摘要：目的设计促凋亡铁蛋白纳米粒BAK-HFn,并探究热沉淀纯化对其活性的影响。方法设计与构建促凋亡活性蛋白纳米粒BAK-HFn,验证其成功可溶表达,采用热沉淀纯化以及非热沉淀纯化两种方式对其进行纯化,并用动态光散射法测定纯化后纳米粒的粒径,采用cck-8法检测纯化后BAK-HFn对肿瘤细胞C6的细胞毒性。结果用热沉淀纯化后的BAK-HFn蛋白几乎不抑制C6细胞的生长,而非热沉淀纯化法获得的BAK-HFn蛋白促凋亡的活性明显提高。结论热沉淀纯化会使经过BAK修饰的促凋亡铁蛋白纳米粒降低甚至丧失活性。

摘要：为得到新型抗肿瘤化合物,设计合成了两个1,4-萘醌衍生物,并利用核磁共振、红外光谱和高分辨质谱表征了化合物的结构。利用cck-8法对所合成的化合物进行抗肿瘤活性评价,分别考察了其对人乳腺癌细胞MCF-7和人肝癌细胞Bel-7402的抑制作用,结果表明1,4-萘醌苯乙酸衍生物具有中等肿瘤抑制活性。

摘要：背景:肿瘤对于化疗药物具有耐药性,而耐药性产生又与肿瘤干细胞密切相关。因此,如何靶向杀伤肿瘤干细胞,将成为口腔鳞癌治疗的关键。目的:探讨5-氟尿嘧啶对舌鳞癌Tca8113肿瘤细胞生物学特性的影响。方法:利用cck-8实验检测不同质量浓度5-氟尿嘧啶对Tca8113细胞活性的影响,筛选相对较好的药物质量浓度和作用时间进行后续实验,以不添加5-氟尿嘧啶为对照组,流式细胞仪检测细胞周期及肿瘤细胞中侧群细胞比例的变化,划痕实验检测肿瘤细胞迁移能力变化。结果与结论:cck-8检测显示:5-氟尿嘧啶对舌鳞癌Tca8113细胞系细胞的活性抑制呈时间及药物浓度的正相关关系,50 mg/L 5-氟尿嘧啶作用48 h时,细胞活性抑制效果相对较好。流式细胞仪细胞周期检测显示:实验组G0/G1期细胞比例较对照组明显升高(P=0.01),S期细胞较对照组下降(P=0.244),实验组G2/M期细胞完全消失(P=0.00)。5-氟尿嘧啶处理后侧群细胞比例较处理前明显升高(P=0.00)。细胞划痕实验显示实验组划痕愈合能力较对照组增强。结果表明5-氟尿嘧啶药物筛选人舌鳞癌Tca8113细胞可以作为富集类肿瘤干细胞的方法之一。

摘要：本文以取代的手性苯乙胺为原料,设计合成了4种新型叔胺盐酸盐化合物.通过NMR,IR和MS等表征方法对所合成目标产物的结构进行确定.在生物活性方面,首先通过cck-8法测定4种化合物对正常细胞增殖的影响,实验结果表明:部分化合物对小鼠成纤维细胞L929表现出一定的细胞毒性.酶的选择性实验说明R构型影响小分子对单胺氧化酶(MAO)的选择性抑制活性,另一方面取代基的给电子能力也会对酶的活性有影响.

摘要：以小体鲟(Acipenser ruthenus)为研究对象,应用不同浓度的淋巴细胞分离液对鲟鱼外周血淋巴细胞进行分离并探讨其增殖性反应的最佳条件。分别以植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(Con A)和脂多糖(LPS)作为淋巴细胞增殖丝裂原,采用L25(56)五因素五水平正交试验设计,用Enhanced Cell Counting Kit-8法(增强型cck-8或WST-8)对培养时间、培养温度、细胞密度、胎牛血清浓度及丝裂原浓度等因素进行探索性研究。结果表明:70%的Percoll液(比重为1.092 g/m L)作为淋巴细胞分离液的分离效果最佳。鲟鱼最佳外周血淋巴细胞体外增殖反应条件为:3.625×10~6初始细胞量、20μg/m L的PHA或50μg/m L的Con A或10μg/m L的LPS作为丝裂原、10%-20%胎牛血清(FBS)、20-25℃培养2 d。

摘要：本研究为了筛选出扁桃斑鸠菊的抗乳腺活性部位,以人乳腺癌细胞株(MCF-7)为实验模型,采用cck-8实验评价扁桃斑鸠菊提取物对乳腺癌细胞增殖的抑制作用。选择极性不同的溶剂,设计了三种不同的提取路线,最终得到极性不同的各个部位提取物(VA1-VA8)。大量提取活性较好的乙酸乙酯提取物,然后洗脱分离为6个段(A2-A7),继续运用cck-8细胞毒性实验来追踪抗乳腺癌活性最佳的部位。cck-8实验结果显示:扁桃斑鸠菊乙酸乙酯提取物对MCF-7细胞增殖表现出良好的抑制作用,且呈剂量依赖性。在A2-A7的6个洗脱产物中,浓度为100μg/mL时,50%乙酸乙酯石油醚洗脱段(A5)对人乳腺癌细胞MCF-7具有最佳的抑制效果,抑制率为83.34%。

