摘要：目的：用正交试验法验证胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血损伤的神经保护作用并优化其最佳治疗剂量及时间窗。方法：应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠前脑缺血模型，按照正交试验设计分组，经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗。固绿髓鞘染色法观察神经纤维髓鞘变化；免疫组织化学法和Westernblotting定性、定量检测髓鞘碱性蛋白（MBP）的表达；***检测MBPmRNA水平。结果：胡黄连苷Ⅱ可上调大鼠脑缺血损伤后MBP表达，减少脱髓鞘；其最佳治疗时间和剂量，根据固绿髓鞘染色显示为脑缺血2．0h腹腔注射胡黄连苷Ⅱ10mg／kg；免疫组织化学法分析为脑缺血2．0h腹腔注射10ms／kg；Westernblotting分析为脑缺血2．0h给予10ms／kg；RT-PCR显示为脑缺血1．5h给予20ms／kg。结论：根据用药剂量最小化和治疗时间窗最大化的原则综合评价，胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血损伤的最佳治疗时间窗为脑缺血1．5～2．0h，最佳治疗剂量为腹腔注射10～20ms／kg。

摘要：目的观察脊髓压迫性损伤中白质神经纤维溃变及MBP的表达变化。方法采用自行设计的压迫装置制作脊髓压迫性损伤模型,运用luxol fast blue(LFB)、免疫荧光和western blot等方法来检测脊髓受压1、3、7 d后的白质纤维变化及MBP表达变化。结果脊髓受压后,白质髓鞘化神经纤维出现水肿,排列疏松、髓鞘缺失等退行性溃变;髓鞘化纤维数目逐渐减少。蛋白MBP表达随着压迫时间进行性下降。结论脊髓压迫性损伤可导致神经纤维溃变,MBP表达下调是神经纤维溃变的原因之一。

摘要：目的 通过正交实验优化胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的最佳剂量和时间窗.方法 应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠前脑缺血模型,按照正交实验设计分组,经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗,酶联免疫吸附法检测脑组织中神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经胶质细胞标志蛋白（S100B）、髓鞘碱性蛋白（MBP）的含量,综合评价胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的效果.结果 胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量为：①根据脑组织NSE含量分析为恼缺血1.5 h腹腔注射胡黄连苷Ⅱ 10 mg·kg-1体重;②根据脑组织S100B含量分析为脑缺血1.5 h给予胡黄连苷Ⅱ 20 mg·kg-1;③根据脑组织MBP含量分析为脑缺血1.5 h腹腔注射胡黄连苷Ⅱ 10 mg·kg-1.结论 根据治疗时间窗最大化和用药剂量最小化原则综合评价,胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量为脑缺血1.5 h腹腔注射10～20mg·kg-1体重.

摘要：目的探讨高原地区脑瘫患儿的血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和髓鞘碱性蛋白(MBP)在综合康复过程中的水平变化及其临床意义。方法采用临床随机对照研究设计,选取2018年6月至2019年10月青海省西宁市中医院康复中心诊治的脑瘫患儿144例,其中男83例、女61例,年龄为3~5岁。根据入院顺序,采用随机数字表法分为常规治疗组(72例,男40例、女32例)和综合治疗组(72例,男43例、女29例),常规治疗组采用常规康复治疗,综合治疗组在常规康复的基础上加用单唾液酸四己糖神经节苷酯钠治疗。另选取30名同期于青海省西宁市中医院儿保科体检,年龄为3~5岁的健康儿童,男16名、女14名作为对照组。检测各组血清中NSE、MBP含量,并于治疗前后评估患儿GMFM-88量表得分。采用SPSS19.0软件进行统计学分析,计数资料采用χ2检验。结果对照组血清NSE、MBP水平为(5.96±0.80)、(0.71±0.15)μg/L。治疗前,重度、中度、轻度脑瘫患儿血清NSE、MBP水平分别为[(21.63±1.92)、(3.63±0.49)μg/L]、[(17.86±1.43)、(2.21±0.07)μg/L]和[(15.14±0.95)、(1.76±0.30)μg/L]。治疗后,常规治疗组和综合治疗组血清NSE、MBP水平分别为[(13.54±2.41)、(2.07±0.85)μg/L]和[(12.09±2.37)、(1.81±0.69)μg/L],GMFM-88评分分别为(116.75±27.41)分和(125.94±24.93)分。脑瘫患儿血清中NSE、MBP含量明显高于对照组正常儿童,其水平随病情程度增加而升高,对应粗大运动功能评分越低。治疗后,两组患儿GMFM-88量表评估得分均显著提高(t值分别是310.97、70.86,P值均<0.05),血清NSE、MBP水平较治疗前均不同程度下降,综合治疗组下降幅度大于常规治疗组。结论高原地区脑瘫患儿血清NSE、MBP浓度较健康儿童显著升高,其含量与脑瘫患儿障碍程度及GMFM-88评分密切相关,动态监测NSE、MBP水平变化可能是脑瘫患儿病情及治疗效果的判断依据。

