摘要：目的:探讨si RNA沉默检测点激酶1(Chk1)基因对人卵巢癌细胞ho8910增殖和周期调控的影响及其作用机制。方法:设计并合成3条Chk1 si RNA干扰片段,转染进入卵巢癌细胞ho8910,Western blot检测转染前后ho8910细胞中Chk1蛋白的表达情况,筛选出有效片段。将Chk1 si RNA有效片段转染进入ho8910细胞,采用MTT法和流式细胞仪分析Chk1si RNA对ho8910细胞增殖和周期的影响;Western blot方法分别检测细胞周期相关基因Cyclin A、CDK4、Cdc25A蛋白表达。结果:3个si RNA中,1条是有效si RNA。该有效Chk1 si RNA片段转染后,ho8910细胞中Chk1蛋白水平下降约53.6%,明显低于未转染组和脂质体转染组(P=0.000)。转染48 h后,Chk1 si RNA转染组ho8910细胞增殖活性下降,抑制率为(52.1±5.1)%,明显高于脂质体转染组的(7.6±3.8)%(P=0.000)。流式细胞仪检测显示Chk1 si RNA转染组ho8910细胞G2/M期比例为(5.03±2.62)%,明显低于未转染组(19.35±2.19)%和脂质体转染组(19.76±2.67)%(P=0.000)。Western blot结果显示转染Chk1 si RNA后,细胞内与细胞周期相关的Cyclin A、CDK4、Cdc25A蛋白水平表达明显增强,与未转染组和脂质体组比较,差异有统计学意义(P=0.000)。结论:si RNA沉默Chk1基因后,可明显抑制卵巢癌细胞ho8910细胞的增殖,其抑制增殖作用与减弱G2/M期阻滞有关。

摘要：目的建立卵泡刺激素(FSH)受体阳性与阴性上皮性卵巢癌动物模型,检测外源性FSH对上皮性卵巢癌的生长及Wnt信号转导通路中关键调节因子的影响。方法 BALB/c-nu雌性裸鼠腋窝皮下接种ho8910(FSH受体阳性)细胞、SKOV3(FSH受体阴性)细胞,建立裸鼠成瘤模型,分别设计A组(ho8910细胞实验组)、B组(ho8910细胞对照组)、C组(SKOV3细胞实验组)、D组(SKOV3细胞对照组),A、C组每天腹腔注射FSH 0.2m L(60m Iu·m L-1),C、D组给予生理盐水0.2m L,持续21d。测量肿瘤体积,检测两种卵巢癌细胞在FSH作用下生长状态,Real Time PCR及Western blot检测卵巢移植瘤组织中β-catenin、DKK-1、DKK-3 m RNA及蛋白水平的表达。结果腹腔注射FSH后A和C组皮下移植瘤体积较B和D组增大(P0.05)。而DKK-1和DKK-3 m RNA和蛋白表达,A组低于B组、C组低于D组(P0.05)。结论 FSH可促进卵巢癌细胞中β-catenin表达,抑制蛋白DKK-1和DKK-3的表达,实现对卵巢癌细胞的增殖作用。