摘要：试验采用单因子设计,选用健康无病、体格健壮体重约28kg的DLY三元杂交生长肥育阉割猪15头,随机分配到3个处理中,每个处理5个重复,每个重复1头猪。处理1、2和3的猪分别用由0μg、250μg和500μgcck-8与人血清白蛋白交联后形成抗原进行臀部肌肉多4点注射免疫,免疫的时间分别为试验第1、29、43和59d。试验期74d。结果表明:250μg、500μgcck-8的cck-HAS使动物体内产生了较高滴度的cck抗体,试验43d后达到显著水平(P<0.05);同时抗体有效的中和了血液中的cck-8,使得试验43d血液中的cck-8显著降低(P<0.05)。其中250μg处理显著提高全期采食量、日增重,幅度为11.96%、14.62%(P<0.05);而500μg处理对生产性能没有影响。250μg、500μg处理对眼肌面积、4点平均膘厚及部分肉质指标滴水损失、大理石纹、肌肉pH、色度计L值和a值没有影响。

摘要：目的探索cck-8法检测小鼠脾淋巴细胞增殖的最佳条件。方法采用交叉设计或两因素完全随机设计探索分裂素刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)刺激的脾细胞增殖实验的细胞制备方法、细胞浓度、分裂素浓度、刺激时间、培养基中胎牛血清(FBS)浓度、是否预培养等条件。结果制备方法中以轻压制备的脾细胞增殖率高于轻磨;脾细胞浓度以5×106/m L为最佳;ConA浓度为2、5、10μg/m L,LPS浓度为10、20、50μg/m L细胞增殖率未见明显差异;刺激时间在48和72 h间脾细胞增殖率未见明显差异;用含10%、15%和20%FBS的培养基培养的脾细胞增殖率未见明显差异;制备的脾细胞当天刺激比第二天刺激增殖率更高。结论 ConA和LPS刺激的Balb/C小鼠脾细胞增殖实验的最佳条件为,轻压制备脾细胞,脾细胞浓度为5×106/m L,制备当天直接种板,ConA的刺激浓度为2~10μg/m L,LPS的刺激浓度为10~50μg/m L。

摘要：目的筛选cck-8法在淋巴细胞增殖检测中的最佳实验条件。方法采用正交实验设计,对初始细胞浓度、培养时间、LPS浓度、显色时间这4个主要因素各水平对人外周血单个核细胞(PBMC)和小鼠脾细胞增殖的影响进行试验研究,对各实验组合测得的刺激指数进行方差分析。结果 cck-8检测人PBMC增殖试验的最佳条件:初始细胞浓度为2.5×10~6/mL,培养时间为48 h,LPS浓度为1μg/mL,加入cck-8后孵育4.5 h;检测小鼠脾细胞增殖试验的最佳条件:初始细胞浓度为5.0×10~6/mL,培养时间为48 h,LPS浓度为1μg/mL,加入cck-8后孵育4.5 h。结论 cck-8法便捷、灵敏、重复性好,可作为检测淋巴细胞增殖的稳定方法。本研究建立的cck-8最佳实验条件可为免疫调节作用的药物体外筛选和免疫药理学作用的研究提供依据。

摘要：以前有试验结果表明,真胃灌注不饱和游离脂肪酸可以显著降低奶牛干物质采食量.与此相对照,有试验表明,当灌注不饱和甘油三酯时,干物质采食量只有很小幅度的下降.而我们则推测,不饱和游离脂肪酸可能会比等量不饱和甘油三酯会对采食量具有更大的抑制作用,我们用4头泌乳后期荷斯坦奶牛做了一项简单前后反转试验设计(reversal design).试验奶牛饲喂由23%苜蓿青贮、23%玉米青贮、40.3%粉碎脱壳玉米、10.5%豆粕组成的全混合日粮(以干物质计算).其中,2头奶牛真胃灌注大豆不饱和游离脂肪酸(日灌注量为0、200、400、600 g),另2头奶牛灌注相同量的大豆甘油三酯;其后,这些奶牛交替灌注不同来源的试验油脂.每1个灌注量的灌注时长为5 d、每1个灌注量在灌注时分成4等分,分别于06:00、10:00、17:00、22:00时间点脉冲灌人真胃.油脂中没有添加任何乳化剂,试验过程中也没有出现任何消化异常现象.试验结果表明,两种油脂来源均线性显著降低奶牛干物质采食量,且添加量与油脂来源间存在交互作用.斜率分析结果表明,不饱和游离脂肪酸组降低干物质采食量的效应是甘油三酯组奶牛的2倍还要多.添加油脂导致采食量下降的同时,产奶量也下降.而乳脂率则随不饱和游离脂肪酸的灌注量增加线性显著升高,而甘油三酯组乳脂率则未受到油脂添加的影响.但不论灌注任何油脂,牛奶中中短链脂肪酸随灌注量的增加均下降.真胃灌注任一种油脂,牛奶中C18:2和C18:3均线性升高;顺-9-C18:1未受到影响;灌注200、400、600 g不饱和游离脂肪酸各组灌注来源C18:2转化到奶脂肪的效率分别为35.6%、42.5%和27.8%,而相应的甘油三酯组分别为34.3%、39.6%、34.0%.血液胰高血糖素样肽1(7～36)氨基化合物(GLP-1)随着油脂灌注量的增加而下降,血浆中cck-8则未受到影响.不饱和游离脂肪酸达到12指肠对干物质采食量的抑制作用要高于甘油三酯,而该效应可能部分受到GLP-1的调控.