摘要：采用响应面方法对***224发酵产新型抗菌肽发酵条件进行了优化。首先采用Plackett-Burman设计(Plackett-Burman Design,PB)法,对影响bacillus ***224产抗菌肽的6个发酵外部条件进行了筛选。结果表明:影响深层该菌发酵产抗菌肽的主要因子为温度、装液量、发酵时间。在此基础上,然后用Box-Boken设计及响应面分析法确定关键因子的最佳水平及交互作用。通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为温度33.08℃,装液量为71.93ml,发酵时间为43.45h时抗菌肽的含量提高了199.19μg/mL。

摘要：枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)168菌株基因组中含有编码surfactin合成酶系的srfA操纵子,却不产抗菌肽surfactin。运用同源重组的方法将外源的有活性的sfp基因(编码4'-磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶)整合入*** 168中,将其改造为产surfactin的菌株。通过分析多株枯草芽孢杆菌和解淀粉液化芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)的sfp基因,从基因的上、下游找出较为保守的区域,设计引物,从枯草芽孢杆菌Nja-9中扩增sfp基因,将获得的sfp基因与P43启动子和终止子相连,构建了sfp基因表达框,并连接于枯草整合质粒pDG1730上,最终构建了枯草芽孢杆菌整合质粒pST-1730,利用pST-1730本身的淀粉酶E基因与*** 168菌株的基因组DNA进行同源重组整合,获得了产surfactin的重组菌株***121。本研究为surfactin合成酶基因的改造和分析奠定了基础。

摘要：利用Placket-Burman设计和响应面法对产3-羟基丁酮bacillus subtilis SF4-3的发酵培养基进行优化,首先通过Placket-Burman设计筛选出影响较大的3个因素,分别为酵母膏、玉米浆和尿素,然后进行最陡爬坡实验逼近最佳响应面区域,最后根据Box-Benhnken的中心组合设计原理,进一步进行响应面分析实验,得到3因素的最佳浓度。在优化培养基下,3-羟基丁酮的产量达51.2g/L,比优化前提高了51%。

摘要：用响应面法对bacillus natto TK-1发酵产脂肽的培养基进行优化。首先用Plackett-Burman法筛选出三个影响较大的重要因素,分别为蛋白胨、酵母粉、CaCl2,然后进行最陡爬坡实验逼近最佳响应面区域,最后通过Box-Behnken设计,利用SAS软件进行回归分析,得到各因素的最佳浓度。在优化培养基条件下,发酵液的溶血圈直径较初始培养基提高了29.3%,脂肽的产量提高了约30%。

摘要：利用刚果红透明圈法从秸秆堆肥中筛选出一株产木聚糖酶菌株bacillus sublitis JH-1,以单因素试验为基础,采用响应面试验设计对bacillus sublitis JH-1液态发酵产木聚糖酶的培养基进行了优化,得到产木聚糖酶发酵最适条件为:培养温度33℃,p H值6.0,麦芽糖浓度为2.6%,酵母粉浓度为1.2%,KH2PO4浓度为1.2%,发酵产酶量比优化前提高了1.8倍。

摘要：利用均匀设计法对***318产酶的最佳培养基进行了快速优化研究。结果表明,其最适产酶培养基为:3.28%黄豆粉,0.023%蔗糖,0.075%K2HPO4,配制时的pH为12(灭菌后pH为8～9);此外,其发酵的最佳条件为:发酵温度28℃,接种量20%,摇瓶装量20mL(250mL三角瓶)。在最适的发酵条件下,脂肪酶的发酵水平可达24.7U/mL。***318脂肪酶作用的最适温度为45℃,40℃保温1h,活力几乎没有损失;但是,在50℃和60℃的条件下保温1h后,酶活降低得比较明显;酶作用的最适pH为9.0。在pH7～10,该脂肪酶较稳定,但是在酸性的环境中,酶的稳定性较低。

