摘要：雷公藤红素是来源于传统中药雷公藤的五环三萜类天然活性化合物,具有抗肺纤维化作用,但是其对于肺成纤维细胞功能影响、作用靶点和机制尚不明确。本研究发现雷公藤红素具有抗成纤维细胞-肌成纤维细胞转化(fibroblast-myofibroblast transformation,FMT)功能,表现为显著抑制转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)诱导的α-平滑肌肌动蛋白和一型胶原表达。前期研究提示热休克蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)可能是雷公藤红素抗FMT的作用靶点,本研究通过细胞热迁移实验、表面等离子共振实验确证了雷公藤红素与HSP60相互作用,并且发现二者相互作用K_(D)值为8.59μmol·L^(-1)。进一步研究显示,使用siRNA在人肺成纤维细胞(human pulmonary fibroblast,HPF)敲低HSP60后,HPF对于TGFβ1的敏感性显著增加,表现为相同浓度TGFβ1刺激下,敲低组FMT程度显著高于对照组,此效应在中低剂量TGFβ1处理组尤为明显。并且雷公藤红素抗FMT效果在HSP60敲低后显著减弱。以上结果表明,HSP60参与维持成纤维细胞静息态,并且雷公藤红素抗FMT效果依赖于HSP60。机制研究方面,在HSP60敲低后雷公藤红素的自噬促进和抗氧化应激效果显著减弱。综上所述,雷公藤红素通过直接作用于HSP60,抑制肺成纤维细胞发生FMT,从而发挥抗肺纤维化功能。

摘要：目的通过正交试验筛选雷公藤红素纳米结构脂质载体最优处方及工艺。方法采用正交试验,以溶剂扩散法制备雷公藤红素纳米结构脂质载体,并以粒径、电位、包封率等为指标优选最佳参数并考察其理化性质。结果雷公藤红素用量为15 mg,磷脂及维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)的用量均为30 mg,搅拌温度为(75±2)℃时为最优处方及工艺,此优化条件下制备的雷公藤红素纳米结构脂质载体多为类球形粒子,平均粒径(116.5±10.2)nm,粒径分布为0.119±0.036,zeta电位为(-24.7±4.7)mV,包封率为(73.4±5.9)%。差示扫描量热法(DSC)分析表明药物以无定形状态分散于纳米粒中。初步稳定性实验表明,雷公藤红素纳米结构脂质载体在4℃条件下稳定性较好。结论正交试验优化后所得雷公藤红素纳米结构脂质载体的处方及制备工艺合理可行、重复性良好。

摘要：目的:优化雷公藤红素(Cel)纳米结构脂质载体(Cel-NLC)的制备工艺,并对其进行表征。方法:采用熔融乳化超声法制备Cel-NLC。在单因素试验基础上,以Cel包封率为指标,采用星点设计-响应面法优化液态脂质比例(占总质量的比例)、复合乳化剂用量及主药用量,并进行验证试验。利用纳米粒度及Zeta电位分析仪测定最优处方下制备的Cel-NLC的粒径及Zeta电位,在透射电镜下观察其形态。结果:最优处方的液态脂质比例为39%,复合乳化剂用量为196 mg,主药用量为8 mg。所制3批Cel-NLC的平均包封率为87.22%、平均粒径为(41.2±1.1)nm、平均Zeta电位为(-18.4±0.2)mV(n=3),电镜下观察其外观呈类球形。结论:优化的处方工艺方法简便、稳定可行,适用于Cel-NLC的制备。

摘要：雷公藤红素是一种从中药雷公藤中提取的一种具有很强抗癌活性的三萜化合物,为找到具有更好抗癌活性和成药性的雷公藤红素衍生物,在雷公藤红素C-29羧基设计并合成10个新型的衍生物,并通过MMT法,测定了衍生物对A549和HepG2肿瘤细胞的抗癌活性,实验结果显示10个衍生物都具有很好的抗癌活性,化合物C4和C8抗癌活性最强,并且具有良好的水溶性,是较好的体内实验备选化合物.

