摘要：根据建兰花叶病毒（Cymbidium mosflic virus，CymMV）和齿兰环斑病毒（Odontoglossumringspotvirus，ORSV）这两种主要兰花病毒的保守序列设计特异性引物，在CymMV和ORSV单一RT～PCR优化体系的基础上。建立了同时检测CymMV和ORSV的双重RT—PCR检测方法。此方法可特异性地从感染CymMV和ORSV的样品中扩增出2条目的带，即CymMV（781bp）和ORSV（588bp）。扩增产物测序表明，CymMV扩增产物与GenBank中登陆的分离物核苷酸同源性为84％～97％，ORSV扩增产物与GenBank中其它分离物的核苷酸序列同源性为98％-99％。运用该方法对随机抽取的田间样品及组培苗样品进行检测，都得到了特异性扩增条带，其灵敏度达到了10^-5。

摘要：齿兰环斑病毒(Odontoglossum ring-spot virus,ORSV)和建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)复合侵染兰科植物的现象在自然界中非常普遍。通过设计一对简并引物可以同时扩增获得复合感染的兰科植物中两种病毒核酸片段(CymMV约558 bp,ORSV约825 bp),由此建立一步式免疫捕获-反转录-聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)技术以检测2种病毒的复合侵染情况。利用该技术对来自广东汕头的35株兰样进行感病性测试,发现31株呈阳性,感病率为88%。阳性株中,ORSV感染率为87%(27株),CymMV感染率为29%(9株),复合感染率16%(5株),说明这一地区ORSV感病率较高,并与CymMV存在明显复合感染。扩增条带T载体克隆测序表明,与已知CymMV和ORSV分离物的核酸分子平均同源性分别高达97%和99%。

摘要：在昆明市文心兰栽培基地发现了具有病毒病症状的感病文心兰和大花惠兰植株。感病文心兰和大花惠兰样品在电镜下可观察到长约460-500 nm的线状病毒粒体和长约300 nm的杆状病毒粒体,它们分别与已报道的建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒粒体大小一致。利用ELISA技术在感病文心兰和大花惠兰样品可以检测到建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒。利用建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的特异性引物,运用RT-PCR方法可以扩增到与引物设计预期大小一致的核酸条带。由此证明,云南文心兰和大花惠兰病毒病由建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒中的一种或两种侵染引起。