摘要：脉冲直流电导阻鱼技术已被广泛应用于阻止入侵物种扩散、驱赶鱼类远离危险区域并将其引导至有利区域,如鱼道。但是脉冲直流电的有效性受多方面因素的影响,其主导因素目前尚未定论。以鲤为研究对象,在静水条件下采用4因素3水平正交实验方法分析了脉冲电压、脉冲宽度、脉冲频率和电极摆放方式的电栅拦鱼效果及其对鱼类受伤尾数的主次影响,然后选择最优组合开展不同流速下(0,0.3,0.5 m/s)的驱鱼实验,分析流速对拦鱼效果的影响。结果表明:在静水工况下,影响拦鱼电栅效率的主要因素为电极布置方式>脉冲宽度>脉冲频率>脉冲电压,电极布置为方式1(垂直水流间距80 cm)、脉冲电压140 V、脉冲频率10 Hz、脉冲宽度10 ms是拦鱼效果最佳的组合。电学参数对鲤的伤害无显著性,平均受伤尾数不超过实验鱼总数的15%。流水条件下,三种流速工况下拦鱼电栅的阻拦率无显著差异,但是随着流速的增高阻拦率呈现先降低后增加的趋势。该研究将为保护鱼类资源和防止入侵鱼类跨区域传播提供依据。

摘要：为进一步研究程序性细胞死亡6互作蛋白Pdcd6ip(Programmed cell death 6-interacting protein)分子功能,探讨其表达对鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus,SVCV)增殖的影响,研究通过逆转录-聚合酶链式反应扩增得到两端带有Nhe I和EcoR I酶切位点的pdcd6ip编码片段,并将其克隆至真核表达载体pCI-neo上,构建了真核表达质粒pCI-pdcd6ip。获得的过表达质粒转染至EPC细胞后进行RT-qPCR和western blot检测Pdcd6ip的表达情况,并利用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响。细胞转染后24h进行SVCV感染,检测Pdcd6ip过表达对SVCV增殖的影响。结果显示,Pdcd6ip蛋白真核重组质粒能够在EPC细胞中大量表达,转染后72h细胞活性较对照组无显著差异。同时,免疫荧光、RT-qPCR和western blot检测结果均显示,Pdcd6ip蛋白过表达后,SVCV M蛋白mRNA水平和蛋白表达水平较对照组显著下降,表明Pdcd6ip过表达显著抑制了SVCV的增殖。研究为抗SVCV药物的研发提供了新的研究基础和设计思路。

摘要：【目的】鲤疱疹病毒2型和3型对鲤科鱼类危害严重,本研究旨在建立快捷、高效且能同时检测2种鲤疱疹病毒的检测技术。【方法】根据鲤疱疹病毒2型和3型的DNA聚合酶基因保守序列,设计2对特异性引物,通过对双重PCR反应条件的优化,建立检测鲤疱疹病毒2型和3型的双重PCR方法;使用该方法对试验室保存的鲫和鲤病鱼组织样品进行检测。【结果】该方法能够分别对鲤疱疹病毒2型和鲤疱疹病毒3型各扩增出715 bp和456bp的特异性条带,表现出良好的特异性;敏感性试验结果显示,该方法的检测极限值为100 copies·μL-1,具有较高的灵敏性。使用该方法对本试验室保存的18份临床病料进行PCR检测并对PCR产物进行测序验证,结果显示CyHV-2和CyHV-3阳性的各有3份,其阳性率都为33.3%;分别对2份CyHV-2和CyHV-3阳性样品混合后进行检测,结果混合样品均为CyHV-2和CyHV-3双阳性,与常规检测方法得到的结果相同。【结论】本研究建立的双重PCR检测方法特异性强、灵敏度高,可用于CyHV-2和CyHV-3的快速检测和鉴别诊断。

