摘要：分析教材中"dna的粗提取与鉴定"实验存在的不足,探索如何在山区县域学校,用新的实验材料和方法提高实验效率,缩短实验时间,从而达到良好的实验效果,提高学生的参与度,帮助学生深刻理解相关生物学知识.

摘要：随着乳饮料行业快速发展,掺杂使假现象层出不穷,对核桃乳真实成分的准确鉴定变的尤为重要。核桃乳属深加工食品,dna破坏严重,dna提取是开展核桃乳dna条形码鉴定的首要环节。为优化核桃乳dna提取方法,并基于psbA-trnH基因dna条形码建立核桃乳的掺假造假鉴定方法。以10种不同品牌的核桃乳为样品,采用3种方法(静置抽提、异丙醇沉淀、抽真空冻干)进行预处理,再用2种CTAB裂解沉淀方法和3种试剂盒方法(康为新型植物基因组dna提取试剂盒、爱思进植物基因组dna提取试剂盒和天根深加工食品dna提取试剂盒)提取核桃乳dna,并在此基础上创新尝试了CTAB与爱思进试剂盒结合方法。以提取的市售核桃乳dna为模板,利用自行设计的特异性基因psbA-trnH-wal鉴定样品中是否含有核桃成分,确定造假情况;选择常见植物候选基因psbA-trnH鉴定样品中是否含有其他成分,确定掺假情况。结果表明,抽真空冻干预处理方法优于其他2种预处理方式。CTAB与爱思进试剂盒结合方法能提取到纯度好、得率高、扩增能力强的核桃乳dna,是最佳的核桃乳dna提取方法。扩增及比对结果显示,1款核桃乳样品中含有花生,属于掺假产品。抽真空冻干预处理、CTAB与爱思进试剂盒结合为优化后的核桃乳dna提取方法,psbA-trnH-wal基因和psbA-trnH基因结合能够对核桃乳及其掺假造假品进行快速准确的鉴定。

摘要：目的 比较不同保存条件下泰山白首乌叶片dna的提取效果,寻找泰山白首乌叶片较适合的保存方法。方法 以泰山白首乌叶片为实验材料,设计五种保存方法,分别为25℃自然晾干、硅胶干燥保存、4℃保存、-20℃保存、-80℃保存,采用改良的CTAB法提取叶片基因组dna,分析各种保存方法的影响。结果 -80℃低温保存叶片提取的dna浓度最高,几种方法提取的dna均可扩增出清晰的条带。结论 获得了不同保存方法下泰山白首乌叶片基因组dna的提取效果,考虑到野外采集的局限性,在较短时间内硅胶干燥保存和25℃自然晾干均可以满足泰山白首乌分子生物学研究。

摘要：目的检验玻璃珠-涡旋振荡改良法提升硅藻dna提取的效果。方法以DNeasyPowerSoilPro试剂盒为对照,另选取2种不同原理的植物dna提取试剂盒(新型植物基因组dna提取试剂盒、Plantdna Isolation试剂盒)和1种血液dna提取试剂盒(全血基因组dna提取试剂盒)对同一水样及同一溺死案件肺组织的硅藻dna进行提取。设计不同大小玻璃珠质量比和涡旋振荡时间的组合,选择加入玻璃珠振荡的最佳dna提取条件。将常规组与改良组的提取产物直接进行电泳,经硅藻特异性PCR扩增检测,采用qPCR对提取物进行定量,对各组的Ct值进行统计学分析。结果当涡旋振荡频率为3000r/min时,dna提取的最佳组合为涡旋振荡4 min,大小玻璃珠质量比为1∶1。以DNeasyPowerSoilPro试剂盒的Ct值为参照,10 mL水样的Ct值大于0.5g组织的Ct值。其他3种试剂盒采用玻璃珠-涡旋振荡改良法后,用于植物dna提取的2种试剂盒Ct值均下降,且改良前后组织的Ct值差异均有统计学意义(P<0.05);全血基因组dna提取试剂盒可以成功提取硅藻dna,水样提取效果接近DNeasyPowerSoilPro试剂盒,改良法用于组织样本后,其Ct值差异有统计学意义(P<0.05);但应用3种试剂盒对水样中硅藻dna进行提取时,改良前后的Ct值只有新型植物基因组dna提取试剂盒差异具有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃珠-涡旋振荡改良法可提高植物及血液dna提取试剂盒对法医学检材中硅藻dna的提取效果,特别是对组织样本中硅藻dna的提取。

