摘要：MabinlinⅡ是我国所特有且唯一的植物甜蛋白,在体外至今没有得到具有甜味的基因表达产物。本文根据已知马槟榔甜蛋白的序列设计引物克隆MabinlinⅡ基因,对基因进行剪切重组。将重组基因克隆至大肠杆菌表达载体pET-30a(+)中,构建了3个重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),得到三株表达重组马槟榔甜蛋白的大肠杆菌工程菌。经IPTG诱导,3个重组MabinlinⅡ基因可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。

摘要：为探讨H_2O_2浸种和种皮处理对马槟榔种子萌发及幼苗生长的影响。本实验以新鲜采集的马槟榔种子为实验载体,使用不同浓度的H_2O_2浸种24h、破皮和种皮打磨处理,在25℃自然光照条件下,将种子播种在沙床上,对种子萌发的过程进行观察和记录,并讨论不同处理对种子发芽率、发芽势和幼苗生长的影响。结果显示,不同处理对马槟榔种子的发芽率影响依次为4mg/L H_2O_2>种皮打磨>ck>开口;对发芽势的影响为开口>4mg/L H_2O_2>种皮打磨处理>ck;对幼苗株高的影响为开口>1mg/L H_2O_2>打磨>ck;对幼苗根生长的影响为开口>1mg/L H_2O_2>打磨>ck。实验结果表明,使用浓度为1mg/L H_2O_2浸种24h是促进马槟榔种子萌发,促进幼苗生长的最佳处理方法。

摘要：为提高马槟榔种子萌发率,促进幼苗生长,以新鲜采集的马槟榔种子为材料,采用不同浓度的高锰酸钾(KMnO_4)、硝酸钾(KNO_3)和双氧水(H_2O_2)进行浸种处理,研究不同处理对马槟榔种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明:在试验浓度范围内,高浓度的KMnO_4、KNO_3和H_2O_2,显著提高马槟榔种子的发芽势和发芽率,其中20mg·L^(-1) KNO_3浸种处理,发芽率为97.34%,发芽势为73.52%;5mg·L^(-1) KMnO_4浸种处理发芽率为98.00%,发芽势为73.83%;3mg·L^(-1) H_2O_2浸种发芽率为98.67%,芽势为63.43%。其次,不同浸种处理对马槟榔幼苗株高的生长也存在显著影响,以浓度为15mg·L^(-1) KNO_3、2mg·L^(-1) KMnO_4、1mg·L^(-1) H_2O_2效果最好,株高分别达到17.80、14.40、19.20cm。不同处理对马槟榔幼苗根长的生长也有显著影响,效果最显著的处理浓度为15mg·L^(-1) KNO_3,4mg·L^(-1) KMnO_4,1mg·L^(-1) H_2O_2,根长分别为8.00、8.94、10.90cm。综上所述,3mg·L^(-1) H_2O_2浸种24h处理是促进马槟榔种子萌发和幼苗生长的最佳条件。

摘要：依据MabinlinⅡB亚基N端与C端氨基酸序列设计两个简并引物。从马槟榔（CapparismasaikaiLevl．）种子中提取总RNA。经反转录合成cDNA第一链，以此为模板进行多聚酶链式反应（PolymeraseChainReaction，PCR）产物为近22bp的DNA片段。经克隆及序列测定结果表明，该片段为MabinlinⅡB亚基cDNA的185bp。

摘要：从采自云南屏边的马槟榔（ＣａｐｐａｒｉｓｍａｓａｉｋａｉＬｅｖｌ）叶片中分离提纯到ＤＮＡ，依据植物超甜蛋白Ｍａｂｉｎｌｉｎ的氨基酸序列，回译出Ｍａｂｉｎｌｉｎ的核苷酸序列，用简并密码子优先使用的原则和计算机ＤＮＡ系统分析，设计基因的上、下游引物，通过快速扩增得到Ｍａｂｉｎｌｉｎ基因的ＰＣＲ产物。用平末端内切酶ＥｃｏＲＶ和Ｓｍａｌ分别消化质粒Ｂｌｕｅｓｅｒｉｐｔ和Ｐｖｚ－１在标准缓冲液条件下，使用２ｍｍｏｌ／ＬｄＴＴＰ和Ｔａｑ多聚酶，７０℃温育２ｈ，反应中缺乏ｄＴＴＰ以外任何其它核苷酸均可导致线状载体３’端单－Ｔ的增加，此Ｔ－载体可用于Ｍａｂｉｎｌｉｎ基因的分离与克隆。其克隆效率比将ＰＣＲ扩增产物克隆到平末端载体上的效率高出１００倍以上。

摘要：根据已由作者克隆的ｍａｂｉｎｌｉｎⅡＢ亚基１８５ｂｐ的ｃＤＮＡ片段，设计合成系列引物．从马槟榔（ＣａｐｐａｒｉｓｍａｓａｉｋａｉＬéｖｌ．）种子提取总ＲＮＡ并纯化ｍＲＮＡ，经反转录合成ｃＤＮＡ第一链．采用ＲＡＣＥ方法，快捷克隆ｍａｂｉｎｌｉｎⅡ全长ｃＤＮＡ．经序列测定与分析，该ｃＤＮＡ为５８３ｂｐ，其中编码序列长４６５ｂｐ，共编码１５５个氨基酸．