摘要：我们在分子设计的基础上，采用b细胞优势表位预测并结合实测的方法，设计合成人C5a的b细胞表位多肽，以此为抗原按常规方法免疫bALb/c小鼠，制作表位多肽单克隆抗体，在传统ELISA鉴定的基础上，利用生物传感器分析方法，分别研究单克隆抗体与表位多肽和全长C5a分子的结合动力学规律。

摘要：抗原-抗体的特异性结合是由抗体表面的抗原决定簇与抗原表面的表位基序间的特异性互补识别决定的。b细胞表位作图既包括b细胞抗原表位基序的鉴定(即确定抗原分子上被b细胞表面受体或抗体特异性识别并结合的氨基酸基序),也包括绘制抗原蛋白的全部或接近全部的b细胞表位基序在其一级或高级结构上的分布图谱的过程。b细胞表位作图是研发表位疫苗、治疗性表位抗体药物和建立疾病免疫诊断方法的重要前提。目前,已经建立了多种b细胞表位鉴定或绘制抗原蛋白b细胞表位图谱的实验方法。基于抗原-单抗复合物晶体结构的X-射线晶体学分析的b细胞表位作图和基于抗原蛋白或抗原片段的突变体库筛选技术的b细胞表位作图可以在氨基酸水平,甚至原子水平上揭示抗原分子上与单抗特异性结合的关键基序;其它b细胞表位作图方法(如基于ELISA的肽库筛选技术)常常只能获得包含b细胞表位的抗原性肽段,因而,很少用于最小表位基序的鉴定;而改良的生物合成肽法多用于b细胞表位的最小基序鉴定和精细作图。鉴于每种b细胞作图方法都存在各自的优势与不足,b细胞表位作图往往需要多种作图方法的有机结合。本文对目前常用的b细胞表位作图的实验方法及其在动物疫病防控中的应用进行综述,以期为研究者设计最佳的表位作图方案提供参考。

摘要：根据Genbank中马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(bmG3PD基因)序列设计引物,以马来丝虫mRNA为模板,RT-PCR扩增bmG3PD基因,将其克隆入pGEM-T载体,转化大肠埃希菌(***)DH5α,筛选阳性克隆。经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及PCR鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-bmG3PD,经序列分析及同源性比较,以及对其编码产物进行b细胞表位预测,结果表明PCR扩增的特异性条带为1020bp,与预期相符,与Genbank已知基因序列同源性为99%。编码产物b细胞表位预测,氨基酸区域可能在22～36、242～255、303～318和326～336位。

摘要：目的预测肿瘤抗原MAGE-A亚家族的b细胞表位,为基于多靶点的肿瘤疫苗设计提供依据。方法基于MAGE亚家族各成员蛋白质序列,采用Kyte-Doolittle的亲水性方案,Emini方案,Karplus方案和Jameson-wolf抗原指数方案,并辅以MAGE蛋白的二级结构柔性区域分析,预测MAGE基因家族的b细胞共同表位。结果共预测出了5条共同表位,且部分b细胞表位高度相似或一致。结论二级结构与b细胞表位相结合的预测方法为一种高效、准确的表位预测方法,可为肿瘤治疗性疫苗的设计提供实验依据。

摘要：目的设计合成肿瘤抗原MAGE-12的b细胞表位并研究其表位联合应用的免疫原性。方法在MAGE-12的b细胞表位序列MAGE-123-14(LEQRSQHCKPEE)、MAGE-1282-93(QSDEGSSNEEQE)的基础上,采用4分枝多重抗原肽结构设计合成抗原肽后分MAGE-123-14组、MAGE-1282-93组、MAGE-123-14联合MAGE-1282-93组,分别以MAGE-123-14、MAGE-1282-93、MAGE-123-14联合MAGE-1282-93抗原肽免疫C-57bL/6小鼠,产生多克隆抗体,应用ELISA和免疫组化实验检测多克隆抗体是否为抗原肽的特异性抗体。结果免疫C-57bL/6小鼠后可产生MAGE-12的抗原特异性的多克隆抗体,且多表位抗原肽联合使用组抗体效价高于单表位抗原肽组产生的抗体效价。结论证明MAGE-12的b细胞多表位抗原肽联合使用的免疫原性强于单个b细胞表位抗原肽的免疫原性。

摘要：目的　设计合成肿瘤抗原MAGE 12的b细胞表位抗原肽并对其进行鉴定。方法　在预测MAGE 12的b细胞表位序列为QSDEGSSNEEQE(82 -93 )的基础上 ,采用 4分支多重抗原肽结构合成抗原肽 ,免疫C 5 7bL 6小鼠 ,产生多克隆抗体 ,应用ELISA实验及免疫组化实验检测多克隆抗体是否为人的抗原肽的特异性抗体。结果　免疫C 5 7bL 6小鼠后可产生MAGE 12的抗原特异性的多克隆抗体 ,抗体滴度可达 1∶64。结论　证明所预测的表位为MAGE 12的b细胞表位。

摘要：旨为预测类猪圆环病毒因子P1 VP2蛋白的b细胞表位。采用生物信息软件和互联网服务器,预测VP2的二级结构,分析VP2表面特性(亲水性、可塑性、可及性和抗原性),综合预测VP2的b细胞抗原表位。结果表明,P1VP2蛋白肽链的6-18和80-92区段为预测的b细胞表位优势区。多参数方案综合预测P1 VP2蛋白的b细胞抗原表位,为进一步鉴定表位及设计疫苗奠定了基础。

摘要：本研究将A3C单抗识别的VP60蛋白NTA区域作为识别标记,设计一系列编码VP60 NTA区域重叠多肽的基因序列并连接于pGEX-4T-1载体,确定A3C单抗识别的精确表位。然后构建重组质粒bacmid-VP60△A3C,将bacmid-VP60△A3C转染Sf9昆虫细胞,得到重组杆状病毒rbac-VP60△A3C。RT-PCR、HA、IFA和Western blot鉴定结果表明,重组蛋白VP60△A3C在Sf9细胞中高效表达,电镜观察显示其形态和结构与兔出血症病毒VP60蛋白类似。将重组蛋白VP60△A3C以每只200μg免疫2月龄RHDV血清阴性的新西兰兔,免疫后14 d,以兔出血症病毒WF株攻毒新西兰兔。结果表明,免疫组无死亡,而对照组全部死亡。本研究结果为制备表位缺失的兔出血症亚单位疫苗奠定了基础。

摘要：病毒蛋白抗原表位的预测对于设计免疫原性多肽、新型疫苗分子及诊断试剂均有帮助.但是,既往的预测方法并不多,且至少存在以下两方面的缺陷:(1)既往方法均基于一般蛋白质的实验结果,因此,到目前为止还没有1种专用于病毒蛋白的表位预测方法;(2)80年代后期以来,多肽固相自动合成技术和Geysen氏pin ELISA技术在免疫学的广泛应用。

摘要：为了探讨猴b病毒gG基因编码蛋白作为疫苗候选抗原和ELISA试剂盒研制所需检测用抗原的可能性,本研究从Genbank数据库中获得猴b病毒gG基因序列,采用IEDb、SOSUI等在线分析系统对该基因序列的编码区进行生物信息学分析,并预测gG基因编码蛋白的理化性质、可溶性和表面可及性、跨膜区、抗原表位以及线性b细胞表位等.分析结果表明,b病毒gG蛋白为膜蛋白,具有一个跨膜螺旋,以及较为丰富的β-转角,为可溶性蛋白,蛋白序列中具有多个抗原表位和优势线性b细胞表位,有作为猴b病毒疫苗候选抗原和抗体诊断用抗原的潜力.