摘要：目的制备甘露糖修饰的雷公藤红素脂质体(mannose-celastrol-liposomes,Man-Cel-Lips),对其处方进行优化,并初步评价其体外靶向性。方法采用薄膜分散法制备Man-Cel-Lips。以包封率为考察指标,采用Box-Behnken设计-响应面法优化处方中胆固醇加入量、Cel加入量和探头超声时间间隔;按最优处方制备3批脂质体,对其进行表征并考察其体外释放情况。以香豆素为荧光探针,采用流式细胞仪和荧光显微镜法考察甘露糖对脂多糖诱导的RAW264.7细胞的摄取和靶向作用。结果通过Box-Behnken响应面法,确定最优处方工艺为胆固醇4 mg、Cel 1 mg、磷脂22 mg,超声间隔时间5 s,总处方量为5 mL。所制得3批脂质体平均粒径为(93.50±1.04)nm,多分散指数为0.22±1.81,ζ电位为(-5.70±0.26)mV,平均包封率为(92.75±0.61)%,相比于游离Cel,Man-Cel-Lips具有一定缓释效果。体外细胞摄取实验结果表明,Man-Cel-Lips对细胞的摄取效率高于其他组,且呈剂量相关性(P<0.05)。结论成功制备并优化Man-Cel-Lips,经甘露糖修饰的Cel-Lips靶向性增强,为后续研究其抗炎活性奠定基础。

摘要：目的构建了一种针对炎症微环境的结肠靶向-酶敏感纳米给药系统以解决雷公藤红素的递送难题。方法合成透明质酸-金刚烷甲酸(hyaluronic acid-adamantanecarboxylic acid,HA-AD)聚合物,通过1H-NMR进行结构确认。采用透析法制备装载雷公藤红素(celastrol,Cel)的纳米粒(Cel/NPs),以包封率为指标,通过单因素考察和Box-Behnken设计-响应面法试验优化改善处方,并测定纳米粒的粒径分布、ζ电位、形态、稳定性、酶敏感性、药物包封率和载药量;采用透析袋法考察纳米粒的体外释放行为;激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析NCM460细胞对药物的摄取情况;建立急性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠模型,对比研究free Cel和Cel/NPs的体内抗UC作用。结果最佳制备工艺为Cel 2.04 mg、环糊精27.19 mg、HA-AD 7.96 mg、DMSO 3.0 mL、纯水(reverses osmosis,RO)10 mL、搅拌时间2 h。所得纳米粒为光滑圆整球形,平均粒径为(152.37±1.42)nm,多分散指数(polydispersity index,PDI)为0.262±0.009,ζ电位为(−32.1±0.8)mV,Cel包封率和载药量分别为(94.18±2.36)%、(5.17±0.13)%,递药体系具有较好的储存稳定性和胃肠道稳定性,但在结肠微环境α-淀粉酶的刺激下,可使环糊精迅速解体,从而瓦解Cel/NPs,快速释放Cel;Cel/NPs增加了NCM460细胞对药物的摄取。体内抗UC结果显示Cel/NPs可以显著改善UC,降低小鼠疾病活动指数评分,恢复小鼠结肠组织状态,增加结肠长度,降低脾脏质量,恢复结肠黏膜上皮完整性。结论所制备Cel/NPs有利于雷公藤红素抗UC靶向递送,显著改善UC,为结肠病变部位药物靶向递送提供新思路。

