摘要：目的观察下颌下腺切除对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)和Bax mRNA表达的影响。方法切除大鼠下颌下腺,分别于术后14d、28d和42d处死大鼠,提取睾丸总RNA,反转录,设计特异性引物和Taqman探针,荧光定量RT-PCR检测annexin 5和Bax mRNA的表达。结果荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,切除下颌下腺14d和28d后,实验组大鼠睾丸annexin 5 mRNA分别升高了38.5%和55.3%,但无显著性差异;实验组大鼠睾丸Bax mRNA分别升高了70.6%和80.5%,其升高具有显著性差异(P<0.05和P<0.01);切除下颌下腺42d时,实验组大鼠睾丸annexin 5和Bax mRNA分别升高5.6%和2.3%,几乎恢复到与对照组相同的水平。结论下颌下腺切除后14d和28d可造成大鼠睾丸annexin 5和Bax mRNA的表达升高;切除后42d,annexin 5和Bax mRNA又恢复到正常水平。

摘要：应用Crispr/Cas9基因编辑技术敲除MDCK细胞中的annexin A2基因,并验证其是否为ε毒素在MDCK细胞表面的受体。根据Crispr/Cas9靶点设计原则设计靶点,构建PALentiCRISPR v2重组质粒。借助Crispr/Cas9技术,将构建好的质粒转染至MDCK细胞中,用嘌呤霉素筛选敲除annexin A2蛋白的MDCK细胞株,并通过测序和Western blot验证敲除效果。通过细胞毒性试验验证MDCK细胞膜表面的annexin A2蛋白是否为ε毒素的受体蛋白。测序结果和Western blot结果表明,通过Crispr/Cas9技术成功敲除了MDCK细胞的annexin A2基因,但细胞毒性试验结果表明,敲除annexin A2基因并不能减弱ε毒素对MDCK细胞的毒性。结果表明,annexin A2蛋白不是ε毒素在MDCK细胞表面的受体,研究结果为今后MDCK细胞其他蛋白的敲除提供了试验方法,构建的annexin A2基因敲除的MDCK细胞也为annexin A2蛋白引起的其他疾病的研究奠定了基础。

摘要：根据猪的annexin A2基因序列设计引物,通过PCR方法扩增annexin A2基因cDNA,并将其克隆到pGEM-T载体后进行测序分析,然后将测序结果正确的annexinA2基因cDNA亚克隆到pEGFP-N1表达载体上,成功构建了表达载体。将表达载体瞬时转染Marc-145细胞,结果表明:表达载体pEGFP-N1-ANXA2可以在Marc-145细胞中表达。

摘要：测定自制的A nnex in V变体冻干品中的氯化亚锡含量。在酸性条件下,用钼酸钠-硫氰酸钾比色法测定,K=460nm。亚锡在5—50Lg内线性关系良好,低、中、高三浓度平均回收率分别为102.9%,99.9%,101.0%;RSD分别为6.4%,8.1%,5.1%(n=6)。用比色法测定A nnex in V变体冻干品中亚锡含量,方法简便、迅捷、试剂易得,可用于冻干品中氯化亚锡的质量控制。

摘要：目的 :设计、合成Caspase 3mRNA反义寡核苷酸 ,并筛选出能阻抑Aβ2 5～ 3 5诱导的PC 12细胞凋亡的有效片段。方法 :针对Caspase 3mRNA不同区域设计出一系列 17～ 18 mer反义寡核苷酸 ,用脂质体导入PC 12细胞内 ,并用Aβ2 5～ 3 5诱导细胞凋亡。用annexinⅤ FITC/PI复染、流式细胞术检测观察凋亡早期细胞变化情况。结果 :针对Caspase 3mRNA编码起始区的反义寡核苷酸片段 (ASODN2 ,-6～ 12 ,5’ GTTGTTGTCCATGGTCAC 3’)导入PC 12细胞后 ,在Aβ2 5～ 3 5诱导下 ,annexinⅤ /PI复染、流式细胞仪检测见早期凋亡细胞较对照组及其它反义寡核苷酸组明显减少 (P 0 .0 5 )。结论 :*** 3在Aβ2 5～ 3 5诱导的PC 12细胞凋亡中起重要作用 ;2 .Caspase 3mRNA的反义寡核苷酸片段 5’ GTTGTTGTCCATGGTCAC 3’能有效阻止Aβ2 5～ 3 5诱导的PC

摘要：根据一个从巴西橡树胶乳cDNA文库中获得的EST片段的序列设计引物,通过RACE的方法获得了橡胶树编码annexin的cDNA,命名为AnnHb1。序列分析表明,AnnHb1长为1 198 bp,含有945 bp的阅读框,62 bp的5'-UTR和191 bp的3'-UTR,编码314个氨基酸,分子量为35.99 ku,等电点为8.18。该氨基酸序列与蓖麻、麻疯树、棉花、苜蓿、烟草和拟南芥中的annexin的同源性分别为82%、72%、72%、64%、60%和60%。半定量RT-PCR分析结果表明AnnHb1基因在愈伤、花、树皮、叶、胶乳中均有表达,其中在愈伤组织中表达量最低,树皮中表达量最高。