摘要：目的建立一种快速测定高尿酸模型小鼠血浆中尿酸浓度的高效液相色谱(HPLC)法,并将其用于典型药物Lesinurad的降尿酸作用评价。方法采用Laballiance Series III HPLC系统,色谱柱为Kromasil C18柱(100 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇/0.5%乙酸(10∶90),等度洗脱,体积流量0.4 m L/min,检测波长为283 nm;应用建立的HPLC法测定小鼠ip给予250、500 mg/kg尿酸0.5、1.0、2.0 h后血浆中尿酸浓度;ig给予小鼠50、150 mg/kg Lesinurad 0.5 h后,ip 500 mg/kg尿酸制备模型,1 h后HPLC法测定血浆中尿酸浓度。结果在建立的HPLC法中,血浆尿酸浓度在7.5~150μg/m L与峰面积呈良好线性关系(r=0.997),方法专属性、重复性、精密度、样品稳定性、回收率均符合生物样品检测指导原则规定。与对照组小鼠内源性血尿酸浓度比较,250 mg/kg剂量组在0.5 h血浆尿酸浓度显著升高(P<0.01),500 mg/kg组在0.5、1.0、2.0 h血浆尿酸浓度均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,50、150 mg/kg Lesinurad组血尿酸浓度均显著下降(P<0.05、0.01),且呈剂量相关性。结论本研究建立的HPLC法简便、快速、准确,可用于小鼠血浆尿酸浓度测定及相关药物的药效评价,为小鼠高尿酸模型建立及后续降尿酸药物的筛选提供了快速可靠的分析手段。

摘要：为了开发一种专用于治疗鸡痛风的中药复方,试验借助中医传承辅助平台对用于治疗人痛风的中药复方金钱续断汤(Jinqian Xuduan decoction,JXD)进行优化设计,通过分析治疗痛风的中药复方用药规律,考虑药对、药性、药物组成和经济成本等因素,设计出JXD的3个衍生复方F1、F2、F3;按照体重250 mg/kg给小鼠灌胃氧嗪酸钾构建高尿酸血症小鼠模型,分为模型组和药物治疗的F1组、F2组、F3组,并设空白对照组,持续给药7 d后检测各组小鼠血清尿素氮、尿酸和肌酐含量,筛选出有效复方。通过高蛋白高钙饲料诱导构建鸡痛风模型,在造模的第0,7,14,21,28天分别称量每只鸡的体重、饲料重、饮水量并进行翅静脉采血,检测血清尿素氮、尿酸和肌酐含量。成功构建鸡痛风模型后,将筛选出的有效复方按照0.5%、1%、2%添加到鸡的饮水中,在给药后第1,3,5,7天分别称量每只鸡的体重、采食量和饮水量并检测血清尿素氮、尿酸和肌酐含量,确定有效复方的最佳使用浓度。结果表明:治疗痛风最常用的中药分别为薏苡仁、土茯苓和苍术。通过高尿酸血症小鼠模型筛选JXD的3个衍生复方,可见复方F2和F3都显著降低了小鼠血清中的尿素氮、尿酸和肌酐含量(P<0.05),且F3的效果最好,将其命名为仙芪方。饲喂高蛋白高钙饲料21 d成功构建了鸡痛风模型。2%的仙芪方饮水给药3 d即可有效降低鸡的血清尿酸含量,5~7 d即可恢复白羽肉鸡的生长性能。说明应用中医传承辅助平台能提高兽药产品的转化潜力,仙芪方对治疗鸡痛风具有较好的效果,最佳使用浓度为2%。