摘要：目的观察脊髓压迫性损伤后脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达变化与有髓神经纤维脱髓鞘病变之间的关系,以阐明BDNF对神经纤维脱髓鞘病变的作用。方法 SD雄性大鼠60只,将其均分成3组:模型组、假手术组和正常组,用自行设计的压迫器制作大鼠脊髓压迫模型。模型组作脊髓压迫24 h,假手术组仅作脊髓显露,不作压迫。锇酸和LFB(luxol fast blue)染色观察有髓神经纤维变化情况;Western blot检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和BDNF的表达。结果 24 h后,与假手术组比较,模型组压迫前段(T11)有髓神经纤维无明显肿胀和数量变化,MBP表达未见变化(P>0.05),但BDNF的表达量升高(P<0.05);而压迫段(T12)和压迫后段(L1)有髓神经纤维肿胀并伴有数量降低(P<0.05),BDNF和MBP的表达量也随之下降(P<0.05),且压迫段(T12)脱髓鞘病变更为严重,BDNF降低也更为明显(P<0.01)。结论大鼠脊髓压迫性损伤BDNF表达减少可导致脊髓脱髓鞘病变的发生,而BDNF表达量升高可能对脊髓脱髓鞘病变具有保护作用。

摘要：目的分析脊髓压迫性损伤(compressed spinal cord injury,CSCI)后脱髓鞘病变与髓鞘碱性蛋白(myelinbasic protein,MBP)、DNA结合抑制物2(inhibitor of DNA binding2,Id2)的表达变化之间的关系,以探讨CSCI脱髓鞘病变机制。方法采用自行设计的方法制作SD大鼠CSCI模型,通过锇酸染色检测CSCI后1、3、7 d有髓神经纤维变化;运用免疫荧光双标和免疫印迹(Western blot)检测MBP及Id2的表达变化。结果 CSCI后出现脱髓鞘病变,并随着压迫时间延长,髓鞘逐渐发生水肿、变性、崩解;脊髓损伤后MBP表达下调,其表达趋势与脱髓鞘溃变的严重程度一致;CSCI后,Id2广泛分布于白质,随着压迫时间延长,其表达逐渐上调。结论 Id2表达上调,并负向调控MBP基因启动子的活性,使MBP的表达下降,是CSCI后神经纤维脱髓鞘病变的机制之一。

摘要：目的观察电针对大鼠脊髓压迫性损伤（CSCI）后DNA结合抑制物2（Id2）和髓鞘碱性蛋白（MBP）的表达变化，探讨髓鞘再生的机制。方法将54只SD大鼠分为对照组和治疗组，每组27只，再根据取材时间点的不同各分为3d、7d和14d三个亚组，每个亚组9只大鼠。治疗组采用自行设计的大鼠脊髓压通器制作脊髓压通性损伤模型，针刺脊髓损伤节段局部夹脊穴、双侧足三里和双侧太溪穴，并于双侧足三里和太溪穴进行电针刺激（连续波，输出频率为2Hz，电压1．5V，30min）。对照组只造模，不治疗。2组大鼠均于对应时间点取材，运用电镜观察脊髓损伤节段髓鞘的超微结构；采用免疫印迹技术和免疫荧光双标从分子水平检测Id2及MBP的表达变化。结果CSCI后，荧光双标结果显示，造模后第3天，对照组大鼠的Id2免疫阳性少突胶质细胞数目为（20±2）个／高倍镜视野，并在造模后第14天下降至（164-1）个／高倍镜视野，组内各时间点Id2免疫阳性少突胶质细胞数目比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。造模后第3天，治疗组大鼠Id2免疫阳性少突胶质细胞为（13±1）个／高倍镜视野，造模后第14天降至（7±1）个／高倍镜视野，组内各时间点ld2免疫阳性少突胶质细胞数目比较，差异有统计学意义（P〈0．05），并与同时间点的对照组比较，差异亦有统计学意义（P〈0．05）。Western结果显示，造模后第3天，对照组和治疗组Id2蛋白表达分别为（1．12±0．12）和（0．67±0．01），造模后第14天，对照组和治疗组Id2蛋白表达分别下降至（0．86±0．02）和（0．25±0．01），与组内造模后第3天比较，差异均有统计学意义（P〈0．05），2组相同时问点Id2蛋白表达组间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。造模后第3天，对照组和治疗组的MBP蛋白表达分别为（0．44±0．02）和（0．67±O．04），造模后第14天，对照组和治疗组MBP蛋白表达均分别上调至（0．95±0．04）和（1．74±0．09），与组内造模后第3天比较，差异均有统计学意义（P〈0．05），2组相同时间点的MBP蛋白表达比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论电针刺激可调节Id2的表达从而负向调控MBP的表达。