摘要：在鱼类育种、渔业资源调查和水产养殖的过程中,均需要对鱼体的体长、体厚、体高等性状参数进行测量。传统测量方法主要采用人工测量方式,劳动强度大、效率低、测量精度低。利用机器视觉技术进行鱼类性状测量可以有效提高测量效率和精度,易于实现自动化。本研究基于机器视觉技术,设计了一个一体化性状测量平台,将鱼类图像采集与分析、体质量与可量性状测量、PIT扫码集成到一个平台,可实现对鲤、鲫鱼性状参数的精确测量。对鱼体2D图像进行性状测量时,需要进行像素校准,由于每条鱼体厚不同,传统的固定像素校准平面在鱼体厚较大时,难以实现精确测量。本研究设计了一种像素校准方法,即在采集鱼体图像时,通过距离传感器测定鱼体体厚,根据体厚大小,确定每条鱼轮廓面的像素校准参数,减小测量误差,提高鱼体可量性状测量的准确性。以鲤、鲫鱼人工测量结果作为对照,比较该系统的测量误差,结果显示,随着鱼体体厚的增加,体长、体高、头长、尾柄长、尾柄高、体厚等参数的相对测量误差没有显著增大。体高和体长相对误差最大值为1.05%、-1.39%;头长、尾柄高、尾柄长和体厚等相对误差最大值分别为1.73%、-2.79%、-2.88%和-2.1%,绝对误差值均小于1 mm。体质量相对误差最大值为-0.36%。该系统满足鲤、鲫鱼性状测量要求。

摘要：参考深水网箔、联合渔法、迷魂网以及底层鱼诱捕定置网箱等定置网中八字门的设计,并结合本试验条件设计了模拟八字门,研究了鲤Cyprinus carpio、草鱼C tenopharyngodon idellus在400 Hz正弦波连续音刺激下对模拟八字门的行为反应,探讨了用于捕捞鲤、草鱼定置网中八字门的有关参数。结果表明:在声音刺激下,鲤、草鱼能够在较短时间内进入八字门,其平均进门时间分别为33.7、38.5 s;在门内平均停留时间分别为31.6、37.8 s;平均聚集时间分别为76.0、80.6 s;进门率均为100%;八字门通过率分别为68.3%、81.6%。两种鱼的试验数据经t检验差异均不显著(P>0.05)。

摘要：针对鲤(Cyprinus carpio)这一主要水产养殖品种设计了靶位区域扩增多态性(target region amplified polymorphism,TRAP)分子标记的反应体系,对影响TRAP反应体系的各参数,包括Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、模板DNA和引物浓度进行了优化,建立了适合鲤的、稳定、可重复的TRAP-PCR反应体系。在15μlPCR反应体系中,Mg2+浓度为1.5mmol/L、dNTPs浓度为0.35mmol/L、两个随机引物浓度均为3pmol/L、固定引物浓度为10pmol/L、含DNA模板60ng、TaqDNA聚合酶1.0U。鲤的TRAP反应程序为:94℃4min,1个循环;94℃45s,35℃45s,72℃1min,5个循环;94℃45s,53℃45s,72℃1min,35个循环;72℃10min,1个循环。这一优化体系的建立为今后进行鲤群体遗传多样性、种质鉴定、遗传连锁图谱及亲缘关系分析等方面的研究提供了新的分子标记。

摘要：以黑龙江鲤Cyprinus carpio haematopterus、荷包红鲤抗寒品系、荷包红鲤Cyprinus carpio var.、柏氏鲤Cyprinus pellegnini pellegnini以及荷包红鲤抗寒品系(父本)与柏氏鲤(母本)杂交F2的DNA样品为材料,用300个随机引物对其进行PCR扩增,获得2个与鲤抗寒性状相关的分子标记AL04986和AR02788。回收、纯化这两个RAPD标记,连接到pMD18-T载体中,转化DH5α大肠杆菌感受态细胞,并对插入片段进行测序。根据测序结果,设计了3对SCAR引物SCAL04L/SCAL04R1、SCAL04L/SCAL04R2和SCAR02L/SCAR02R,其中SCAR02L/SCAR02R这对引物可以成功的反映出杂交F2两个群体在抗寒能力上的差异,适宜的退火温度为57℃,将此标记命名为SCAR02788。根据AL04986的测序结果设计的两对SCAR引物并没有反映出这种差异。SCAR02L/SCAR02R标记可以用作鲤抗寒基因分子辅助选择的依据。

