摘要：[目的]为更好地研究hsp70热激蛋白基因与植物雄性不育的关系。用PCR方法克隆了水稻花药特异表达启动子Osg6B,将其与设计合成的hsp70反义片段连接,构建了由水稻花药特异表达启动子Osg6B驱动的hsp70反义表达载体,并进行了PCR和酶切鉴定。[结果]克隆的Osg6B启动子序列与所发表的序列同源性高达97%,启动子区域的顺式调控元件完整;构建的由水稻花药特异表达启动子Osg6B驱动的HPS70反义表达载体通过了菌落PCR验证和表达载体值粒的酶切鉴定,载体构建成功。[结论]该表达载体的构建将为植物基因工程雄性不育的利用奠定基础。

摘要：旨在探究马齿苋水提物(aqueous extract of Portulaca oleracea L.)对热应激小鼠空肠hsp70含量及肝脏抗氧化能力的影响。选取40只昆明种小鼠,随机分为4组:空白组(C)、热应激组(HS)、马齿苋水提物组(AEP)、维生素C组(Vc),每组10只。热应激组于40℃±1℃环境下每天处理0.5 h,其余时间置于30℃±1℃条件下,C组放置于25℃±1℃,连续6 d后,将小鼠置于25℃±1℃之环境给药治疗7 d。在给药治疗开始后第3天和第7天眶窦采血,处死后采集小鼠空肠、肝脏,测定各组小鼠血清hsp70含量、肝脏SOD、MDA及GSH-Px含量及空肠黏膜hsp70 mRNA表达量的变化。结果显示,与C组比较,热应激可显著提高小鼠空肠黏膜hsp70 mRNA表达量(P0.05)。结论:马齿苋水提物能够通过降低热应激小鼠的氧化应激反应,减少热应激小鼠体内hsp70的表达量,达到良好的抗热应激效果。

摘要：[目的]研究hsp70是否可作为鲤鱼养殖中的应激监测指标。[方法]根据鲤鱼hsp70序列(AY120894)设计并合成1对引物,提取鲤鱼肝脏组织总RNA,通过RT-PCR方法克隆得到鲤鱼hsp70部分cDNA片段,然后检测其在鲤鱼心脏、肠、粘液、性腺、鳔、鳃、鳍等不同组织中的表达差异。[结果]RT-PCR扩增获得鲤鱼hsp70基因cDNA部分序列为480 bp。将测序后推测的氨基酸序列与其他种类的鱼进行同源性比较,结果发现与鲤鱼、斑马鱼、虹鳟、牙鲆、剑尾鱼、鲋鱼的同源性依次为96%、98%、98%、96%、96%、96%。hsp70在鲤鱼8个组织中均检测到表达,其中在心脏中表达最高,其次是鳔、鳍,二者之间无显著差异(P>0.05),在肠、粘液与脂肪3个组织中的表达无显著差异(P>0.05),但显著高于在性腺与鳃中的表达水平(P<0.05)。[结论]hsp70作为鲤鱼养殖中应激程度、应激能力、健康状况检测的分子标记物是可行的。

摘要：温度逆境胁迫可以诱导热激蛋白的表达,而热激处理能够减轻果实冷害。为了探讨温度逆境对香蕉热激蛋白基因表达的调控、辨析香蕉热激蛋白基因的表达与果实冷害的关系,采用同源序列法分离了香蕉果皮hsp70基因序列-根据已经报道的hsp70基因的氨基酸保守序列设计引物、以香蕉果皮总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆香蕉的hsp70 cDNA,Northern杂交分析该基因在不同贮藏温度下的表达特征。结果得到2个序列不同的hsp70基因片段,分别命名为Ma-hsp70-1和Ma-hsp70-2,Ma-hsp70-1和Ma-hsp70-2之间的碱基同源性为86.9%,氨基酸同源性为97.1%。Northern杂交的结果表明,38℃短期热激处理诱导了Ma-hsp70-2基因的表达,低温冷藏能使2个基因的表达增强。并初步认为Ma-hsp70可能与香蕉果实耐冷性有关。

摘要：试验研究饵料中添加蛋氨酸铬对鲤鱼部分免疫指标及hsp70表达量的影响,设计7种不同纯化饵料,Cr^(3+)水平分别为0.31、0.43、0.57、0.73、1.13、1.90、3.64 mg/kg。选取1 260尾初始体重为(40.95±4.80) g的鲤鱼,随机分成7组,每组3个重复,每个重复60尾。试验期60 d。结果显示,Cr^(3+)添加量在0.73~1.13 mg/kg时,鲤鱼干胰脏的总抗氧化能力、过氧化氢酶活性显著升高(P<0.05),丙二醛含量显著降低(P<0.05);hsp70表达水平均在2~10 h显著上调,显著高于0.31 mg/kg Cr^(3+)组(P<0.05)。研究表明,在饵料中添加蛋氨酸铬能够提高鲤免疫功能,上调hsp70基因的表达,缓解热应激对机体造成的损伤;建议Cr^(3+)添加量为0.73 mg/kg。

