摘要：目的通过一例经卫生检疫发现的甲型h1n1流感病例流行病学调查分析,探讨甲型h1n1流感的流行规律和国境口岸卫生检疫策略的调整。方法根据国家质量监督检验检疫总局和卫生部相关方案,采集病例咽拭子,采用real-timeRT-PCR方法进行病毒核酸检测,并设计统一的调查表、记录表,开展相关流行病学调查。结果病例为境外输入性病例,却是在出境时由口岸卫生检疫发现。123名密切接触者未发生二代病例,亦未造成社区传播。病例病情温和,未服用达菲治疗,咽部带毒时间较长。结论通过对该例甲型h1n1流感病例的流行病学特征及控制过程分析,体现国家应对甲型h1n1流感不断认识和防控策略由国境口岸卫生检疫围堵到针对性干预调整的过程。

摘要：目的疫苗是预防流感所致疾病的最有效方法,MicroRnA介导的基因沉默机制为构建新型疫苗提供了新思路。文中旨在构建包含装载有miRnA Let-7b结合靶位PB1基因的甲型流感重组病毒。方法比对A/nanjing/108/2009h1n1的PA、PB1、PB2与let-7b的靶序列选定PB1基因为最优序列后,通过基因突变,插入Let-7b的结合靶位;构建p DP2000重组表达载体,设计p DP-mu-PB1,同时设计对照组p DP-sclb-PB1,并与其余7个质粒共转染MDCK细胞和293T细胞拯救病毒;留取上清接种鸡胚尿囊腔,血凝法检测病毒,TCID50检测病毒滴度;提取病毒RnA,采用RT-PCR扩增病毒c DnA,通过琼脂糖凝胶电泳和核苷酸序列分析鉴定病毒。结果选择PB1片段最优序列(位置83 bp-107 bp),突变片段改变了3个氨基酸,同时有3个碱基不能与Let-7b靶序列配对;酶切鉴定重组质粒构建正确;重组病毒miRT(miRnA target elements)-h1n1和scramble(scbl)-h1n1的血凝效价分别为1∶32和1∶64,病毒滴度为4.6815;105TCID50/m L和7.9415;104TCID50/m L;测序确认突变病毒包含目的片段。结论构建成功重组病毒株,为进一步的毒力评估实验奠定了基础。