摘要：目的 不同类型金属有机骨架材料(metal organic frameworks,MOFs)制备工艺优化及筛选,用于负载抗肿瘤单体成分雷公藤红素(celastrol,Cel),从而改善其生物利用度并增强抗肿瘤药效。方法 以粒径大小为指标,单因素考察结合正交试验优化MOFs制备工艺,选择最佳MOFs;吸附法负载雷公藤红素,单因素优化载药工艺,CCK-8法初步评价其抗肿瘤细胞药效。结果 UIO-66最佳工艺为苯甲酸为调节剂,投料比1∶1,溶剂60 mL,溶剂热法反应24 h,粒径(172.3±3.0)nm,多分散指数(polydispersity index,PDI)为0.166±0.023;ZIF-8最佳工艺为投料比1∶50,水10m L,室温密闭搅拌30 min,粒径(154.0±1.4)nm,PDI为0.245±0.060;MIL-101(Fe)最佳工艺为投料比1∶1,溶剂10 mL,溶剂热法反应24h,粒径(553.5±36.2)nm,PDI为0.642±0.109;选择ZIF-8进行雷公藤红素的包载,最佳载药工艺为ZIF-8与雷公藤红素比例2∶1,载药时间24 h,药物质量浓度为1 mg/mL,制得ZIF-8@Cel粒径为(164.9±8.0)nm,PDI为0.297±0.029,载药量为(23.47±0.26)%;实验剂量下ZIF-8对HepG2细胞无毒,雷公藤红素处理HepG2细胞24h的半数致死浓度(half-inhibitory concentration,IC_(50))为3.821μg/mL,ZIF-8@Cel的IC_(50)值为3.289μg/mL(以雷公藤红素含量计)。结论 优选的ZIF-8材料制备及载药工艺稳定可行,粒子形状规则,晶型良好,分布均匀,载药量高,生物安全性好,载药后可明显增强药物药效,为雷公藤红素抗肿瘤纳米制剂的研究提供了基础。

摘要：雷公藤(Tripterygium wilfordii)是我国的名贵药用植物,其药用成分雷公藤红素是医药研究中重要的化学单体。环境胁迫能促进药用植物次生代谢物质的合成与积累,该文通过正交设计,探讨了水分、光照、土壤氮含量三因素两水平轻度胁迫处理对雷公藤幼苗中雷公藤红素含量的影响。研究结果表明:根部是雷公藤红素含量最丰富的部位;雷公藤幼苗在水分、光照及土壤氮含量胁迫条件下根系中雷公藤红素的含量分别提高了10.8%、14.4%和13.0%,光照对雷公藤红素含量的增加最明显,短期的轻度胁迫可提高根中雷公藤红素的含量。

摘要：目的:优选独子藤果实中雷公藤红素的醇提工艺。方法:采用高效液相色谱法测定雷公藤红素的含量。以提取时间、提取次数、料液比为考察因素,以雷公藤红素的提取率为考察指标设计正交试验,并进行验证试验。结果:最优醇提工艺为45%甲醇提取3次、每次2 h、料液比1∶8;验证试验中,雷公藤红素的平均提取率为0.917 mg/g(RSD=2.85%,n=3)。结论:本研究优化的醇提工艺稳定可行、提取率较高,适用于独子藤果实中雷公藤红素的提取。

摘要：研究雷公藤红素对人Hela细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用以及对活性氧、线粒体膜电位和细胞内钙离子水平的影响。方法:用不同浓度的雷公藤红素处理Hela细胞,测定细胞生长曲线,CCK-8试剂盒检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡情况,检测细胞内活性氧、线粒体膜电位和钙离子浓度高低,原子力显微镜(AFM)对雷公藤红素处理Hela细胞前后细胞膜形貌及超微结构进行分析。结果:雷公藤红素能够显著抑制Hela细胞的增殖,对Hela细胞的半数抑制浓度为0.8μg/m L;随着雷公藤红素浓度上升,细胞内活性氧水平逐渐升高,线粒体膜电位逐渐下降,钙离子水平逐渐升高,2.5μg/m L雷公藤红素可使细胞的凋亡率达到83%;对细胞周期进行检测表明,雷公藤红素诱导细胞凋亡主要是使细胞阻滞在S期,共聚焦显微镜对细胞骨架和细胞核进行检测,雷公藤红素显著破坏细胞骨架,细胞核发生皱缩和断裂从而诱导细胞凋亡,AFM结果可以看到雷公藤红素使细胞膜发生皱缩、膜表面粒径变大从而影响细胞膜电位和钙离子稳定。结论:雷公藤红素诱导的Hela细胞凋亡与细胞内活性氧、线粒体膜电位以及钙离子水平有着紧密联系。