摘要：利用紫外激光交联和免疫沉淀技术(UV laser crosslinking and immunoprecipitation,UV-X-IP)分析原核表达的酿酒酵母热激因子(heat shock factors,HSFs)和片段化的基因组靶dna的相互作用。分别在ScSSA1、ScSSA4启动子区和编码区设计引物对免疫沉淀的dna进行PCR分析。结果发现,紫外激光交联和免疫沉淀dna库中富集了ScSSA1、ScSSA4启动子区HSF结合的dna片段,而没有编码区dna,表明HSF特异结合了靶dna。从未经紫外激光交联样品的免疫沉淀dna库中未获得相应PCR扩增产物,说明紫外激光在酿酒酵母HSF与靶dna之间形成共价结合中起重要作用。

摘要：实时荧光PCR技术自问世以来,以其高特异性,高灵敏性,可定量,无污染,而得到了广泛的应用.该技术是根据荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)原理,设计相应的荧光标记核酸探针,通过PCR反应对相应靶dna进行均相定性定量测定的技术.根据检测中所使用的荧光探针分类, 目前已经开发出TaqMan,Molecular Beacon, Scorpion,LightCycler,Single—labeled probe, ResonSense,Angler以及双链探针等相关技术.本文对该技术的研究进展作一综述.