摘要：背景:伊班膦酸钠是第3代二膦酸盐的典型代表之一,具有很高的抗骨质吸收作用。目的:验证骨折局部及全身应用伊班膦酸钠对兔骨折愈合的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-10在东南大学医学院中心实验室完成。材料:健康6～8月龄新西兰兔36只,体质量2.1～2.6kg。伊班膦酸钠注射液(1mL∶1mg)由河北医科大学生物医学工程中心提供。方法:新西兰兔36只,随机分成3组,对照组、全身组和局部组,每组12只,建立兔桡骨骨折标准模型。建模后对照组不予处理,全身组和局部组分别通过静脉和局部途径予以伊班膦酸钠0.1mg。于建模后2,4,6,8周通过X射线观察骨折愈合情况,进行评分;于骨折模型建立后的第1,2,3,4周通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP-5b);于建模后2,4,6,8周分批处死兔,摘取骨痂标本,进行病理学观察和通过免疫组织化学检测Ⅰ型胶原的表达。主要观察指标:①骨折愈合评分。②抗酒石酸酸性磷酸酶变化。③骨痂成分面积百分比。④破骨细胞指数。⑤免疫组织化学积分吸光度。结果:36只兔全部进入分析。第2周,全身组和局部组X射线评分较对照组高(P<0.05),第4,6周,局部组较对照组和全身组评分评分高(P<0.05)。各周局部组抗酒石酸酸性磷酸酶水平较对照组和全身组低(P<0.05)。4周,局部组骨小梁面积百分比高于对照组(P<0.05);6周高于对照组和全身组(P<0.05)。各周局部组破骨细胞指数均低于对照组和全身组(P<0.05)。2,4,6周,局部组Ⅰ型胶原表达均高于全身组和对照组(P<0.05)。结论:局部应用伊班膦酸钠能够促进兔骨折愈合,相同剂量下(0.1mg)比全身应用效用更显著。

摘要：背景:天狼星红是一种强酸性阴离子染料,染色后不褪色且具特异性,是目前胶原染色的最佳染料。胶原作为细胞外基质的主要成分之一,具有许多特殊的生理功能,机体通过胶原的合成和改建使骨折修复得以完善。目的:采用苦味酸天狼星红偏振光显微观察骨折愈合过程各型胶原的比例、分布的动态变化过程。设计:观察对比实验。单位:武汉大学人民医院骨外科,天津医院创伤骨科,北京大学医学部积水潭医院创伤骨科,解放军军事医学科学院基础医学研究所组织工程中心。材料:实验于2002-03/2003-09在解放军军事医学科学院基础医学研究所组织工程中心完成。选取健康成年中国绵羊3只,雄性,体质量25～35kg。方法:全部动物麻醉消毒后在跖骨干中段截取1cm长的骨缺损,骨折端用6孔加压钢板固定。术后1,3,6个月取骨折部位标本,乙二胺四乙酸脱钙制备切片,苦味酸天狼星红染色,偏振光显微镜观察胶原的类型和分布。主要观察指标:骨折愈合不同时期骨缺损区胶原的类型及其分布。结果:实验纳入3只绵羊,全部进入结果分析。①术后不同胶原纤维偏振光显微镜下的形态学表现:Ⅰ型胶原纤维紧密排列,显示很强的双折光性,呈黄色、橙色和红色的粗纤维;Ⅱ型胶原纤维显示弱的双折光,呈各种不同颜色的疏松网状;Ⅲ型胶原纤维疏网状,显示弱的双折光,呈绿色的细纤维。②术后不同胶原纤维偏振光显微镜下的数量观察:术后1个月,骨折处红色和黄色的Ⅰ型胶原极少见,绿色的Ⅲ型胶原纤维占大多数,胶原排列杂乱;术后3个月,骨折处红色和黄色的Ⅰ型胶原纤维明显增加,Ⅲ型胶原纤维的比例下降,胶原纤维的排列方向开始向有序的方向发展;术后6个月,粗大而鲜艳的红黄色Ⅰ型胶原成分占据了绝大部分,细小的绿色Ⅲ型胶原纤维的数量急剧减少,呈现明显的斜行螺旋性交叉的三维排列。结论:苦味酸天狼星红偏振光显微观察不仅能区分骨折局部Ⅰ、Ⅲ型胶原的类型,还可以清晰显示Ⅰ、Ⅲ型胶原的形态、分布和比例关系,具有操作简便、特异性强、灵敏度高的特点。

