摘要：采用碱性蛋白酶水解酪蛋白,制备水解度为10.9%、IC50值为52.6μg/mL的酪蛋白水解物,并利用响应面法优化碱性蛋白酶催化的类蛋白反应修饰条件。修饰反应时间固定为6h时,适宜的条件为酶添加量3.1kU/g pro、底物质量浓度50g/100mL、反应温度25℃。制备9个修饰程度不同的修饰产物,结果显示:修饰产物ace抑制活性均提高,并且活性最高的修饰产物的IC50降低至14.9μg/mL。该修饰产物离心分级后,上清液部分和沉淀部分的ace抑制活性分别低于和高于修饰产物,表明沉淀部分是提高ace抑制活性的主要原因;Tricine-SDS-PAGE电泳分析表明,修饰产物及沉淀部分有较大分子质量的肽分子生成;该修饰产物和上清液部分、沉淀部分的进一步酶水解处理则显示,酶水解会导致它们的ace抑制活性降低,但是仍然高于最初的酪蛋白水解物。

摘要：利用碱性蛋白酶水解酪蛋白,制备出水解度为12.6%、ace抑制活性为48.2%的酪蛋白水解物。利用碱性蛋白酶、在丙醇-水介质中进行类蛋白反应修饰酪蛋白水解物,研究反应温度、酶添加量、底物质量浓度、丙醇浓度对修饰反应的影响。响应面法试验设计,得到最优条件为反应温度47℃、酶添加量8.3 kU/g,底物质量浓度56.8 g/100 mL,丙醇体积分数58.5%。利用此条件制备出的反应程度不同的5个修饰产物,ace抑制活性分析结果显示,抑制活性最高可以达到63.8%。在相应条件下加入酪氨酸或苯丙氨酸,对比试验结果显示,添加苯丙氨酸或酪氨酸会导致修饰产物抑制活性增加或降低。

摘要：采用碱性蛋白酶水解酪蛋白,制备水解度为12.4%、IC50为42.19μg/mL的酪蛋白水解物。在添加外源氨基酸的情况下对水解物进行类蛋白反应修饰,并响应面法研究氨基酸添加量、酶添加量、反应温度及3种氨基酸的影响。结果表明:氨基酸添加量、反应温度、氨基酸种类对修饰反应影响显著,而酶添加量的影响不大;分别添加苯丙氨酸、亮氨酸、缬氨酸制备3个酪蛋白水解物修饰产物,其IC50降低至21.03～25.13μg/mL,表明添加外源氨基酸可提高修饰产物的体外ace抑制活性,但添加不同氨基酸的影响不显著。

摘要：利用响应面法优化类蛋白反应条件修饰酪蛋白水解物制备酪蛋白类蛋白物。酪蛋白类蛋白物的ace抑制活性高于酪蛋白水解物，IC50值从52．6mg／L降低到14．9mg／L。利用乙醇一水混合溶剂对酪蛋白水解物和类蛋白物进行分级，结果表明，极性最低的溶剂得到的上清液部分活性较高，而沉淀部分活性较低。4种蛋白酶水解酪蛋白类蛋白物的分级产物，导致活性下降，除碱性蛋白酶外，木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶的水解产物ace抑制活性为31．5%-46．8％，但是仍然高于酪蛋白水解物ace抑制活性（27．8％），表明类蛋白反应提高了酪蛋白水解物对一些蛋白酶的体外抵抗能力。

摘要：血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ace)通过作用于维持血压正常的肾素-血管紧张系统(rennin-angiotensin system,RAS)和激肽释放酶-激肽系统(kallikrein-kinin system,KKS),使其失衡导致血压升高.而ace活性抑制肽可以竞争性地与ace的活性中心结合,从而抑制ace的活性,使血压降低.天然来源的ace抑制肽与传统的降压药物相比效果较好,无毒副作用,对正常血压没有影响,对于高血压的治疗和人类健康具有重要意义.本文以酪蛋白中提取的ace活性抑制肽KVLPVP为先导肽,根据ace抑制肽的结构特点,设计合成一系列的类ace肽(similar ace-like peptides).利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)直接测定其体外ace抑制活性.结果表明,当芳香性的氨基酸残基Phe、Tyr、His和疏水性Val残基位于C-端时会提高多肽的ace抑制活性,尤其是His位于C-端时,ace抑制活性更强.通过对比先导肽与所合成的类ace肽的ace活性抑制率,可以发现,类ace肽的ace活性抑制率均高于先导肽.基于不同氨基酸残基位于C-端时对多肽的ace抑制活性的研究,可以为降血压药物分子设计和筛选提供基础.

摘要：研究胃蛋白酶水解酪蛋白制备ace抑制肽的工艺条件。采用胃蛋白酶水解酪蛋白制备ace抑制肽,检测其水解产物的ace抑制率,以ace抑制率为指标,通过正交试验设计法,确定最终水解条件为水解温度37℃、pH3.0、酶与底物质量比1:100、底物质量分数7%,水解产物ace抑制率为92.5%,其IC50值为0.24mg/mL。酪蛋白的水解度与ace抑制率之间并非简单的相关性。