摘要：目的 探讨核基质结合区结合蛋白1 (SATB1)和表皮生长因子受体(egfr)在胃癌中功能及其临床意义。方法 收集石蜡包埋的胃癌病理切片60例和胃黏膜慢性炎症组织切片39例,采用免疫组化方法检测SATB1和egfr的表达情况。采用干扰小RNA(siRNA)瞬时转染入胃癌细胞,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测转染后SATB1和egfr的表达,再通过细胞划痕及Transwell实验检测转染后胃癌细胞MGC803的迁移及侵袭变化。KM生存分析不同SATB1和egfr表达胃癌患者的预后情况。结果 胃癌组织中SATB1和egfr的表达均高于胃黏膜慢性炎症组织,差异有统计学意义(P<0.05)。SATB1的表达与胃癌淋巴结转移以及远处转移相关,差异有统计学意义(P<0.05);egfr的表达也与远处转移相关,差异有统计学意义(P<0.05)。SATB1和egfr在胃癌组织中的表达有一定的相关性(r=0.49,P<0.05)。RT-qPCR和Western blot实验表明siRNA能有效敲低胃癌细胞中SATB1和egfr的表达;细胞划痕及Transwell实验结果显示,敲低SATB1和egfr可致使胃癌细胞的迁移和侵袭受到抑制。KM生存曲线结果表明SATB1低表达的胃癌患者预后相对较好,egfr低表达的胃癌患者预后好。结论 SATB1和egfr的表达水平与胃癌的淋巴结转移及远处转移密切相关,且降低SATB1和egfr的表达能抑制胃癌的迁移和侵袭。

摘要：目的构建egfr shRNA重组真核表达载体,并筛选抑制效果最好的egfr shRNA序列。方法应用在线工具设计人egfr siRNA序列,采用限制性内切酶BamHI和HindIII切割真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建三种人egfr的siRNA干扰序列载体(psilencer 4.1-CMV neo-egfr siRNA)。将重组质粒载体转化大肠杆菌DH5α感受态并筛选阳性克隆,通过DNA测序鉴定重组质粒。应用脂质体lipo2000将三种人egfr siRNA干扰序列载体转染到HepG2细胞,通过荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR检测egfr mRNA表达水平,MTT法检测细胞活性。结果Psilencer 4.1-CMV neo-egfr siRNA重组质粒被成功克隆。egfr shRNA-1、egfr shRNA-2和egfr shRNA-3敲低egfr mRNA的效率分别是80%、60%和70%以上。shRNA-2和shRNA-3使细胞活性分别下降50%(P0.05)。结论重组psilencer 4.1-CMV neo-egfr siRNA质粒可下调肝癌细胞株egfr表达水平和细胞活性。egfr shRNA-3较egfr shRNA-1和shRNA-2对HepG2细胞的抑制作用更显著。

摘要：设计靶向egfr mRNA的脱氧核酶(egfr DRz),以壳寡糖(COS)为材料,建立了一种有效的纳米基因细胞内传递体系,并研究其介导的靶向egfr的脱氧核酶在Hela细胞内的生物学效应.流式结果表明COS-egfr DRz复合体转染效率为88.7%,与脂质体转染试剂的89.7%相比无显著差异.半定量RT-PCR结果显示,经壳寡糖纳米载体递送的egfr DRz能有效地靶向切割Hela细胞内的egfr mRNA,使其表达下降.进一步的流式分析显示细胞被阻滞在G0～G1期,并且出现凋亡现象,其中COS组的凋亡率为19.3%,大于对照组脂质体的凋亡率13.0%.研究表明,COS较脂质体有相似的转染效率和更低的毒性,是一种潜在的、有效的脱氧核酶递送载体.

摘要：采用分子动力学和MM PBSA相结合的方法预测了表皮生长因子受体和 4 苯胺喹唑啉类抑制剂的相互作用模式 .在分子动力学采样的基础上 ,采用MM PBSA的方法分别预测了四种可能结合模式下表皮生长因子受体和 4 苯胺喹唑啉类抑制剂间的结合自由能 .在MM PBSA计算中 ,受体和抑制剂之间的非键相互作用能采用分子力学(MM)的方法得到 ;溶剂效应中极性部分对自由能的贡献通过解Possion Boltzmanne (PB)方程的方法得到 ;溶液效应中非极性部分对自由能的贡献则通过分子表面积计算 (SA)的方法得到 .计算表明 ,在四种结合模式下 ,表皮生长因子受体和 4 苯胺喹唑啉类抑制剂之间的结合自由能有较大的差别 .在最佳的相互作用模式中 ,抑制剂的苯胺部分位于活性口袋的底部 ,能够与受体残基的非极性侧链产生很强的范德华和疏水相互作用 .抑制剂喹唑啉环上的N(1)原子能够和Met 76 9上的NH形成稳定的氢键 ,而抑制剂上的N(3)原子则和周围的一个水分子形成氢键 .同时 ,抑制剂双环上的取代基团也能和活性口袋外部的部分残基形成一定的范德华和疏水相互作用 .

