摘要：以副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus,VP）toxR基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸（dpo）引物,建立了dpo-pcr快速检测VP的方法.结果显示,退火温度在49～69℃都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该dpo引物仅与VP的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为121 CFU/mL.利用该检测方法对采集的550份样品进行检测,共计检出19份VP阳性样品,与行标法（SN/T 1870-2007）检测结果一致,实用性良好.该dpo-pcr方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性.

摘要：目的为建立肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）的dpo-pcr快速检测方法。方法本研究以EIECipaH基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸（dpo）引物,建立了EIEC dpo-pcr检测方法。结果退火温度范围在47℃~67℃内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该dpo引物仅与EIEC的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为1.17×102 cfu/mL。利用该检测方法对采集的230份样品进行检测,共计检出3份EIEC阳性样品,与国标法（GB 4789.6-2003）检测结果一致,显示了良好的实用性。结论该dpo-pcr方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性。

摘要：为建立检测金黄色葡萄球菌（SA）的pcr方法,以SA Sa442基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物（dpo）,建立了SA的dpo-pcr快速检测方法。结果显示,在45~65℃退火温度范围内均能高效地扩增出目的基因,表明dpo引物对退火温度不敏感,该方法的灵敏度为2.27×102cfu/m L,同时dpo引物特异性强,与其他菌株无非特异性扩增反应。利用该方法和行标法分别对采集的175份样品进行检测,均共计检出13份SA阳性样品,两者符合率为100%。作者建立的dpo-pcr方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性,为快速准确检测SA提供新的检测手段。

摘要：为建立肠致病性大肠杆菌（EPEC）的快速检测方法,本研究以EPEC bfp A基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物（dpo）,建立了EPEC的dpo-pcr快速检测方法。结果显示,退火温度在45℃~65℃范围内均能够高效地扩增出目的基因,表明dpo引物对退火温度不敏感。该方法对其他菌株的扩增结果均为阴性,特异性强;其灵敏度为97 cfu/m L。利用该方法和国标法分别对采集的230份临床样品进行检测,均共计检出5份EPEC阳性样品,两者符合率为100%。本研究建立的dpo-pcr方法设计简单、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性,为快速准确检测EPEC提供新的检测手段。

摘要：为建立检测创伤弧菌（VV）的快速检测方法,以VV vvhA基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物（dpo）,建立了dpo-pcr快速检测VV的方法。结果显示,退火温度范围在49~69℃内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该dpo引物仅与VV的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为99 cfu/m L。利用该检测方法对采集的210份样品进行检测,共计检出4份VV阳性样品,与行标法（SN/T 1870—2007）检测结果一致,显示了良好的实用性。该dpo-pcr方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性。

摘要：根据油菜茎基溃疡病菌ITS基因序列,设计特异性dpo引物,建立检测油菜茎基溃疡病菌的dpo-pcr检测方法,并对其特异性、灵敏性进行评价。结果显示与常规pcr检测方法相比,dpo-pcr反应对退火温度不敏感,具有更强的特异性。利用该方法对10批油菜籽样品进行检测,共检出5批阳性样品,检测结果与常规pcr一致,为油菜茎基溃疡病菌的检测提供了新方法。

摘要：目的 引入一种设计简易、特异性强、退火温度范围宽的双启动寡核苷酸引物（dual-priming oligonucleotide,dpo）设计,建立基于dpo引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的pcr方法.方法 以小肠结肠炎耶尔森氏菌16S 23SrRNA基因为靶基因,设计一对dpo引物,经过pcr反应体系优化,建立小肠结肠炎耶尔森氏菌dpo-pcr检测方法.测定了检测灵敏度,以常规pcr方法作为参照,分析DP＆pcr方法的特异性及退火温度.结果 建立的小肠结肠炎耶尔森氏菌dpo-pcr检测方法的灵敏度为1.43×102 CFU/mL;与常规pcr方法相比,DP＆pcr方法在49～69℃退火温度范围内均能保持高效率扩增;特异性强,所测试17种病原菌中,仅小肠结肠炎耶尔森氏菌为阳性结果,且无非特异性扩增.结论 dpo-pcr方法不需要对引物参数特别是退火温度进行优化,特异性强,为致病微生物的快速准确检测提供了新方法.

摘要：为建立特异、快速检测空肠弯曲菌的方法，本研究针对其gyrA基因设计了一对双启动寡核苷酸引物（dpo），建立了空肠弯曲菌dpo-pcr检测方法。试验结果显示，该方法的检测下限为1．2×10^2cfu／mL，在48℃～68℃退火温度范围内均可高效扩增靶基因片段，表明该方法退火温度范围宽，同时dpo引物特异性强，pcr反应过程中不会产生非特异性扩增。利用该方法对采集的184份样品进行检测，共计检出17份空肠弯曲菌阳性样品，经国标法（GB/T 4789．9-2008）复验，两者检测结果一致，显示了良好的实用性。该dpo-pcr方法设计简单、特异性强，为致病微生物的快速准确检测提供了新方法。

摘要：为建立牛细小病毒的快速检测方法,以牛细小病毒VP2基因为靶基因,设计了1对双启动寡核苷酸(dual-priming oligonucleotide,dpo)引物,建立了牛细小病毒dpo-pcr快速检测方法。退火温度不敏感试验、特异性试验和灵敏度试验的结果显示,与常规pcr方法相比,dpo-pcr方法在41～65℃退火温度范围内均能够高效地扩增出目的基因,表明dpo引物对退火温度不敏感;该方法的最低检出量为3.94×10~3copies/uL;通过对牛细小病毒、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒进行检测,只有牛细小病毒的检测结果为阳性,且无非特异性扩增。结果表明,建立的dpo-pcr方法同传统pcr方法相比,特异性强、灵敏度高,为牛细小病毒的快速检测提供了一种新方法。

摘要：为建立检测溶藻弧菌（VA）的快速检测方法,试验以VA Collagenase基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸引物（dpo）,建立了dpo-pcr快速检测VA的方法。结果显示,退火温度范围在48℃-68℃内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该dpo引物仅与VA的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为1.14×10^2 CFU/m L。利用该检测方法对采集的550份样品进行检测,共计检出4份VA阳性样品,与商检行业标准（SN/T 1870—2007）检测结果一致,显示了良好的实用性。该dpopcr方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性。