摘要：背景:弱激光的生物刺激作用已被许多实验研究及临床应用证实,其作用表现在促进组织修复、镇痛、抗炎等方面。目的:观察He-Ne激光和小剂量CO2激光照射对骨折愈合的作用。设计:随机对照动物实验。单位:承德医学院激光医学研究室。材料:选择健康雄性新西兰白兔48只,体质量2.0～2.5kg。方法:实验于1998/2003在承德医学院激光医学研究室完成。①将48只新西兰白兔左桡骨造成实验性骨折,将之分为3组,每组16只,其中一组为对照组,另外两组分别接受28mW/cm2的He-Ne激光照射(He-Ne组)及150mW/cm2的CO2激光照射(CO2组),1次/d,10min/次,直接照射骨折部位。②骨折后15d和30d拍摄X射线片后分批处死动物。取出实验骨,对15d的实验骨,测定骨痂中的钙与胶原含量。对35d的实验骨,测定生物力学抗扭性能。主要观察指标:①各组X射线片观察结果。②各组骨痂中胶原与钙的含量。③各组生物力学抗扭强度测试结果。结果:45只进入结果分析。①骨折后15d,CO2组及He-Ne组的X射线片、骨痂中的胶原及钙含量均优于对照组,且CO2组骨痂中的胶原及钙含量高于He-Ne组犤(341.9±30.1)比(302.1±28.7)mg/g,(197.1±19.7)比(156.5±17.6)mg/g,P<0.05犦。②骨折后35d,CO2激光及He-Ne激光照射组的生物力学抗扭性能均优于对照组,两个照射组之间的差异无显著性。③两个时间得到的X射线片的结果显示CO2激光及He-Ne激光照射组均优于对照组,两个照射组之间的差异无显著性。结论:CO2激光及He-Ne激光照射均促进了骨折愈合,且在骨折后15d时,CO2激光照射的作用效果显著优于He-Ne激光照射,而在骨折后35d时,从临床意义上讲,其差异无显著性。

摘要：背景:近年来大量的实验及临床观察均证实神经因素对骨折愈合有调节和支配作用。Ⅰ型胶原是促成骨细胞分化和增强成骨细胞黏附能力主要因素,是组成骨构架的基质蛋白;而Ⅱ型胶原由软骨细胞产生。目的:观察失神经状态下骨折愈合过程中Ⅰ,Ⅱ型胶原蛋白表达的变化规律。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-05/12在解放军第二军医大学动物实验室及细胞生物教研究室完成。材料:选用3月龄健康雄性SD大鼠40只,采用随机数字表法分为2组,单纯胫骨骨折组与脊髓损伤并胫骨骨折组各20只。方法:单纯胫骨骨折组大鼠于从左胫骨平台前缘插入1根φ0.8mm克氏针,制成胫骨骨折模型。脊髓损伤并胫骨骨折组在植备上述模型的基础上,横断切除T10段脊髓约0.3cm,制成T10脊髓完全性损伤大鼠胫骨骨折模型。主要观察指标:分别于伤后1,2,4,5周采用Western blot法检测两组大鼠骨折断端骨痂中Ⅰ,Ⅱ型胶原的蛋白表达。结果:伤后第1周两组大鼠骨折断端骨痂中Ⅰ,Ⅱ型胶原均有表达,脊髓损伤并胫骨骨折组两种胶原的表达程度均高于单纯胫骨骨折组(P<0.05);伤后第2周脊髓损伤并胫骨骨折组Ⅱ型胶原的表达量达到峰值,高于单纯胫骨骨折组(P<0.05);伤后第4周单纯胫骨骨折组Ⅰ型胶原表达量达峰值,高于脊髓损伤并胫骨骨折组(P<0.05),脊髓损伤并胫骨骨折组Ⅱ型胶原仍有高表达;伤后第5周两组Ⅰ,Ⅱ型胶原表达量均下降。结论:失神经状态下骨折愈合过程中Ⅰ、Ⅱ胶原的分泌规律与正常骨折愈合一致,区别在于各时间点尤其是在峰值点上表达量有明显差异。

