摘要：目的设计和筛选有效抑制纤维母细胞生长因子受体3基因（fgfr3）表达的siRNA序列，构建相应表达载体，研究其对肝癌细胞HepG2生物学特性的影响。方法根据fgfr3序列，设计3条siRNA序列及1条对照序列：以pRNAT-U 6．1／Neo为载体，并以载体中同时构建的绿色荧光蛋白（GFP）基因编码序列为转染效率内参照；采用脂质体法将pRNAT-U 6．1／Neo-siRNA转染肝癌细胞HepG2；以实时荧光定量PCR（Real time PCR）检测fgfr3的mRNA表达变化，Western印迹法检测fgfr3蛋白质表达变化；[^3H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法（^3H-Tdr）和细胞克隆形成法分析DNA合成变化及细胞生长能力。结果所设计合成的3条siRNA序列中均能抑制fgfr3的表达，对mRNA表达抑制率约为74．04％～87．25％，在蛋白质水平表达抑制率为19．65％～90．40％。转染siRNA后，HepG2的细胞克隆形成能力和DNA合成能力明显受到抑制。结论siRNA能够有效抑制肝癌细胞fgfr3的表达，并继而抑制肝癌细胞的DNA合成和生长，能够为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因。

摘要：我们通过对髁突软骨细胞进行PCNA、fgfr3、Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体基因表达等研究,探讨髁突软骨的分层及其功能. 　　1.材料和方法:成年日本大耳白兔共6只,雌雄各半.处死动物后,取TMJ标本, HE染色和免疫组化标本用多聚甲醛固定,EDTA脱钙,石蜡包埋.免疫组化采用超敏SP法.抗fgfr3多克隆抗体购自Santa Cruz 公司(美国), 抗PCNA单克隆抗体、SP免疫组化试剂盒(购自福州迈新公司).基因序列、引物设计、RNA探针制备和原位杂交方法同以前的研究[1]。