摘要：目的　选取调控补体活化中心环节C3转化酶的两种膜调节蛋白cd4 6和cd5 5 ,设计构建了新型的GPI锚固型cd4 6 /cd5 5嵌合分子。方法　以cd4 6cdNA和cd5 5cdNA为模板 ,通过PCR及PCR重叠延伸技术 (SOE)得到cd4 6 /cd5 5嵌合cdNA。为避免双分子连接后的空间结构和功能的变化 ,在cd4 6与cd5 5之间引入了多肽氨基酸接头 (Linker) ,然后克隆构建GPI锚固型cd4 6 /cd5 5 BluescriptM13克隆载体。结果　获得了阅读框完整、连接部位正确的GPI锚固型cd4 6 /cd5 5嵌合分子cdNA。结论　本研究为研制开发新一代的多功能。

摘要：目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默衰亡加速因子(cd55)基因对胰腺癌细胞增殖的影响。方法针对cd55基因设计3对siRNA,转染胰腺癌BxPC-3细胞,用实时定量PCR和Western blot检测cd55 mRNA和蛋白的表达,并用流式细胞术检测细胞生物学行为的改变。结果转染BxPC-3细胞48 h后,3条siRNA中仅siRNA3能显著抑制cd55 mRNA和蛋白的表达,细胞凋亡比率显著增加(P<0.05);细胞增殖率显著减少(P<0.05);细胞G1/G0期升高,G2期变化不明显,S期下降(P<0.05)。结论使用siRNA能够有效地沉默cd55基因的表达,并显著影响胰腺癌细胞的生物学行为。

摘要：目的探讨cd97-cd55蛋白复合体在乳腺恶性肿瘤组织中的表达与临床病理因素的关系和评判预后的价值。方法收集212例乳腺恶性肿瘤及358例乳腺良性肿瘤组织石蜡标本制备组织芯片,采用免疫组化SP法检测cd97抗原表位cd97^(EGF)、cd97^(Stalk)和cd55的表达,结合临床资料分析其与临床病理因素联系。设计cd97和cd55寡核苷酸探针,应用显色原位杂交技术检测cd97mRNA和cd55mRNA在乳腺良、恶性肿瘤组织中的表达。采用Cox比例风险模型分析影响乳腺恶性肿瘤预后风险因素,Kaplan-Meier曲线法进行生存分析。结果 cd97^(EGF)和cd97^(Stalk)在乳腺恶性肿瘤组织中表达率分别为53.3%(113/212)和65.1%(138/212)。cd55在乳腺良、恶性肿瘤组织中均有表达。显色原位杂交显示cd97mRNA和cd55mRNA在乳腺良、恶性肿瘤组织中染色强度差异均有统计学意义(均P<0.01)。Cox比例风险模型分析显示肿瘤大小、阳性淋巴结转移数目、TNM分期、cd97^(EGF)阳性表达是影响乳腺恶性肿瘤预后的独立危险因子。结论乳腺恶性肿瘤组织可检测到cd97-cd55蛋白复合体表达,cd97^(Stalk)和cd97^(EGF)两个不同抗原表位可能在cd97参与肿瘤发生、发展机制中存在着一定的差异。乳腺恶性肿瘤组织cd97^(EGF)阳性表达可作为预后判断指标之一。