摘要：背景:研究表明骨折后72h～3周骨折断端血管内皮生长因子呈持续高表达,推测其对骨折愈合有促进作用,通过血管内皮生长因子基因转染的方式诱导治疗性血管生成的研究正受到人们关注。目的:通过局部注射阳离子脂质体转染剂和质粒混合物寻找外源性血管内皮生长因子体内转染的有效途径,以及其基因表达对于骨折愈合的促进作用。设计:随机分组、空白对照实验。单位:四川大学华西医学中心动物实验室。对象:成年雄性SD大鼠40只,体质量230～250g。随机分为实验组和对照组,每组20只。方法:实验于2003-04/12在四川大学华西医学中心动物实验室完成。40只大鼠建立右侧股骨干骨折模型。于股骨中段切断,断端间相距1mm,于髁间倒置入直径1mm的克氏针,固定骨折断端。实验组将脂质体转染剂100μL和pBLAST49-mVEGF100μg质粒混合物两侧骨膜下多点注射,对照组注射等量生理盐水。于术后3,7,14,28,42,56,70d分别处死各组大鼠2只取右侧股骨标本。主要观察指标:两组大鼠各时间点右侧股骨断端标本观察:①大体观察。②X射线摄片结果。③组织学结果。④血管内皮生长因子免疫组织化学染色结果,以胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性。结果:两组大鼠7个时间点各选2只,共28只进入结果分析,剩余12只剔除。①不同时间点大鼠骨折端大体标本和X射线片结果观察:实验组骨折端28d软骨骨痂出现并逐渐替代纤维骨痂,骨折线消失,术后56d骨折完全愈合;对照组28d可以看见纤维骨痂,骨折线仍然很清楚,56d才有较多骨痂出现,骨折线开始变模糊。②大鼠骨折端组织学结果观察:骨折端切片后组织细胞经苏木精-伊红染色,实验组术后56d,骨折完全愈合,重新塑形,髓腔再通;对照组术后56d,骨折未完全愈合,髓腔未再通。③不同时间点大鼠骨折端血管内皮生长因子免疫组织化学染色结果:两组表达均于14d达到高峰,28d开始下降。实验组血管内皮生长因子表达明显高于对照组。结论:大鼠骨膜下局部注射阳离子脂质体转染剂和质粒混合物是一种有效的体内转染途径;pBLAST49-mVEGF基因转染能有效促进大鼠骨折的愈合。

摘要：背景:有报道随着年龄的增加,骨折愈合的难度加大,可能是由于骨髓间充质干细胞分化为成脂细胞、成骨细胞等时的基因调控不同,但其具体机制尚不清楚。目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ以及核结合因子α1在增龄性骨折愈合过程中的表达情况,以探讨过氧化物酶体增殖物激活受体与核结合因子α1基因的增龄性表达变化与增龄性骨折愈合障碍的联系。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-10/2008-02在中南大学湘雅三医院完成。材料:随机选取雄性3月龄及23月龄SD大鼠各6只,分为高龄组(23月龄)和低龄对照组(3月龄),每组各6只。方法:所有动物左下肢胫骨处安装自制微型外固定延长支架并行中上段横行截骨。术后第2天始每日延长牵引外固定架2次,0.20mm/次,牵引期为14d。术后第15天处死大鼠,无菌条件下分离采集左胫骨标本。主要观察指标:骨折影像学、组织学检查;以反转录-聚合酶链反应检测过氧化物酶体增殖物激活受体与核结合因子α1mRNA的表达。结果:所有动物均进入结果分析。骨折断端间影像学检查,低龄对照组骨折断端间大量骨痂产生,成骨显著强于实验组;组织学检查,低龄对照组各实验动物均有大量骨痂生长,膜内成骨显著;而老龄组骨痂生长存在明显减弱,断端间仅为纤维连接;反转录-聚合酶链反应检查,低龄组大鼠骨髓中核结合因子α1mRNA表达明显强于高龄组,而高龄组过氧化物酶体增殖物激活受体mRNA表达则较为显著,且两组间该两种因子的表达差异有显著性意义。结论:不同年龄组大鼠骨折愈合情况存在差异,随着年龄的增加,骨折愈合能力下降;大鼠骨髓中过氧化物酶体增殖物激活受体mRNA与核结合因子α1mRNA表达水平随年龄增加发生相应变化,提示该两种基因表达水平变化与增龄性骨折愈合障碍存在联系。

摘要：目的:本课题旨在利用现代生物模型,验证中药方剂对骨折愈合的影响,为中医接骨理论提供科学依据和筛选新型方剂。方法:根据中医骨伤的组方原则,本研究从抗炎镇痛,活血化瘀和接骨续筋3类中药中各选出2味最常用的中药,采用均匀设计法将6味中药按照不同剂量配比,组成5个方剂。选择炎症因子(NO)释放、人体静脉上皮细胞(HUVEC-12)和成骨细胞(UMR-106)增殖试验分别反映抗炎镇痛,活血化瘀和接骨续筋的功效,测试各方剂对骨折愈合的影响。结果:5组复方体外试验均表现出单重或多重促进骨折愈合的作用。其中5号复方(大黄30 g,栀子、三七、红花各9 g,接骨木30 g,续断15 g)显示出全面的抑制NO释放,促进HUVEC-12和UMR-106增殖的活性。结论:证明了中药复方能从多个方面加速骨折愈合,其主效应包括抗炎镇痛,促进骨折局部的血液循环和新骨再生。提供了以大黄、栀子为解毒君药,以三七、红花活血化瘀作臣药,续断、接骨木为佐使的基本外敷复方,实际应用时可根据辨证观察作适当增减,达到最佳疗效。

