摘要：【目的】建立中华按蚊Anopheles sinensis与雷氏按蚊Anopheles lesteri实时荧光定量PCR(qPCR)检测技术,为2种传疟按蚊的准确鉴定提供分子鉴定方法。【方法】建立2种按蚊的样本库,利用形态学方法和基因测序对蚊虫样本进行鉴定;合成并克隆阳性质粒质控品。从NCBI数据库上下载中华按蚊和雷氏按蚊的rDNA-ITS2序列,利用Prime3软件在线设计2种按蚊的引物和探针,并验证该PCR方法的最低检测限、敏感性、特异性和可重复性。【结果】收集并鉴定4种383头蚊虫,其中中华按蚊159头、雷氏按蚊104头、致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus 60头和白纹伊蚊Aedes albopictus 60头。中华按蚊和雷氏按蚊的qPCR的最低检测限均为31.50拷贝/反应,标准曲线线性关系相关系数(R^(2))均为0.99。敏感性和特异性均为100%,重复性试验结果显示,中华按蚊和雷氏按蚊的组内和组间变异系数均小于2%。【结论】本方法所建立的TaqMan探针qPCR方法灵敏度高,特异性高,可用于中华按蚊和雷氏按蚊的分子鉴别。

摘要：目的　建立一种能鉴别赫坎按蚊种团内不同近缘种按蚊的基因鉴别技术。方法　依据赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊 4种近缘种按蚊ITS2 区段的基因序列特征设计特异性引物 ,建立一种能鉴别赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊 4种近缘种按蚊的简便的PCR基因鉴别技术 ,并采用传统的形态学分类方法和新建立的基因鉴别技术对从辽宁、河南省以及在朝鲜现场捕获的按蚊分别进行了形态学和基因鉴别及比较。结果与结论　新建立的基因鉴别技术能准确鉴别赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊 4种近缘种按蚊。具有比传统的形态学分类方法准确 ,比已有的PCR-RFLP蚊种基因鉴别技术更简便、价廉和省时的特点。