摘要：目的　建立一种采用PCR技术对降解dna样本进行性别鉴定的新方法。　方法　采用针对amelogenin基因X染色体外显子 3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1,对在室温环境下放置 5～ 15年的男、女血痕标本各 5 0例、毛发各 2 0例、骨骼各 2 0例以及现场提取 5 - - 2 0天的男、女腐败肌肉各 10例标本中提取的降解dna样本进行扩增。用PAG( 9%T ,3 %C)电泳、银染显带检测扩增产物。　结果　所有样本均得到正确结果 ,男性检材表现为 83bp的Y特异性及 80bp的X特异性 2条谱带 ,而女性检材仅有 1条 80bp的X特异性谱带。　结论　用针对amelogenin基因X染色体外显子 3bp缺失设计的引物AMELU1及AMELD1鉴定性别的方法灵敏、可靠、方便 ,是降解dna检材性别鉴定十分理想的方法。

摘要：目的利用多重PCR结合飞行质谱技术(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)检测40%非缓冲甲醛固定组织中降解dna的SNP位点,提高微量降解检材dna的检测时限,评估法医学应用效能。方法提取保存在非缓冲40%甲醛溶液中不同天数的人体组织dna,用MALDI-TOF MS技术平台检测自行设计的67个X-SNP位点。STR和mini STR位点的检测时限评估用Amp FSTR identifiler和Amp FSTR Mini Filer试剂盒完成。结果 40%非缓冲甲醛固定组织的STR和mini STR位点检测时限分别为7 d和15 d;用MALDI-TOF MS技术平台检测67个X-SNP位点,检测片段均小于105 bp,其中44个独立遗传X-SNP位点的检测时限可达44 d。结论 MALDITOF MS技术平台检测X-SNP位点可明显提高降解dna样本的检测能力。

摘要：目的建立非CODIS系统miniSTR以及Amelogenin基因座的荧光复合扩增体系。方法筛选8个多态性高的非CODIS系统miniSTR基因座(D20S1082、D6S474、D12ATA63、D9S1122、D2S1776、D1S1627、D3S4529、D2S441),并结合Amelogenin基因座设计荧光标记引物,优化反应条件,建立复合扩增体系。应用该体系对204份广州地区汉族血样,30个家系样本,及30份降解检材进行检测。结果建立的荧光标记8个miniSTR及Amelogenin复合扩增体系分型结果明确,稳定性好,且所有片段长度均少于200bp,提高了降解检材的分型成功率。在广州汉族人群的累积个人识别率为0.99999993,累积非父排除率为0.992287。结论构建的miniSTR荧光复合扩增体系,操作简便,分型准确,重复性好,对降解检材有效,易于在法医实验室推广应用,可对现有试剂盒起补充作用。

摘要：短串联重复序列(STR)是法医dna鉴定中最常用和最重要的遗传标记,但是对于降解和微量的dna样品,经常得不到完整的dna分型甚至分型失败。MiniSTR技术通过设计更靠近重复序列的引物,得到更短一些的STR基因座,提高了降解和微量检材的dna分型成功率。本文综述了miniSTR技术的研究进展,以服务于法医学实践。

摘要：STR遗传标记已广泛运用于法医学领域的个人识别及亲子鉴定。常规STR分型试剂盒主要适用于片段长度为100～450bp长度的dna，对于dna大部分已经断裂的严重降解的样品，常常不能得到理想的分型结果。miniSTR技术是在设计引物时尽可能接近核心重复序列的侧翼序列，缩短扩增片段长度以提高小片段或是降解dna的检测成功率。本研究选用美国Hill等开发的D1S1677、D2S441、D6S1017、D9S2157和D4S2364基因座来研究华东地区群体遗传多态性及在高度降解检材中的运用。

摘要：目的解决严重降解(低于300bp)dna检验问题,提高降解dna的检出率。方法重新设计引物,减小扩增产物片段长度,用荧光标记短片段STR复合扩增体系进行dna检验,扩增结果与用Identifiler试剂盒扩增出的结果进行比较。结果用荧光标记短片段STR复合扩增系统对实际案件中的高度降解dna检材进行检验,可以获得满意分型。结论该系统可用于严重降解dna检材的检验工作。

摘要：目的:构建DYS456,DYS392,DYS439,Y-GATA-H4等4个Y-mini STR基因座复合扩增体系,评价其检测敏感度、数据库兼容性和对降解检材的分型能力。方法:设计4个Y-mini STR的引物,用FAM、JOE、ROX、TAMRA分别标记其上游引物,构建复合扩增体系。利用本体系的引物扩增稀释过的Y23试剂盒的ladder,制备等位基因分型标准物。比较该体系与Promega Power PlexY23试剂盒在普通检材、降解检材的分型能力、敏感度和分型结果。结果:同一样本体系分型结果和商业化试剂盒Y23 STR分型结果相同,4个Y-mini STR复合扩增体系和对降解检材的分型成功率更高,敏感度一致,具有数据库兼容性。结论:本研究中的4个Y-mini STR复合扩增体系对降解检材的检测具有应用价值,敏感性较好,具有数据库兼容性,可以作为对降解检材分型时商业化试剂盒的补充。