摘要：目的探讨利用RNA干扰技术沉默非小细胞肺癌A549和A549/顺铂(DDP)细胞株ercc1和ercc2的表达对DDP化疗敏感性的影响。方法设计并合成靶向基因siRNA-ercc1和siRNA-ercc2,并构建载体,通过前期转染A549/DDP细胞,筛选出沉默ercc1和ercc2基因表达最优的小分子RNA片段及最佳的作用时间,再将筛选出来的最优片段通过脂质体LipofectamineTM2000转染入A549细胞,观察其转染效率,使用RT-PCR及细胞免疫组化分别检测转染后基因及蛋白的表达变化;利用MTT法检测转染后细胞IC50,观察其对DDP耐药性的变化;再根据实验结果,从A549和A549/DDP细胞株中选定一株能够被逆转耐药的细胞接种于12只裸鼠皮下,观察裸鼠成瘤时间,并加用DDP局部化疗4次,记录肿瘤体积变化情况。结果通过siRNA-ercc1和siRNA-ercc2转染A549细胞株后,其ercc1mRNA相对表达量为104.097 8±8.551 3,未转染组为128.465 6±12.360 4;ercc2 mRNA相对表达量为90.415 7±7.882 1,未转染siRNA-ercc2组为123.310 0±10.999 2。转染组的mRNA相对表达量均小于未转染组,P0.05;转染A549细胞后未发现逆转DDP耐药的效果,故筛选出A549/DDP细胞株。siRNA-ercc1转染组的肿瘤体积为(144.63±7.67)mm3,siRNA-ercc2转染组为(130.65±8.45)mm3,均明显小于未转染组的(252.35±12.36)mm3,P<0.01。结论高效的特异性siRNA能抑制非小细胞肺癌细胞中ercc1和ercc2基因和蛋白的表达,并能使A549/DDP细胞株对DDP的耐药性降低,但不能改变A549细胞株对DDP的耐药性。