摘要：背景:肿瘤干细胞理论的产生,对肿瘤的发生、发展及其发病机制有了更新的认识,为肿瘤研究提供了新的方向,通过无血清培养技术已从许多肿瘤中分离并鉴定出特定的肿瘤干细胞。目前,无血清培养已成为培养肿瘤干细胞的经典培养方法。目的:运用无血清培养的方法从肾癌细胞中获取肾癌干细胞,并进行鉴定。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-02/2009-02在江苏大学完成。材料:肾癌细胞株OS-RC-2由上海中科院细胞库提供。方法:取处于对数生长期的肾癌细胞OS-RC-2,悬浮于预先配好的DMEM/F12无血清培养基中(含表皮生长因子20μg/L,碱性成纤维细胞生长因子20μg/L),观察生长情况,培养7d后运用流式细胞仪测定cd133及cd34的表达。以不含细胞因子的高糖DMEM/F12培养液培养细胞作为阴性对照。另外收集无血清培养7d的肾癌细胞球,重悬于含体积分数为10%胎牛血清的高糖DMEM/F12培养基中,进行干细胞分化实验观察。主要观察指标:①倒置显微镜下观察肾癌干细胞生长情况。②流式细胞仪检测肾癌干细胞及肾癌细胞中cd133及cd34的表达。③收集无血清培养7d后的肾癌干细胞重新常规培养并观察其分化情况。结果:①肾癌细胞接种于含细胞因子的无血清培养基2d后可见有细胞球生成,7d后细胞球明显增多,体积增大。对照组肾癌细胞则贴壁生长,未见细胞球生成。②流式细胞仪检测显示,肾癌细胞球中cd133+cd34-表达率(8.33±1.26)%,对照组肾癌细胞表达率(1.24±0.36)%(t=-19.71,P<0.05)。③肾癌细胞球重新悬浮于含体积分数为10%胎牛血清的培养液2d后可见细胞球分散为单个细胞,恢复原来贴壁生长特点,cd133及cd34表达与阴性对照相同。结论:利用含细胞因子表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子无血清培养的方法可以从肾癌细胞中获取肾癌干细胞。

摘要：背景:有研究表明骨髓干细胞体外移植后,在心肌梗死区发现具有心肌细胞表型的幼稚细胞,相关学者认为该种细胞源于骨髓干细胞。目的:探讨心肌梗死后自体动员骨髓干细胞在心肌梗死区的归巢情况。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2005-02/2006-04在大连医科大学中日临床病理中心完成。材料:2000/2005大连医科大学病理学与法医学教研室尸检标本30例,正常心脏组15例,死因为机械性损伤或颅脑损伤,尸检心脏无异常发现;心肌梗死组15例,均有冠状动脉粥样硬化及不同程度冠脉管腔狭窄,心肌梗死发生后10d内死亡。方法:所有标本均在死后48h内进行尸检,左心室前壁、侧壁和后壁取材,制备组织切片。采用免疫组织化学方法检测造血干细胞表面标志物cd34、cd133及转化生长因子β在正常心肌、梗死心肌及梗死周围区域的表达。主要观察指标:cd34、cd133、转化生长因子β在不同部位的表达及其相关性。结果:cd34在梗死心肌处阳性表达率明显高于梗死周围区、正常心脏组织(P<0.01);cd133、转化生长因子β在梗死心肌处阳性表达率均明显高于梗死周围区(P<0.01),在正常心脏组织均呈阴性表达。cd34、cd133、转化生长因子β在梗死心肌及梗死周围区的表达呈明显相关性(P<0.01)。结论:心肌梗死发生后,梗死区及梗死周围区出现骨髓造血干细胞的归巢。梗死区转化生长因子β的分泌增加为促进归巢干细胞的分化、形成新生血管及再生心肌提供了可能。

