摘要：目的:克隆夏侧金盏花中actin基因片段并分析其组织部位表达,为以actin基因为内参研究夏侧金盏花中其它基因的表达和调控奠定基础。方法:通过比较其它植物中actin基因序列,设计夏侧金盏花actin基因片段的PCR引物,扩增产物经克隆和测序,获得序列信息;根据获得的序列设计半定量RT-PCR引物,分析actin基因在夏侧金盏花不同组织部位的表达。结果:克隆获得一长度为1 009bp的夏侧金盏花actin基因片段,命名为AdACT,并在GenBank注册,登录号为JX436162;半定量PCR研究发现其在不同组织部位的表达无显著差异。结论:本研究初步表明其可作为研究夏侧金盏花基因表达的内参基因。

摘要：利用同源克隆的方法设计特异性引物,从龙脑樟中获得一个333bp的基因片段,编码110个氨基酸。该片段的蛋白分子量为12.37ku,理论等电点为5.03,平均疏水性(GRAVY)为-0.312,α螺旋、β片层和无规则卷曲的比例分别为40.04%、10.09%和45.87%。同源比对和进化树分析结果都表明,龙脑樟actin基因与香樟、山鸡椒的actin基因具有较高的同源性。龙脑樟actin基因片段的克隆,为深入研究该基因的表达调控及龙脑樟遗传与进化关系提供理论基础。

摘要：为研究功能基因在厚藤(Ipomoea pes-caprae L)中的表达和调控提供内参基因,本文根据actin基因的保守区设计简并性引物,采用RT-PCR克隆厚藤的actin基因片段,然后将获得的片段连接于克隆载体上进行测序,并运用分子生物学软件对该基因序列进行分析。结果表明,该基因片段大小为554bp,编码184个氨基酸;该序列与其他植物actin基因的cDNA序列的同源性均在80%以上,与氨基酸序列的同源性在94%以上。由此得出,本研究克隆的基因序列为actin基因片段,将其命名为Ipactin1,并登录在GenBank,登录号为KU564627。

摘要：根据其它植物actin基因设计一对简并性引物,以甜菜根总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出actin基因片段并克隆到pUCm-T载体上,阳性克隆经PCR鉴定测序。序列分析表明,克隆得到actin基因家族的两个成员,其片段长度均为598 bp,编码198个氨基酸,它们间的同源性为87%。将其分别命名为BvACT1和BvACT2,已在GenBank中注册,登录号为KF214784和KF214785。多重序列比较表明,BvACT1氨基酸序列与其他植物actin基因的同源性在92%以上,而BvACT2则在93%以上。

摘要：为研究马缨杜鹃相关功能基因的表达模式提供内参基因,本研究根据Gen Bank中公布的锦绣杜鹃肌动蛋白基因(actin)的保守序列设计引物,以马缨杜鹃c DNA为模板,利用RT-PCR方法克隆得到马缨杜鹃actin基因部分c DNA片段,将其命名为Rd actin。结果显示:该基因片段长度为468 bp,编码156个氨基酸;保守域分析表明该基因具有actin的功能保守域,同时Rd actin与其它植物actin的氨基酸序列同源性达97%以上。

摘要：看家基因actin常被用作定量、半定量PCR试验的内参基因。为研究其他基因在南美蟛蜞菊响应环境变化的表达调控机制,根据GenBank上已登录的肌动蛋白基因(actin)的同源核苷酸保守序列,设计特异性引物,利用RT-PCR的方法克隆获得了南美蟛蜞菊actin基因的全长序列,并将该序列命名为WtAct。序列分析结果表明WtAct基因全长为1 134 bp,编码377个氨基酸,且与已发表的蓖麻、麻风树、青葙、向日葵等植物的核苷酸序列同源性分别在82.9%~93.6%,与这些植物的氨基酸序列相似度在94.0%~99.7%,其中南美蟛蜞菊WtAct与向日葵actin基因的氨基酸序列相似度最高,达到了99.7%。进化树分析也表明,两者的同源性最高。采用RT-qPCR方法检测以WtAct为内参基因时南美蟛蜞菊热休克蛋白基因HSP70在不同处理条件下的表达情况,表明HSP70的确受到不同环境变化的诱导表达,说明WtAct可以作为有效的内参基因。这些结果为深入研究南美蟛蜞菊相关功能基因的表达提供了理论基础,也为其他非模式植物actin基因的克隆提供了借鉴。

摘要：为了研究应用于狗尾草响应不同干旱及盐胁迫基因表达的内参基因,本研究从网站https://***/pz/***上获得狗尾草A10品系8个actin基因的cDNA序列,设计荧光定量PCR引物,以不同程度的干旱及不同浓度盐胁迫处理的狗尾草幼苗cDNA做模板,进行荧光定量PCR试验,通过实时荧光定量PCR扩增片段电泳分析,扩增曲线及溶解曲线综合分析,结果表明登录号Sevir.9G114100对应的actin基因是8个actin基因中最合适的内标基因。并对所选内标的实用性进行了验证,验证的结果与转录组数据的结果保持一致,证明所选内标基因可用于后续狗尾草响应不同干旱及盐胁迫狗尾草转录组基因表达的验证工作,为深入研究狗尾草功能基因奠定分子基础。

摘要：以文心兰叶片为材料,根据Gen Bank中登录的植物肌动蛋白基因同源核苷酸保守序列设计简并引物,利用RT-PCR技术得到了2个动蛋白基因(actin)片段。序列分析结果表明,2个actin基因片段长度均为1062 bp,2条序列一致性为90.87%,分别命名为OnA CT1和OnA CT2,并在Gen Bank注册,登录号分别为JN981136和JN981137。2条序列编码完全相同的354个氨基酸,具有actin蛋白的特征序列;进化树分析表明,文心兰actin蛋白与萼脊兰和蕙兰的亲缘关系最近。采用实时荧光定量(qR T-PCR)和半定量RT-PCR(Semi-quantitative RT-PCR)方法进行表达分析,结果显示该基因在营养生长和生殖生长阶段的不同组织中表达相对稳定,可以作为发育阶段相关基因表达研究的内参基因。

摘要：为给火龙果的功能基因表达和调控研究提供内参基因,根据actin基因和UBQ基因的保守区设计引物,采用RT-PCR方法克隆火龙果actin基因和UBQ基因片段。结果表明:克隆的actin基因和UBQ基因片段大小分别为302bp、192bp,分别编码100个氨基酸和63个氨基酸。actin基因片段与其他植物actin基因核苷酸序列的同源性均在78%以上,与氨基酸序列的同源性达88%以上;UBQ基因片段与其他植物UBQ基因核苷酸序列的同源性均在88%以上,与氨基酸序列的同源性达95%以上。

摘要：根据黄瓜棒孢叶斑病菌多主棒孢(Corynespora cassiicola)与棒孢属下女贞棒孢(Corynespora lieustri)、威尔士棒孢(Corynespora cambrensis)和其他常见病原真菌actin基因序列差异,设计多主棒孢的特异性引物Caa5F/Caa5R,建立了黄瓜棒孢叶斑病菌的PCR检测方法,可对引起黄瓜棒孢叶斑病的病原菌扩增出160 bp的特异性条带,检测灵敏性为4 pg·μL-1 DNA,并可从接种后发病的黄瓜叶片总DNA中检测到特异条带。该引物的PCR检测方法灵敏性较高,可直接检测植株总DNA,无需病原菌的分离培养,适用于对黄瓜棒孢叶斑病特异快速的检测。