摘要：目的:探讨民间验方中草药接骨膏对家兔桡骨骨折愈合的影响。方法:选用健康雄性家兔48只,随机分为用药组(24只)、对照组(24只),均造成机械性桡骨骨折动物模型。用药组外敷中草药接骨膏包扎固定,对照组仅包扎固定,喂养观察。按设计计划分期处死,取骨缺损标本行X线拍片、病理组织学、组织化学观察,将数据进行统计学处理。结果:用药组与对照组比较:骨痂阴影面积平均增多(P<0.01);新生骨出现早、范围大;新生骨组织内碱性磷酸酶含量丰富。结论:中草药接骨膏能够缩短骨折愈合过程和提高骨折愈合质量。

摘要：背景:天鹅记忆接骨器能对长骨干形成三维立体固定,保证骨折端稳定,并在骨折端间产生持续动态的压应力。胰岛素样生长因子Ⅰ对于骨生长代谢、细胞分化和有丝分裂都有调节作用,在骨折愈合过程中能促进细胞增生,刺激骨和软骨形成。目的:定量检测天鹅记忆接骨器与传统固定方式动力加压接骨板内固定下骨折局部胰岛素样生长因子Ⅰ的表达变化。设计、时间及地点:对照观察动物实验,于2007-01/05在解放军第二军医大学长海医院骨科实验室完成。材料:天鹅记忆接骨器为含镍50%～53%的镍钛合金板材,形状恢复温度为(33±2)℃,由兰州西脉生物医疗器械公司定制。方法:选用成年新西兰白兔30只,随机选择兔一侧肱骨,截骨后用天鹅记忆接骨器固定;对侧肱骨同法截骨后,在相应位置用动力加压接骨板固定。内固定后第2,3,4,6,8,12周分别处死5只动物,以骨折线两侧0.5cm范围内为取材区,标本按内固定物分为天鹅记忆接骨器组和动力加压接骨板组。主要观察指标:天鹅记忆接骨器、动力加压接骨板内固定后2,3,4,6,8,12周兔骨折局部胰岛素样生长因子Ⅰ含量。结果:天鹅记忆接骨器组骨折局部胰岛素样生长因子Ⅰ含量在内固定后2周逐渐增高,6周时达到顶峰,8～12周逐渐下降。动力加压接骨板组骨折局部胰岛素样生长因子Ⅰ含量在内固定后2周逐渐增高,8周时达到顶峰,12周下降。内固定后2,8,12周,两组骨折局部胰岛素样生长因子Ⅰ含量差异无显著性意义(P>0.05);内固定后3,4,6周,天鹅记忆接骨器组骨折局部胰岛素样生长因子Ⅰ含量明显高于动力加压接骨板组(P<0.05),4周时差异最大。结论:与传统固定方式动力加压接骨板相比,天鹅记忆接骨器独特的持续动态加压应力和三维立体固定能明显促进骨折局部胰岛素样生长因子Ⅰ的分泌,促进骨折愈合。

摘要：背景:儿童弹性髓内钉为具有特定弹性带有弯头的金属圆条结构,是由成人长骨干骨折治疗中使用的髓内针经过发展、演化、改进而来,属于儿童骨折微创治疗方法,作为髓内固定器械,它对于儿童长骨骨折有着足够的固定强度,同时又可以促进骨折部位微动,从而促进骨折部位的愈合,目前已成为治疗儿童长骨骨折的一种新型的内固定材料。目的:回顾性总结评价弹性髓内钉微创内固定修复儿童长骨干骨折的临床效果。方法:自2010年1月至2014年4月采用弹性髓内钉置入内固定修复儿童长骨干骨折30例,其中股骨4例,胫腓骨骨折11例,肱骨4例,尺桡骨双骨折7例,尺骨骨折3例,桡骨1例,均为新鲜闭合骨折;男21例,女9例;受伤年龄5-16岁,平均9.6岁;23例为闭合复位,7例因闭合复位困难,行小切口有限切开复位。观察患儿的骨折复位情况、手术时间、骨折愈合时间、内固定后功能恢复情况、Flynn髓内钉疗效、内固定后并发症和不良事件。结果与结论:30例患儿手术时间25-65 min,平均51 min,所有骨折都获得良好的复位。随访6-12个月,骨折均顺利愈合,愈合时间8-16周,平均12周,Flynn髓内钉疗效优良率为100%,患肢功能恢复正常,无并发症发生。证实该方案具有切口小、不需要剥离骨膜、软组织损伤小、手术时间短、感染率低、生物力学稳固、功能恢复快、愈合快、并发症少等优点,其设计上重视儿童骨折特点和骨组织的生长发育规律,特别适合儿童长骨骨折的内固定治疗。