摘要：目的研究dna修复基因XRCCl多态性与辐射损伤易感性的关系。方法采用1：1配对病例对照设计,在对唐山市放射人员体检的基础上,以113名出现染色体畸变的射线工作人员为病例组,按性别、年龄(±5岁)、民族、工种配对,选择与病例在同一工作岗位、工龄相等或稍长(≤2年)、累积受照剂量相同或相近且无辐射损伤的放射人员为对照组(113名)。以多聚酶链反应-限制性长度多态性分析技术(PCR-RFLP)检测XRCCl基因,比较不同基因型与辐射损伤易感性的关系。结果病例组XRCCl 26304TT变异基因型频率为18．58%,高于对照组(7．08%),差异有统计学意义(P＜0．05)；携带此种基因型个体发生辐射损伤的风险比携带其他基因型者高3．47倍(OR=3．47,95% CI 1．43～8．44)。XRCCl G27466A和G28152A基因型频率在两组中的分布差异无统计学意义(P＞0．05)。结论XRCCl C26304T基因多态性与辐射致染色体畸变有关联。未发现XRCCl G27466A和G28152A基因多态性与辐射致染色体畸变有关。

摘要：目的:克隆人HOGG1基因并构建其真核表达载体,进行序列测定.方法:提取人胎肝总RNA,设计HOGG1特异性引物,通过RT-PCR扩增,将HOGG1基因克隆到pCMV-Myc载体,菌落PCR鉴定阳性克隆并测序验证.结果:获得人HOGG1基因全长,并成功构建pCMV-Myc/HOGG1真核表达载体.结论:HOGG1真核表达载体的构建为HOGG1基因生物靶向治疗药物的开发提供一种新的手段.

摘要：MTH1是一种dna氧化损伤修复酶,主要负责"清理"核苷酸池中氧化损伤的脱氧核苷三磷酸(d NTPs),以防其掺入dna复制中而造成碱基错配。研究表明,MTH1与肿瘤细胞的生存密切相关,而正常细胞的生长与存活则不依赖于MTH1。所以,以MTH1为靶点开展抗肿瘤新药研发,已逐渐受到人们的关注。抑制MTH1,为肿瘤治疗开辟了一条新途经。简介MTH1的结构和功能及其与肿瘤的关联,着重对近年来MTH1抑制剂的发现过程和研究进展作一综述,探究小分子MTH1抑制剂与MTH1蛋白的作用模式,为MTH1抑制剂的设计提供思路。

摘要：目的建立原位检测C57BL/6小鼠脑缺血所致AP位点和3’-PO_4型氧化dna损伤的方法,同时采用TUNEL测定神经细胞凋亡,探讨两者的相关性,并观察nNOS在此过程中的作用。方法制作小鼠前脑缺血/再灌注模型(FbIR):夹闭双侧颈总动脉90min后恢复血流,按实验设计的再灌注不同时间点处死动物后制作脑组织冰冻切片。用大肠杆菌核苷酸外切酶Ⅲ敏感位点法(EXOSS)检测AP位点和3’-PO_4末端型两种氧化dna损伤;采用TUNEL技术观察细胞凋亡,并检测特异性nNOS抑制剂3BR7NI对此氧化dna损伤及细胞凋亡的影响。结果与假手术对照组相比,EXOSS阳性率在再灌注15min时至少增高20倍(P＜0．01),并在此后的30min内持续增高;EXOSS阳性主要出现在神经元的细胞核内;细胞死亡在再灌注24h组能检测到,并主要发生在神经元细胞内;在一定时间内大脑皮质区神经元细胞内的氧化dna损伤和细胞凋亡均能被特异性nNOS抑制剂3-bromo-7-ni- troindazole(3BR7NI,30mg/kg,腹腔内注射)所抑制。结论EXOSS是一种原位检测AP位点和3’-PO_1末端型氧化dna损伤的有效方法,该损伤在一定时间内可以得到修复,nNOS在这一过程中起着重要作用。

摘要：在MTH1抑制剂TH287的基础上,采用闭环、骨架跃迁和生物电子等排等药物设计策略,结合计算机辅助药物设计方法,设计并合成了17个五元杂环并嘧啶类目标化合物(I_(1~10),II_(1~7))。采用孔雀石绿显色法评价了目标化合物对MTH1酶活性的影响,结果表明该类化合物具有良好的MTH1抑制活性,其中7个化合物的(I_3,I_4,I_(7~9))IC_(50)低于1μmol/L,可以作为新型MTH1抑制剂开展进一步的研究。