摘要：目的观察脑源性神经生长因子(BDNF)对脊髓压迫性损伤(CSCI)后有髓神经纤维脱髓鞘病变的影响,为阐明BDNF对神经纤维脱髓鞘病变修复提供实验基础。方法将大鼠均分成4组:正常组、假手术组、压迫组和减压组。用自行设计的压迫器制作大鼠脊髓压迫模型。压迫组作脊髓压迫12 h,减压组作脊髓压迫1 h,假手术组仅作脊髓显露,不作压迫。用锇酸染色观察CSCI后1、3和7 d有髓神经纤维变化情况;Western blot和免疫荧光双标检测BDNF和髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达。结果压迫组和减压组都出现脱髓鞘病变,并随着时间的延长,髓鞘逐渐水肿、变性、MBP崩解。BDNF表达量在CSCI后随时间延长也逐渐降低(P<0.05),但与压迫组相比较,减压组脱髓鞘病变较轻且MBP和BDNF降低幅度小而缓慢(P<0.05)。结论 CSCI后尽早减压可减轻脱髓鞘的发生,且可能与BDNF的表达有关。

摘要：目的:研究装载髓鞘碱性蛋白(MBP)的纳米粒子的物理、化学特性,探讨鼠尾静脉注射装载MBP的纳米粒子诱导免疫耐受治疗手术脑损伤(SBI)继发性炎症的疗效。方法:①采用乳化溶剂挥发法合成含有支链普鲁兰多糖的聚乙烯醇(PVA)修饰聚-(β氨基酯)(PBAE)/聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)芯的纳米粒子;②30只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、对照组及实验组,每组10只。假手术组只开骨窗,保持硬脑膜的完整;对照组和实验组建立SBI模型,对照组经鼠尾静脉注射装载生理盐水(NS)的纳米粒子,实验组经鼠尾静脉注射装载同种异体MBP的纳米粒子。分别于SBI后1、7、14、21 d通过ELISA检测外周血血清中IL-2、IL-4水平,流式细胞术检测外周血CD4/^(+)CD8^(+)T细胞比值,进行改良神经功能缺陷评分(MNSS)。SBI后第21天以脑组织切片免疫组织化学染色法检测神经小胶质细胞的表面标记物离子钙接头分子(Iba-1)表达水平。结果:①成功制备装载MBP或NS的纳米粒子,平均直径分别为266.4 nm和287.5 nm,平均Zeta电位值分别为14.2 mV和9.7 mV,电子显微镜观察具有典型的“核-壳结构”;②术后第7、14、21天,实验组MNSS低于对照组,对照组高于假手术组(P<0.05)。术后第7、14天,假手术组和实验组IL-2浓度低于对照组(P<0.05),假手术组和对照组IL-4浓度低于实验组(P<0.05)。术后第7、14、21天,假手术组和实验组CD4/^(+)CD8^(+)T细胞低于对照组(P<0.05)。术后21 d大鼠脑组织切片Iba-1表达阳性的细胞显微镜下呈棕黄色,实验组Iba-1表达量较对照组明显降低。结论:①本实验设计的新型纳米粒子对MBP具有高效和稳定的装载性;②鼠尾静脉注射装载MBP的纳米粒子能诱导机体产生免疫耐受,降低SBI术后继发性炎症反应及脑神经功能缺陷,可激活小胶质细胞从而保护脑神经细胞。