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鸡蛋主要过敏原Gal d1片段基因的克隆、表达、纯化及免疫学鉴定: 收藏
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引用; 《免疫学杂志》2010年第7期26卷 589-593页; 作者：马艳梅黄钟刘志刚闫浩王和平罗新萍孔小丽深圳大学医学院518060 深圳大学医学院呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室518060 深圳市儿童医院内五科518026; 目的克隆、表达和纯化鸡蛋主要过敏原gald1区基因,并对其免疫学活性进行鉴定。方法用生物信息学方法对鸡蛋主要过敏原gald1基因进行抗原表位预测,设计特异性引物,用PCR的方法分别扩增gald1N端和C端基因,将其分别连接到原核表达载体PET32...; 目的克隆、表达和纯化鸡蛋主要过敏原gald1区基因,并对其免疫学活性进行鉴定。方法用生物信息学方法对鸡蛋主要过敏原gald1基因进行抗原表位预测,设计特异性引物,用PCR的方法分别扩增gald1N端和C端基因,将其分别连接到原核表达载体PET32a上。重组质粒转入大肠杆菌,用IPTG诱导表达,通过镍亲和柱层析法纯化重组蛋白,最后用Western-blotting检测重组蛋白的免疫原性。结果表达的蛋白均以可溶性为主,N端融合蛋白相对分子质量为28600,C端融合蛋白相对分子质量为26800,纯化的N端和C端蛋白均有较好的免疫原性,C端的免疫原性强于N端。结论成功地克隆和表达了鸡蛋主要变应原基因gald1的N端和C端,为鸡蛋过敏的诊断和免疫治疗奠定了基础。; 来源：详细信息评论

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