摘要：目的预测并验证HOX转录反义RNA(HOTAIR)通过上调miR-152-3p对人类白细胞抗原-g(hla-g)靶向调控作用。方法利用生物信息学网站及软件预测miR-152-3p与HOTAIR和hla-g基因3′非翻译区(UTR)的结合位点,设计合成含有与miR-152-3p结合位点的HOTAIR和hla-g基因3′-UTR序列及其突变序列,并构建HOTAIR和hla-g野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体。经双酶切电泳和测序鉴定后,HOTAIR和hla-g野生型与突变型双荧光素酶报告基因载体分别与miR-152-3p模拟物(mimics)和miRNA无义序列阴性对照(mimicsNC)共转染HTR-8/SVneo细胞,检测荧光素酶活性,观察miR-152-3p对HOTAIR和hla-g表达的影响。结果双酶切电泳和测序结果显示,野生型和突变型的HOTAIR和hla-g基因载体片段大小、序列与实验预期一致,载体构建成功。转染miR-152-3pmimics后的HOTAIR及hla-g野生型荧光素酶活性显著降低(P0.05)。结论HOTAIR通过上调miRNA-152-3p靶向调控hla-g。

摘要：目的探讨肺结核患者外周血特异性T细胞IFN－γ（TB－IgRA）和人类白细胞分化抗原g（hla－g）的表达情况及其诊断肺结核的价值。方法 采用回顾性研究设计方法，病例均来自2015年1月至12月绍兴市立医院呼吸科就诊的肺部疾病患者，根据临床和病理诊断分为肺结核组（34例）、肺癌组（25例）及非结核性肺炎组（25例），以及35名健康体检者入选为表观健康组，ELISA法检测结核特异性T细胞IFN－γ和shla－g的表达，流式细胞分析法检测mhla－g的表达，Kruskal－Wallis检验比较组间差异，各项指标诊断肺结核的价值用ROC曲线分析。结果 肺结核患者TB－IgRA、shla－g和mhla－g表达量的中位数分别为182.5 ng/L、99.44 U/ml和13.63%，高于肺癌（117.0 ng/L、82.3 U/ml和9.12%）、肺炎（80.84 ng/L、34.2 U/ml和10.92%）和健康组（30.5 ng/L、31.28 U/ml和8.18%）（P值〈0.05）。TB－IgRA、shla－g和mhla－g诊断肺结核的ROC曲线下面积分别为0.842（95% CI：0.761～0.922）、0.746（95% CI：0.652～0.840）和0.706（95% CI：0.605～0.806）。当TB－IgRA、shla－g和mhla－g的诊断界值分别为35 ng/L、60 U/ml和10%时，敏感性分别为88.24%、70.59%和67.65%，特异性分别为60%、72.94%和70.59%。3项指标联合检测的敏感性和特异性为88.24%和81.18%。结论 肺结核患者结核特异性T细胞IFN－γ和hla－g表达量均增加，虽然外周血中TB－IgRA检测具有较高的诊断价值，但与hla－g联合检测显著提高诊断特异性，对肺结核的诊断具有一定临床应用价值。