加,基因干扰组降低(P<0.05);体外侵袭实验显示无氧组、阴性对照组侵袭迁移率增加,基因干扰组降低(P<0.05);RT-PCR检测显示无氧组、阴性对照组HIF-1α和Snail mRNA表达升高,E-cadherin降低,基因干扰组HIF-1α和Snail表达降低,E-cadherin升高(P<0.05),且相关分析显示HIF-1α与Snail呈正相关,HIF-1α与E-cadherin呈负相关。结论缺氧及HIF-1α可促进SW480细胞株的体外生长增殖活性,增强其体外侵袭迁移能力,基因沉默HIF-1α可抑制其体外生长增殖与侵袭迁移。