摘要：背景: 血管改建是正畸牙周组织改建的基础, He-Ne 激光照射能否促进正畸牙周组织的血管改建, 从而加速正畸牙周组织改建的进程呢?目的: 观察 He-Ne 激光照射对兔正畸牙周组织血管改建的影响, 探讨其可能的作用机制。设计: 随机对照观察。单位: 吉林大学实验动物中心。材料: 选用 35 只大耳白兔, 体质量 2.0 kg(由吉林大学实验动物中心提供 , 许可证号为 SYXK ( 吉 ) 2002-0002, 生产许可证号码为SCXK2003-0003)。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。上海产 HNGSQ-1 型 He-Ne 激光治疗仪, HPIAS-1000 图像分析系统为同济医科大学生产。cd34 单克隆抗体, 产品编号为 MAB-0034,由福州迈新公司提供。血管内皮细胞生长因子单抗, 产品编号为 MS-350, 由福州迈新公司提供。方法: 实验于 2003- 05/2003- 12 于吉林大学实验动物中心省级实验室完成。①采用随机数字表法将 35 只大耳白兔随机分成 7 组: 未加力组、加力 1, 3, 5, 7, 14 及 21 d 组, 每组 5 只。加力各组动物于双侧上颌第一磨牙至切牙间拴结不锈钢螺簧, 0.08 N 力拉上颌第一磨牙向近中移动,各组动物采用自身对照, 右侧为氦氖激光照射侧, 左侧为对照侧。用波长632.8 nm, 激光功率 20 mW, 能量密度 2.50 J/cm2 的氦氖激光照射加力各组兔右侧颊部。未加力组无干预措施, 饲养 1 周后取材, 加力各组在加力后各时间点取材。②各组均制作以上颌第一磨牙为中心的、近远中方向的组织切片, 行 cd34 及 VEGF 免疫组化染色, 检测各组牙周组织压力区与张力区微血管密度与微血管面积, 计算机图像分析系统测量灰度值评价 VEGF 的染色强度。主要观察指标: ①血管内皮生长因子免疫组化染色的灰度积分。②微血管密度及微血管面积。结果: 实验兔 35 只均进入结果分析。①微血管密度与微血管面积检测结果: 加力 3, 5, 7, 14 及 21 d 组 He-Ne 激光照射侧张力区及压力区微血管密度及微血管面积均明显高于对照侧, 差异有显著性意义 (P <0.05～0.01)。②压力区及张力区 He-Ne 激光照射侧和对照侧牙周组织血管内皮生长因子检测结果: 加力 1 d 组 He-Ne 激光照射侧血管内皮生长因子表达明显低于对照侧, 差异有统计学意义(P < 0.05), 加力 3, 5 d 组压力区 He-Ne 激光照射侧血管内皮生长因子表达明显高于对照侧, 差异有统计学意义(P < 0.05)。压力区照射侧与对照侧高峰值均出现在牙齿受力后第 5 天; 加力 3, 5 和 7 d 组张力区 He-Ne 激光照射侧血管内皮生长因子表达较对照侧明显升高, 差异有统计学意义(P < 0.05), 张力区照射侧与对照侧高峰值均出现在牙齿受力后第 14 天。结论: He-Ne 激光照射有效地促进了正畸牙周组织的血管改建, 有效地促进正畸牙周组织中血管内皮生长因子的表达, 使牙周组织的血管生成更加活跃, 有利于加速正畸牙周组织改建的进程。

摘要：背景:磁场治疗肢体缺血性疾病的基础研究报道不多,原因是受试动物的依从性差及所受磁场作用强度的稳定性难以掌控,由此造成实验误差大,结果可信度下降。作者针对此类问题,采用磁性饲养笼进行低频电磁治疗缺血肢体的实验研究,由此克服了受试动物依从性差及磁场强度的稳定性难以掌控的两大难题。目的:探讨自制磁性饲养笼低频电磁场对家兔缺血肢体新生血管生长促进因子表达的影响。方法:构建动脉粥样硬化模型兔96只,编号随机分入缺血组和无缺血组(每组12个处理组合),按析因设计要求每组重复实验4次。因素A电磁场作用强度(0,3,6,12 mT)和因素B电磁场作用时间(3,5,7 d)。结果与结论:低频磁场能够明显促进家兔缺血肢体缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子及cd34表达,磁场作用强度(因素A)是促进缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子及cd34表达的主要因素,作用时间(因素B)为次要因素。低频磁场也促进无缺血肢体缺氧诱导因子1α的表达,但对无缺血肢体血管内皮生长因子及cd34表达无明显促进作用,揭示在肢体缺血状态下血管内皮生长因子及cd34表达除了受缺氧诱导因子1α的调控作用外可能还受其他因素的调控。

摘要：目的观察皮瓣成活、血管生成及cd34的表达，探讨负压封闭引流（vacuum sealing drainage，VSD）对皮瓣成活的作用机制。方法SD大鼠64只，随机分为8组：即刻组、4h组、8h组、ld组、2d组、3d组、4d组和6d组，每组8只。在每只大鼠的背部两侧各设计1块皮瓣，即分别为对照侧和实验侧。皮瓣设计为蒂宽=蒂长=0．8cm，蒂部携带直径为3．5cm的皮瓣。皮瓣形成后在实验侧皮瓣均安装VSD装置。8个组在分别给予相应时间的VSD后将装置和敷料拆除，观察皮瓣肤色、肿胀程度，切取0．3cm×0．3cm标本，统一于第7天测量皮瓣成活面积。通过HE染色、免疫组织化学等进行皮瓣组织学、cd34表达的观察，判断皮瓣成活率、皮瓣新生微血管密度（MVD）。结果（1）随着VSD作用时间的延长，实验侧皮瓣成活面积不断增加，3d时皮瓣成活面积已达到最大值．引流3d组与引流6d组差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）随着VSD作用时间的延长，皮瓣微血管密度不断增加，即刻组、4h组、8h组各自对应的实验侧与3d组、4d组和6d组对应的实验侧差异有统计学意义（P〈0．05）。结论（1）VSD可促进皮瓣成活，吸引3d达到最大成活面积（95％4）％。（2）VSD可促进皮瓣微血管密度增加，促进血管新生。

摘要：背景目前，优化脐血库产品质量问题已成为焦点。本文研究选择供者及脐血采集相关变量的影响因素。研究设计和方法作者对2001年2月1日～2002年2月28日期间采集的脐带血单位(CBUs)作回顾性调查。以预处理的容量和总的有核细胞(TNC)计数以及处理后的cd34细胞计数作为产品质量指标。结果2084单位CBUs中，1628单位作了容量测定和TNC计数，1124单位CBUs作了cd34+细胞计数。