摘要：目的egfr酪氨酸激酶抑制剂(egfr-TKIs)治疗后会出现耐药性,采用PROTAC技术研究突变egfr降解剂,为克服egfr耐药提供一个新的方向。方法选取AZD-3759抑制剂对其进行设计和改构并合成AZDV-P1、AZDV-P2、AZDV-P3、AZDV-5、AZDV-7、AZDV-9和AZDV-10共7个PROTAC功能化合物,同时进行了药效测试。结果药效测试结果显示,化合物AZDV-9和AZDV-P1对egfr19del突变效果较好,IC_(50)值为10 nM,化合物AZDV-10的IC_(50)值为81.1nM;同时观察到AZDV-P1和AZDV-10能引起蛋白降解,并呈现出“勾效应”。结论本研究设计并合成一系列靶向egfr的PROTAC化合物,AZDV-P1和AZDV-10均能引起蛋白降解,并观测到了勾效应,这一结果或能为克服egfr耐药提供一个新的方向。

摘要：目的 设计合成一系列5,6,7,8-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物作为egfr激酶抑制剂,评价其体外抗人源肺癌A549细胞增殖活性。方法 依据厄洛替尼与egfr活性位点的结合模式进行分子对接研究,设计并合成了一系列新型5,6,7,8-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物。采用MTT法对所有目标化合物进行体外抗人源肺癌A549细胞增殖抑制活性评价。结果与结论共合成12个目标化合物,其结构经ESI-MS、IR、^(1)H-NMR谱确证。部分化合物具有明显的抗人源肺癌A549细胞增殖活性,其中7-(4-羟基苯基)-4-(3-甲氧基苯硫基)-5,6,7,8-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶(9b)表现出最强的抑制活性。初步总结了部分目标化合物的构效关系。

摘要：目的 构建表皮生长因子受体(egfr)抑制剂的药效团模型,设计新结构类型的化合物。方法 在egfr结构的诱导下得到抑制剂活性构象集,将13个不同结构特征的egfr抑制剂的构象进行叠合,应用距离比较法建立合理的药效团模型;初步验证模型的有效性,对数据库进行基于三维药效团模型的搜索和分子对接。结果 得到了egfr抑制剂的三维药效团模型,根据此模型设计了新结构类型的化合物。结论 基于三维药效团模型进行药物分子的设计,可以减少后续工作的计算量,提高先导化合物的命中率,用于指导新型的酪氨酸激酶抑制剂的设计。

摘要：计算了现有的治疗非小细胞肺癌(NSCLC)常见药物的相关参数,总结了以表皮生长因子受体(egfr)酪氨酸激酶为靶标的药物分子的药效团特征.在Gefitinib的基础上进行了药物分子的组合化学设计,通过虚拟筛选得到了分子对接得分较高的结构分子,并对其进行了预测和模拟.结果表明:新设计筛选出的2种分子在药代动力学和毒性方面优于Gefitinib,在分子动力学过程上和Gefitinib一样稳定.

摘要：目的分析扩增阻滞突变系统(ARMS)法检测egfr基因不同位点数的突变检出率差异。方法回顾性分析ARMS法对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)石蜡包埋组织标本egfr基因4位点突变及29位点突变检测情况。结果ARMS法检测NSCLC egfr基因(19、20、21号外显子)4位点突变的突变率为29.14%,EG-FR基因(18、19、20、21号外显子)29位点突变率为44.60%。NSCLC中egfr基因突变率在4位点与29位点差异具有显著性(P0.05)。egfr 29位点试剂检测中女性患者与男性患者的突变率差异有统计学意义(P0.05);男性患者检测egfr基因29位点的突变率高于4位点突变率,但差异无统计学意义(P>0.05),女性患者表现出更高的突变率,且29位点与4位点突变率差异有显著性(P<0.001)。结论艾德公司设计egfr基因29种检测位点在NSCLC或腺癌或女性患者中的突变率明显高于egfr基因4位点突变率;同时,通过了解这两种不同位点检测试剂所体现出不同突变检出率,还有助于不同情况下不同人群egfr靶点检测选择提供了数据支持,具有较高的临床意义。

摘要：目前针对表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，egfr）设计的分子靶向药物西妥昔单抗是一种抗egfr的IgG，单克隆抗体，它可特异阻断egfr介导的信号传导通路，同时引起egfr内吞与降解，并诱导抗体依赖细胞介导的细胞毒作用，杀伤表达egfr的肿瘤细胞。