摘要：从台州市剑门港海区的海底淤泥中采集样品分离得到4株具抗菌活性的微生物,其中一株具有较强的抗菌活性。对该菌作了形态学、生理生化、分子生物学、(G+C)mol%含量等研究,确定该菌株属于芽孢杆菌属,命名为bacillus amyloliquefaciens MBRC1。采用BLAST Clustal W(V1.83)及Mega(V 5.1)等软件对其进行了系统发育树的分析,确立了该菌株在系统发育上的地位。采用不同的培养基对该菌株进行发酵培养,利用牛津杯法对该菌胞外的抑菌活性物质的抑菌效果进行了研究,结果显示:bacillus amyloliquefaciens MBRC1胞外具有较强的抑菌活性物质,且对金黄色葡萄球菌(S. aureus)、枯草杆菌(B. subtilis)和大肠杆菌(E. coli)均有较好的抑菌效果。

摘要：利用响应面法对海洋细菌bacillus cereus OPF-0031产普鲁兰酶发酵条件进行优化。在单因素实验基础上,首先通过两水平的PB(Plackett-Burman design)设计筛选出影响普鲁兰酶发酵的四个显著因素:硫酸铵、硫酸镁、硫酸铁、糯米粉;通过4因素4水平的响应面二次回归中心组合实验(central composite design,CCD)对上述影响因素进行优化。实验结果运用Design-Expert软件进行回归分析,最终确定最佳的培养条件:糯米粉15.53 g/L,硫酸铵9 g/L,硫酸镁0.9 g/L,硫酸铁0.018 g/L,蛋白胨10 g/L,磷酸二氢钾0.5 g/L反应温度为30℃,转速为180 r/min,最终酶活可达到2.7742 U/mL。

摘要：【目的】bacillus malacitensis Z-5菌株对棉花黄萎病有显著防治效果,产生抑菌物质是其发挥防治作用的主要因素。本研究旨在优化Z-5菌株产生抑菌物质的培养基组成,分析抑菌物质的成分及其合成相关基因。【方法】由单因素试验确定最佳碳源、氮源及无机盐,利用最速上升法确定碳源、氮源以及无机盐最优含量区域,根据Box-Behnken试验设计,以发酵上清液对棉花黄萎病菌大丽轮枝菌(Verticillium dahlia Kleb.)的拮抗活性为指标,筛选Z-5菌株产生抑菌物质的最优培养基组成。利用液相色谱-质谱联用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometer,LC-MS)法鉴定抑菌物质,并对抑菌物质合成相关基因进行检测。【结果】Z-5菌株产生抑菌物质最佳培养基组成为2.68%(质量分数,下同)玉米粉、1.45%酵母粉、0.03%K_2SO_4、0.8%Na_2HPO_4·12H_2O、0.2% NaH_2PO_4·2H_2O(pH 7.2～7.4),抑菌圈直径为1.34 cm,与预测值相近,证实该模型可靠有效。抑菌物质主要为脂肽抗生素C14表面活性素B,C14～C17伊枯草菌素A,C14、C15、C17伊枯草菌素B等。聚合酶链式反应检测结果显示,Z-5菌株基因组含有合成脂肽抗生素的基因srf AB、ituC和ituD。【结论】本研究优化了Z-5菌株产生抑菌物质的培养基组成,明确了其抑菌物质为脂肽抗生素,为利用该抑菌物质进行棉花黄萎病菌的防治提供了理论参考和物质基础。

摘要：采用Plackett_Burman设计(Plackett_BurmanDesign,PB)法,对影响***224产新型抗菌肽的17个因素进行了筛选。结果表明:影响该菌发酵产新型抗菌肽的主要培养基成分为葡萄糖、NH4NO3、谷氨酸、CaCl2、MnSO4。在此基础上,再采用响应曲面法(ResponseSurfaceMethodology,RSM)对其5个显著因子的最佳水平范围进行研究。通过对二次多项回归方程求解得知,在上述自变量分别为葡萄糖8·13g/L、NH4NO36·14g/L、谷氨酸4·2g/L、CaCl23·98mg/L、MnSO44·87mg/L时,新型抗菌肽的产量从1304·21μg/mL提高到了1487·58μg/mL。