摘要：目的:研究hsp70在TLR信号途径中对肿瘤细胞增殖的影响。方法:将体外培养的H22细胞分成对照组和用hsp70刺激的实验组,设计基因表达的引物、PCR扩增、RT-PCR检测两组细胞的TLR2和TLR4的mRNA表达水平,Western blot检测β-catenin水平,对培养10天后的H22细胞进行计数。结果:hsp70分别处理H22细胞8h后,基因TLR2、TLR4mRNA的表达均明显上调;hsp70促进H22细胞中β-catenin上调表达;hsp70处理组的细胞增殖倍数高于对照组。结论:hsp70在TLR信号途径中具有促进肿瘤细胞增殖作用。

摘要：目的 研究高眼压下大鼠视网膜热休克蛋白70(hsp70)的表达规律及其高眼压下视网膜电子显微镜下结构变化。方法 本实验分为2部分,第1部分将大鼠右眼制成高眼压模型,维持1h 110mmHg(1mmHg=0.133kPa)高眼压,按观察时间分为4组,每组6只大鼠,分别在4、18、24、48h后摘除眼球,同时每组均有4只大鼠作为对照只灌注,不加压,运用免疫组织化学方法,研究高眼压下大鼠视网膜hsp70的表达规律,第2部分分为免疫组和电镜组,其中免疫组中按高眼压维持时间不同,将动物分为3组,每组6只大鼠,高眼压维持时间分别为:0.5、1.5、2.5h,高眼压去除后,使其生存18h后,摘除眼球,每组也有4只大鼠只灌注不加压。电镜组中动物分组、高压眼作用时间、动物生存时间、对照组设计均与免疫组相一致,其中动物分组均随机分组。结果 高眼压后18h视网膜各层hsp70的表达有显著增高(P0.05)。结论 高眼压下大鼠视网膜各层hsp70的表达显著增高与视细胞的显微结构变化相一致。

摘要：对10株不同来源的微孢子虫hsp70基因部分序列进行扩增,并进行了系统发育分析,结果表明:所设计的引物可以有效地扩增出10株家蚕等昆虫微孢子虫hsp70基因中1136 bp大小的片段。遗传距离矩阵和系统发育分析表明,家蚕微孢子虫与野外昆虫微孢子虫的亲缘关系密切,再次从分子水平上证明了家蚕病原微孢子虫来自环境中的野外昆虫微孢子虫的可能性;不同微孢子虫在不同寄主中的寄生生活是一个相互选择和适应的过程;微孢子虫hsp70基因具有遗传多样性;家蚕微孢子虫是一个种复合体。

摘要：为了初步探索热休克蛋白70(hsp70)作为分子佐剂增强猪瘟病毒亚单位疫苗的免疫效果,本研究根据猪瘟病毒兔化弱毒株囊膜糖蛋白E0的基因序列,设计一对特异性引物,RT-PCR扩增得到完整的E0基因,将其分别插入到原核表达质粒pColdI和含有副猪嗜血杆菌hsp70的pColdI-hsp70中,构建了pColdI-E0和pColdI-E0-hsp70重组质粒,经IPTG诱导表达后,获得了E0、hsp70和E0-hsp70融合蛋白。将以上三种蛋白纯化后分组免疫Balb/c小鼠,通过ELISA和流式细胞术测定了小鼠针对E0蛋白的体液免疫和细胞免疫效果。结果显示:E0-hsp70融合蛋白和E0+hsp70混合物免疫后均能显著提高抗E0的抗体效价、CD4+和CD8+T细胞水平,并促进IFN-γ的释放。研究结果表明hsp70能显著增强猪瘟病毒囊膜糖蛋白E0在小鼠上的免疫效果,为在猪体上的进一步应用奠定了基础。

摘要：针对HBV感染的治疗性DNA疫苗虽然具有很好的应用前景,但目前抗病毒效果并不高,表明在病毒长期感染过程中存在免疫抑制机制。以HBV的表面蛋白(HBsAg)和核心蛋白(HBcAg)为DNA疫苗抗原,采用gp96和hsp70作为佐剂联合电转以提高疫苗的活性。将gp96为佐剂的HBsAg/HBcAg DNA疫苗免疫HBV转基因鼠后引发抗原特异性的细胞免疫和体液免疫应答。使用gp96和hsp70佐剂引起Treg下调20%。与没有免疫的小鼠相比,以gp96和hsp70为佐剂的DNA疫苗显著降低血清中病毒S抗原水平和DNA拷贝数,大幅降低小鼠肝脏中HBc的表达。该研究为设计以gp96为佐剂的乙肝治疗性DNA疫苗提供了依据。