摘要：在前期益生性实验过程中,驯化后的长双歧杆菌F16菌株具有显著的降胆固醇作用,对人体健康具有重要意义。为探讨其降解机制,实验测定了其产胆盐水解酶(Bile salt hydrolase,BSH)能力并鉴定了胆盐水解酶基因。为提高F16菌株的降胆固醇效果,在单因素实验的基础上,利用Box-Behnken中心组合原理设计3因素3水平响应面实验,以葡萄糖质量浓度、蛋白胨质量浓度和接种量为自变量,BSH活性OD_(570)为响应值,确定了F16菌株产BSH的优化发酵条件:葡萄糖质量浓度为10.05 g/L、蛋白胨质量浓度为15 g/L、接种量为1.05%(OD_(600)为1),既定条件下BSH活性OD_(570)可达到0.896,酶活可达到优化前的1.8倍。对F16菌株降解胆固醇的降解率进行了测定,优化后在48 h内的胆固醇降解率可达到72.6%,约为优化前的1.6倍。实验结果表明F16菌株的益生性能在食品、保健和医药等领域具有潜在的应用前景。

摘要：传统筛种方法具有随机性、盲目性,而PCR筛菌,增加了目的性和效率。在基因序列数据库中查找益生双歧杆菌的16S rDNA共有序列,找出它们共有的特异性序列,设计了PCR引物。平板培养分离,初步筛选双歧杆菌菌落。根据细菌16S rDNA和23S rDNA两侧高度保守区域设计通用引物,提取菌落基因组DNA,扩增16S-23S rDNA间区序列,并送测序。通过序列同源性比对分析,鉴定、筛选到人体长双歧杆菌。

摘要：为了提高长双歧杆菌发酵液中的活菌数,对其增殖培养基进行响应面优化。通过单因素试验筛选出长双歧杆菌的最佳碳源为乳糖,并发现低聚木糖、菊糖、低聚异麦芽糖、低聚果糖、苯丙氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、谷氨酸及赖氨酸均能显著促进长双歧杆菌的生长。利用Design Expert 8.06软件设计Plackett-Burman试验筛选出影响长双歧杆菌生长的3个最重要因子,通过Box-Behnken试验及响应面分析确定3个因子的最佳添加量为:低聚木糖1.7g/L、菊糖3.6g/L、脯氨酸0.4g/L,用优化后的增殖培养基培养长双歧杆菌,18h后其活菌数达(1.75±0.02)×109CFU/mL,比优化前提高了95.64%。

摘要：目的:试验不同的保护剂成分配方,探究分离自婴儿粪便的2种益生菌(嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌)在常温条件下保持较高活性的可行方法。方法:利用均匀设计实验方法设计保护剂配方,用于保存特定高活性高稳定性的菌种,在不同时间点检测活菌数,分析数据得出最佳保护剂成分比例。结果:嗜酸乳杆菌10A31保护剂最佳配方为:海藻糖∶谷氨酸∶天冬氨酸=5∶24∶24;长双歧杆菌11A11保护剂最佳配方为:海藻糖∶谷氨酸∶麦芽糖=34∶11∶10;用最佳保护剂配方保存后,嗜酸乳杆菌10A31在200 d时的菌落计数结果为3.87×109CFU/g,长双歧杆菌11A11在160 d时为1.53×109CFU/g,均具有较高的活性。结论:最佳保护剂配方使2个菌种常温保存期至160 d。

摘要：根据细菌保守序列设计一对通用引物,扩增细菌16S rDNA序列,作为阳性标记;根据长双歧杆菌菌株的16S rRNA和23S rRNA之间的间区基因序列设计定性PCR引物。用BBL琼脂平板对长双歧杆菌混合发酵的酸奶进行培养计数,随机挑选部分长出的菌落,提取DNA做PCR鉴定。将PCR技术与传统平板计数技术结合起来,初步建立酸奶中长双歧杆活菌计数方法。抽提方法操作简便、高效、灵敏,决定着PCR计数方法的准确高效,本研究着重研究了菌体DNA抽提方法的影响因素,以及抽提方法通用性,同时也研究了PCR引物的特异性。将PCR技术与传统平板计数技术结合起来,初步建立酸奶中长双歧杆活菌计数方法。

摘要：以寻求提高我国传统发酵型腌渍蔬菜益生作用的有效途径为目的,采用平板划线分离的方法从典型泡菜产品中分离筛选乳酸菌,考察其在模拟人体胃肠环境条件下的耐受能力,选择耐受力强的菌株进行双歧杆菌增殖试验和菌株分类鉴别。结果显示:2株乳酸菌在pH为2.5-4.5的模拟胃液环境中停留2h活菌数仍达106CFU/mL以上,在0.3%的模拟肠道胆汁环境停留4h活菌数仍保持在初始状态;发酵时间6h内乳酸菌株对长双歧杆菌生长有促进作用。经形态特征观察、气相色谱检测代谢有机酸种类和热变性温度法测定DNA中G+C(鸟嘌呤+胞嘧啶)含量,确认筛选出的优质菌株为同型发酵乳杆菌属。

摘要：多层滴丸是可以使双歧杆菌活菌到肠的制剂技术,但现有的检测手段尤其是样品前处理的方法无法对其含有的活菌数进行有效检测。为此,我们优化了长双歧杆菌R175活菌数检测方法,使其可以有效检测。采用了基于中心复合设计的响应面法优化了影响样品前处理结果的因素包括均质速度、均质时间、水溶时间。优化后的检测方法如下:使用Mitsuoka’s buffer缓冲液,对样品进行水浴和均质处理,具体参数为37℃水浴11 min 44 s,12462 r/min均质5 min 17 s,并采用TOSP培养基。利用响应面法成功地优化了多层滴丸中长双歧杆菌R175活菌数检测方法,可以有效地用于多层滴丸中长双歧杆菌R175的活菌计数。