摘要：背景:从以往的文献来看,阴茎海绵体平滑肌细胞的原代培养存在着制作时间长,纯度不高以及易被成纤维细胞污染等诸多缺点。目的:探索兔阴茎海绵体平滑肌细胞的纯化培养技术及纯度鉴定方法。设计、时间及地点:对照实验,于2007-10/2008-03在上海交通大学附属第六人民医院泌尿外科,上海市组织工程研究与开发中心完成。材料:成熟的雄性新西兰大白兔5只,体质量2.5～2.8kg。方法:取雄性新西兰兔新鲜的阴茎组织,利用高浓度的胶原酶消化法结合差速贴壁技术对海绵体平滑肌细胞进行纯化培养。以同期兔成纤维细胞作为对照参考。主要观察指标:以四甲基偶氮唑盐分析细胞生长特性;以平滑肌肌动蛋白、肌球蛋白、结蛋白免疫荧光鉴定海绵体平滑肌细胞;以流式细胞仪检测P2及P5代细胞α-肌动蛋白、肌球蛋白、结蛋白阳性率变化情况。结果:培养细胞四甲基偶氮唑盐显示细胞指数增长期为6d左右,随后进入平台期。α-肌动蛋白、肌球蛋白、结蛋白均呈阳性反应,同期成纤维细胞仅α-肌动蛋白显示阳性结果。第2代细胞表达α-肌动蛋白、肌球蛋白、结蛋白阳性率分别65.3%,42.2%,62.3%。经过反复多次的纯化技术至第5代时,上述指标阳性表达率分别上升为92.8%,72.7%,78.1%。结论:通过高浓度的酶消化法及差速贴壁技术可获得高纯度的阴茎海绵体平滑肌细胞,肌球蛋白、结蛋白相对于α-肌动蛋白可以成为鉴定海绵体平滑肌细胞的特异性指标。

摘要：目的:利用小干扰RNA(siRNA)抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接蛋白connexin43(Cx43)的表达和检测细胞间间隙连接通讯功能,探讨该技术在阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接和阴茎勃起功能研究中的应用。方法:利用Ambion公司设计软件,构建靶向人Cx43基因的siRNA重组质粒,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞48h后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测Cx43基因和蛋白的相对表达水平、划痕标记荧光染料传输技术检测细胞间间隙通讯功能,并分别与siRNA阴性对照、空白对照组比较。结果:酶切和测序证实siRNA真核表达载体构建成功。siRNA重组质粒转染细胞后的Cx43 mRNA和蛋白相对表达水平分别为(0.45±0.08)%、(0.56±0.06)%,与siRNA阴性对照组(0.72±0.04)%、(0.80±0.08)%和空白对照组(0.74±0.09)%、(0.77±0.11)%相比,差异均有显著性(P(0.05);转染后的细胞间间隙连接通讯功能也显著降低。结论:siRNA能有效抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞Cx43的表达和阻断间隙连接介导的间隙连接通讯功能。

摘要：时下,在商业运作中,流行一个"炒"字。推销产品,自然离不开广告,以至出现中央电视台天价的"标王";当红歌星"上榜",明眼人知道,"项庄舞剑,意在沛公",目的是进行"包装",然后推向娱乐市场:好莱坞进口的"大片"上市,也先要铺天盖地在媒体进行轮番"轰炸"……然而奇怪的是,有一种药品虽然尚未上市,甚至还没有经过国家卫生部进行药品审批,却已经被众多媒体"炒"得一团火热。尽管在媒体中,对它是贬多于褒,一再让国人小心,防止用药不当,但是这种药品仍然不胫而走,在沿海许多城市的黑市交易中,价格扶摇直上,一枚药片从二三百元,一路飘升到五六百元,甚至700元才能买到一粒。一位朋友告诉我,他从国外带回一瓶,共100粒,赚了一万元,简直像天方夜谭中的神话一般,让人难以置信。它的药品名是"西多芬"。

摘要：目的探讨一种操作简便而有效地修复阴茎皮肤缺损的手术方法.方法自1995年1月以来,应用阴囊皮瓣转移修复阴茎皮肤感染坏死所致皮肤缺损8例.其中6例为阴茎全周皮肤缺损,2例为2/3周皮肤缺损.手术切除创面肉芽组织,显露正常的阴茎海绵体或尿道海绵体筋膜,使阴茎充分伸展,设计、解剖、形成阴囊皮瓣,旋转转移至阴茎皮肤缺损区,边缘缝合固定.对阴囊皮肤缺损较大者,同期应用股内侧局部皮瓣转移修复阴囊皮肤缺损.结果本组8例手术全部成功,术后3～12个月随访,阴茎外形良好,生理功能恢复正常.结论阴囊皮瓣转移是一种较好的修复阴茎皮肤缺损的手术方法,具有操作简便、手术Ⅰ期完成、术后阴茎外形和生理功能恢复均佳的优点,值得推广应用.

摘要：男性阴茎勃起机能障碍,俗称阳萎,其发病率占总人口的60％。我国尚无确切调查统计,估计发病者亦不少,而且青年亦有。我国采用传统医药治疗,各种秘方相继问世,但疗效不佳。1982年法国Virag首先倡用药物注射疗法十余年来,并发症较多,很多病员不得已中止治疗。国外首先美国设计并生产一种负压装置治疗阳萎,并同时临床应用,1987年进行报告。