摘要：甲螨是一类重要的土壤动物,体型微小,一般具有较厚的体壁。本研究针对甲螨这一特定类群,探讨了一种无形态特征损伤的dna提取技术。通过结合试剂盒dna提取法,并适当改进实验条件,设计出一套行之有效的dna提取流程。通过对提取dna之后的标本进行形态学观察,发现其主要的分类学特征均保存完好,可以作为凭证标本长期保存。本研究所提供的dna提取技术既可以提取出足够的dna又可以保留凭证标本,因此能有效促进甲螨分子分类学相关研究。

摘要：在高中生物学“细胞与分子生物学”模块教学设计中,借鉴高校科研经验,引领学生利用先进的科研技术开展应用于PCR技术的基因组dna提取实验,培养学生科学探究、实践创新能力,发展生物学核心素养。

摘要：以生活中的真实情境引入,从其中提炼出“dna的粗提取与鉴定”的核心问题,以核心问题的解决贯穿整个课堂。在授课过程中教师通过引导学生分析实验原理,探讨实验步骤,从菜花、香蕉、洋葱、猕猴桃等实验材料中提取dna,比较材料之间的差异,发展学生科学思维与实践探究能力。

摘要：目的建立一种将dna提取技术与PCR技术相结合的天麻dna真伪鉴定试剂盒,并对试剂盒性能进行方法学评价。方法通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)查找天麻及其常见伪品紫茉莉根、大丽菊块茎、马铃薯的ITS2序列,应用dnaMAN进行多序列比对,NCBI-Primer-Blast设计天麻特异性引物。改良植物常用dna提取的CTAB法,确保提取出高效的正品天麻及其常见伪品的基因组dna,应用紫外分光光度法测其浓度及纯度。优化PCR反应体系,确定试剂盒的组成与反应条件,随机抽样检测市售天麻样品。结果应用所研制的试剂盒提取样品dna,纯度OD260/OD280值为(1.87±0.13),灵敏度为10 ng·μL^(-1),3次重复性检测结果相同,反复冻融5、10、15、20次对检测效果无影响,于-20℃可保存1年,检测10个市售天麻样品,其中7个是正品,3个是伪品。结论道地药材天麻dna真伪鉴定试剂盒特异性强,灵敏度高,重复性和稳定性均良好,检测结果准确,适用于天麻及其常见伪品的快速鉴别。

摘要：目的提取西安地区出土3000年前人牙齿中的dna并进行性别鉴定，为后续的考古研究提供帮助。方法选取西安地区出土的3000年前人牙齿35颗，应用逆向根管技术提取牙齿内部组织的dna。设计釉原蛋白基因特异性引物，应用PCR技术进行样本的性别鉴定。结果成功提取到30份3000年前的人基因组dna，并对相应样本进行了性别鉴定，其中男性8例，女性22例。结论逆向根管技术可用于古人类牙齿dna的提取，基因学方法可补充体质人类学方法的不足，完善古代样本性别信息。

摘要：为了对烤鳕鱼片中的鳕鱼成分进行实时荧光PCR检测,将烤鳕鱼片基因组dna的提取条件进行响应面法优化研究,以CTAB为裂解液,考察取样量、蛋白酶量、裂解温度等因素对提取质量的影响。每个因素的最佳水平由单因素试验确定。选择Box-Behnken方案进行设计并试验,以最终dna浓度为响应值,利用响应面法对参数进行优化,最终得到烤鳕鱼片中基因组dna的最佳提取条件:取样量0.2 g、加酶量45μL、裂解温度65℃。在该条件下进行试验,提取的基因组dna实际浓度为627.0±13.0 ng/μL,与模型预计结果637.5 ng/μL的相对误差为1.66%,误差较小,适用于烤鱼片中基因组dna的提取。利用优化方法对6种市售秦皇岛烤鳕鱼片进行dna提取并进行鳕鱼成分的实时荧光PCR检测,所得结果均检出鳕鱼成分。