摘要：目的:通过RNAi技术建立dal-1稳定抑制的NSCLC细胞实验模型,并对dal-1在NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用进行研究。方法:构建靶向dal-1的shRNA表达载体转染NSCLC细胞株,筛选出阳性克隆,在mRNA和蛋白质水平鉴定其抑制率,最终得到dal-1稳定抑制的细胞株;用Transwell迁移和侵袭模型比较实验和对照组细胞在迁移和侵袭能力方面的差异;用MTT法比较实验和对照组细胞在增殖能力方面的差异。结果:自行构建的pGPU6/GFP/Neo-dal-1shRNA表达载体经双酶切鉴定和测序鉴定序列及插入方向正确,其中pGPU6/GFP/Neo-dal-1-T4表达载体在mRNA和蛋白质水平能有效抑制dal-1的表达,抑制率分别为(87.41±1.994)%和(82.73±2.147)%。与对照组细胞比较,dal-1稳定抑制的实验组细胞迁移和侵袭能力(P=0.000)和增殖能力显著增强(P=0.000)。结论:成功设计并构建了靶向dal-1的shRNA表达载体,建立了dal-1稳定抑制的NSCLC细胞株,为进一步研究dal-1在NSCLC细胞中的作用提供了实验模型。

摘要：目的:建立dal-1稳定抑制的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞实验模型.方法:构建靶向dal-1的shRNA表达载体转染NSCLC细胞株,筛选出阳性克隆,在mRNA和蛋白质水平鉴定其抑制效率,最终得到dal-1稳定抑制的细胞株.结果:通过双酶切鉴定和测序鉴定构建的shRNA表达载体序列正确,T4表达载体在mRNA和蛋白质水平能有效抑制dal-1的表达,抑制率分别为(87.4±2.0)%和(82.7±2.1)%.结论:成功设计并构建了靶向dal-1的shRNA表达载体,建立了dal-1稳定抑制的NSCLC细胞株,为进一步研究dal-1在NSCLC细胞中的作用提供了实验模型.