摘要：目的探讨中国女性人群dna修复基因X线修复交叉互补基因1（XRCCl）Argl94Trp、Arg399Gln多态与乳腺癌易感性的关系。方法采用病例对照研究设计，包括经组织病理学确诊的女性乳腺癌患者698例和按地区、年龄频数匹配的对照人群813名，以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法进行多态性检测，应用logistic回归计算OR值及95％CI值，运用Meta分析估计Arg399Gln与中国女性人群乳腺癌危险性的关联。结果XRCCI基因194位点3种基因型Arg／Arg、A形Trp、Trp／Trp，及Arg／Trp＋Trp／Trp在病例组分布频率分别为48．81％（327／670）、39．85％（267／670）、11．34％（76／670）和51．19％（343／670），在对照组中分别为48．80％（387／793）、41．99％（333／793）、9．21％（73／793）和51．20％（406／793）。与Arg／Arg比较各基因型的校正OR值（95％CI值）分别为0．98（0．75～1．28）、1．17（0．76～1．80）、1．09（0．86～1．40）。399位点Arg／Arg、Arg／Gin、Gin／Gin和Arg／Gin＋Gin／Gin基因型频率在病例组分别为52．40％（349／666）、38．29％（255／666）、9．31％（62／666）和47．60％（317／666），对照组分别为52．22％（412／789）、38．53％（304／789）、9．25％（73／789）和47．78％（377／789）。与Arg／Arg比较各基因型的校正OR值（95％CI值）分别为0，93（0．63～1．08）、0．96（0．42～1．09）、0．91（0．62～1．05）。未见两位点多态与乳腺癌危险性之间存在关联。分别以绝经状况、哺乳、生育、口服避孕药史进行分层，未发现两多态位点与乳腺癌危险性的显著关联。Meta分析结果提示Arg399Gln位点与中国女性乳腺癌无相关性（OR=0．97，95％CI：0．85～1．10）。结论XRCCl基因Argl94Trp和Arg399Gln多态性可能不是中国女性人群乳腺癌的易感性标志物。

摘要：卵巢癌是世界范围内发病率第二、致死率第一的妇科恶性肿瘤,约70%的病例在确诊时已被诊断为晚期且预后不良。卵巢癌的标准治疗方案是手术联合化疗,目前针对不同分子靶标和途径的多种新药正在研发中。dna损伤应答(dna damage response,DDR)通过修复dna损伤起到维持基因组完整性的关键作用,被视作肿瘤治疗耐药性的关键。与正常细胞相比,癌细胞通常具有DDR缺陷和dna损伤修复障碍,因而利用癌细胞特有的DDR缺陷设计出特异性抑制剂为卵巢癌的靶向治疗提供了新的方向。综述DDR途径中5种激酶抑制剂的作用机制及其治疗卵巢癌的研究进展,以期为卵巢癌的治疗提供新思路。

摘要：肿瘤放疗耐受和抵抗常常是导致某些肿瘤侵袭、转移和复发的重要原因之一。越来越多的研究表明,肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)是肿瘤内一群具有干细胞特性的异质细胞,可以抵抗多种抗肿瘤治疗方法。CSCs通过dna修复、调整细胞周期、清除活性氧和维持特定的肿瘤微环境等多种途径来逃避放射治疗对其的杀伤作用,其中涉及多种基因和信号通路。研究CSCs放疗抵抗机制,可以通过改进放疗技术或设计靶向治疗药物解除放疗抵抗效应。本文对CSCs放疗抵抗机制及提高放疗敏感性的相关研究进展进行综述。

摘要：目的:探讨脂质体介导的小发夹干扰RNA(shRNA)对卵巢癌顺铂耐药细胞中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)表达的影响。方法:设计合成针对ERCC1基因的小发夹干扰RNA(ERCC1-shRNA),构建携带ERCC1-shRNA的重组质粒表达载体,采用脂质体Lipofectamine 2000转染COC1/DDP细胞。分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法(Western blot)检测转染后细胞中ERCC1 mRNA及蛋白的表达,流式细胞计数检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果:转染后COC1/DDP细胞中ERCC1mRNA表达较转染前明显降低(F=203.73,P<0.01),ERCC1蛋白表达亦显著下降。RNA干扰ERCC1基因后48h,COC1/DDP细胞的凋亡率较对照组有明显升高(t=20.65,P<0.01)。结论:构建的重组质粒表达载体转染COC1/DDP细胞可明显下调ERCC1 mRNA及蛋白的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。

摘要：目的 构建人8-羟基鸟嘌呤-dna糖苷酶（hOGG1）基因高表达细胞株,并初步探讨该细胞株对dna氧化损伤与修复作用的影响.方法 提取人血液淋巴细胞总RNA,设计hOGG1特异性引物,RT-PCR扩增后构建pcdna3.1（＋）/Myc-His A/hOGG1载体.经EcoRI和KpnI酶切,凝胶电泳及dna测序证实建立成功后,稳定转染A549细胞,Western blot法检测转染阳性细胞hOGG1蛋白表达的改变.以构建的hOGG1基因高表达细胞株为研究对象,H2O2为受试物,彗星试验检测比较各组细胞对抗损伤和修复能力的情况.结果 成功构建pcdna3.1（＋）/Myc-His A/hOGG1质粒并转染目的 细胞,Western blot法检测转染靶细胞中hOGG1蛋白表达比空白组和阴性对照组明显增加（P〈0.05）.相同H2O2浓度下,转染细胞彗星细胞率和Olive Tail Moment明显低于空白组和阴性对照组,且修复完成率高,修复时间缩短（P〈0.05）,提示细胞对抗dna损伤和修复能力均显著增高P〈0.05）.结论 hOGG1基因的高表达可确切减轻细胞氧化损伤敏感性并提升dna的修复能力.hOGG1基因高表达细胞株的成功构建,为基因水平的靶向治疗研究提供了一种有效手段.