摘要：目的建立一种快速、简便、准确的分子生物学方法,用来鉴别鹿鞭真伪及品种。方法应用柱色谱法提取梅花鹿鞭、马鹿鞭、牛鞭以及市售鹿鞭线粒体DNA;根据GenBank中鹿类动物线粒体细胞色素b基因序列,设计一对引物用于线粒体DNA的聚合酶链式反应(PCR)特异性扩增;应用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对聚合酶链式反应产物进行单链构象多态分析(single strand conformation polymorphism,SSCP)。结果梅花鹿鞭、马鹿鞭以及部分市售鹿鞭可显示清晰且迁移率不同的片段;对照组伪品鹿鞭及部分市售鹿鞭无特异性显示。结论柱色谱法提取线粒体DNA所需时间短,DNA纯度高,DNA分子的破坏性较小,为特异性聚合酶链式反应扩增提供一级结构保证;单链构象多态分析法可以清晰显示正品梅花鹿鞭、马鹿鞭以及部分市售鹿鞭单链片段,其一级结构中的碱基差别为正品梅花鹿鞭、马鹿鞭的不同迁移率提供依据,也为药源市场鹿鞭的鉴别提供一种可以直接进行亚种间鉴别的快速、简便、准确的可行性方法。

摘要：目的探讨鹿鞭及牛鞭线粒体细胞色素b基因部分序列片段特征,建立中药材鹿鞭敏感、特异的DNA分子标记学鉴定方法。方法碱变性法提取新鲜鹿鞭及牛鞭,采用引物设计软件PrimerPremier5.0对鹿鞭及牛鞭的细胞色素b基因序列分析,用于鉴定正品鹿鞭的特异性引物,经聚合酶链式反应(PCR)扩增,对鹿鞭进行DNA指纹鉴定。结果对鹿鞭进行mtDNA鉴定图谱显示,真品鹿鞭有306bp条带,伪品没有。结论用此方法对鹿鞭进行鉴定,可准确辨别正品与伪品。重现性、稳定性好,简便准确而可行。鹿鞭mtDNA具有特异性指纹特征,所得鹿鞭DNA指纹特征图谱可用于鹿鞭的鉴定。

摘要：本文从中药鹿鞭的药材应用依据(本草考证、基源、加工);化学成分(脂肪酸、氨基酸、多胎与蛋白质、磷脂、生物胺、甾体、维生素、无机元素、糖类等九大类数十种);生药鉴定(性状、显微、光谱、生物学、免疫学、X光片摄影技术等);药理作用(壮阳、补益作用);替代品研究等五个方面,较全面地对中药鹿鞭的研究进展进行了综述。从目前的研究进展看,中药鹿鞭的研究范围较广,且有些研究较深入,如在生物学鉴别中,已应用了DNA分子鉴定技术,并且已设计出了一对位点特异性鉴别引物,不仅对于鹿鞭类药材鉴别,而且对整个鹿类药材的鉴别都具有主要的意义。因此,本文为中药鹿鞭的进一步深入研究提供了较全面的研究综述。

摘要：目的建立鹿鞭及其伪品指纹鉴定方法,开发鹿鞭DNA检测试剂盒。方法采用改良的SDS方法从鹿鞭及牛鞭基因组中提取DNA。以鹿鞭线粒体细胞色素b作为靶基因,设计鹿鞭特异性引物,利用现代DNA指纹技术,研制了鹿鞭DNA提取和检测试剂,建立鹿鞭指纹鉴定方法,开发出鹿鞭DNA检测试剂盒。结果利用PCR指纹技术提取的鹿鞭基因组DNA为21000 bp,纯度为1.80±0.10之间;应用特异性引物可准确鉴别鹿鞭及牛鞭样品,鹿鞭特异性扩增产物DNA分子片段为307 bp,而牛鞭及阴性对照无扩增条带;自主研发鹿鞭DNA检测试剂盒经反复冻融依然有效,多次进行特异性、稳定性和重现性试验,结果完全一致。结论鹿鞭DNA检测试剂盒可作为鹿鞭鉴定的有效方法,该方法客观、准确、方便,可有效区分鹿鞭及其伪品。

摘要：目的建立一种应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)鉴别梅花鹿鞭与马鹿鞭的方法。方法根据梅花鹿与马鹿的细胞色素b基因序列的差异,设计并选取DNA限制性内切酶MseI来区分梅花鹿鞭和马鹿鞭。采用改良SDS法提取样本基因组DNA,经PCR扩增后进行RFLP分析,并优化PCR-RFLP反应体系及反应条件,用优化的PCR-RFLP体系对市售鹿鞭样本进行鉴定。结果经PCR-RFLP分析,MseI可切割梅花鹿与马鹿Cyt b片段,前者被切成2个片段,后者被切成3个片段,从而将两者进行鉴别。结论本实验建立的PCR-RFLP方法可准确鉴别梅花鹿鞭与马鹿鞭。

摘要：一般地说,地方戏有三美:语言冲突中的情趣美,性格冲突中的性情美,情感冲突中的悲怆美。一、语言冲突中的情趣美生活中,有许多矛盾不便直言表达,绕个弯,打个比,指桑骂槐,说古喻今,从婉转迂回中展现冲突,实际表达的是矛盾冲突中的情趣美。在艺术中,宛转的表达和生活是一致的,只不过比生活原生态更美更俏罢了。例如《杨八姐游春》中皇上要娶杨八姐,佘太君如果直言不从便犯抗君之罪,只得以"要彩礼"为托词,