摘要：根据 β珠蛋白的N末端和C末端氨基酸序列的保守性设计 2 0bp长的简并引物 ,用RT PCR方法扩增并克隆了鲤、草鱼、鲫的 β珠蛋白基因cDNA。结果显示克隆 3种鱼的 β珠蛋白基因cDNA全长为 4 4 1bp。对它们所编码的氨基酸序列的比较可以看出虽然它们都属于鲤科但氨基酸的组成却有较大的差异。根据所克隆的cDNA分别设计特异引物用PCR方法克隆了 3种鱼的基因组DNA全长 ;从起始密码子到终止密码子的长度分别为鲤 6 6 7bp、草鱼6 2 9bp、鲫 6 6 7bp。 3种鱼中均含有 3个外显子和 2个内含子且内含子的插入位置相同。内含子的碱基序列差异很大。鲫与鲤内含子 1和 2的长度完全相同 ,而与草鱼的内含子长度则相差较大。

摘要：饥饿是鱼类无法有效获取食物从而使机体呈现能量匮乏的特殊时期,DHA(Docosahexaenoic acid)作为大多数鱼饥饿后得以特别保留的高不饱和脂肪酸,它对饥饿鱼体可能具有特殊的能量调控作用。为进一步探讨这一问题,研究设计了以下饲养试验:先在6%与12%两个油脂水平下分别添加3%DHA制品,形成基础组、基础-DHA组、高脂组和高脂-DHA组共4组试验饲料。将尾均重为(14.81±0.13)g的鲤360尾随机分为4组,每组3个重复,每个重复30尾鱼,分别用以上4组饲料对进行饲喂,饲养74d后,每个养殖缸随机余留6尾鲤(Cyprinus carpio L.)进行饥饿,36d后检测饥饿鲤体重、生物学性状、体成分、血清生化指标等。结果显示:(1)在同一脂肪水平下,DHA添加组饥饿鲤体重减重率均分别显著高于无DHA组(P0.05);(3)在2个油脂水平下,DHA添加组饥饿鲤肌肉及肠脂肪含量均分别显著低于无DHA组(P0.05);(4)饥饿鲤血清生化指标在各组间均无显著差异(P>0.05)。结果表明,DHA添加组饥饿鲤体重、肝细胞直径以及肌肉及肠脂肪含量均呈显著下降趋势,显示出DHA的添加未能协助鲤有效抵御饥饿等不良环境的胁迫。

摘要：根据斑马鱼（Danio rerio）Myf-6基因序列设计引物,用鲤（Cyprinus carpio）肌肉组织总RNA,经RT-PCR扩增获得Myf-6基因开放阅读框（ORF序列）720 bp,GenBank登陆号为GU339054。编码239个氨基酸,与斑马鱼、大西洋鲑、刀鱼、河豚等同源性分别为90%、76%、76%和72%,但与哺乳动物如人、牛、兔、小鼠和绵羊的同源性较低,为59%~60%。利用半定量RT-PCR分析鲤Myf-6基因的mRNA表达特性,结果在心脏、肾脏、脂肪、肝胰脏、肌肉和脾脏中均检测到Myf-6基因的表达,并且在肌肉组织中表达量显著高于其他组织（P〈0.05）。Myf-6基因表达随着生长发育变化呈下降趋势,在较大规格试验鱼（500 g）的表达极显著低于其他两种规格（50~60 g1、20~130 g）试验鱼的表达（P〈0.01）。