摘要：自1981年发现CD11a/CD18,1986年发现不同于LFA-1的细胞间粘附分子(intercellular adhesionmolecule,icam-1，亦名CD54，是LFA-1的一种可诱导的细胞表面配基)以来。人们对LFA-1、icam-1的了解日益增多，并发现它们在细胞粘附中作用特别活跃。而有关创伤性休克时白细胞表面LFA-1、icam-1表达情况少见报道，故我们设计此实验以探讨创伤性休克时白细胞表面IFA-1、icam-1的表达变化。

摘要：目的研究小干扰RNA(siRNA)抑制肝癌细胞系BEL7402基因icam-1表达的可行性。方法根据icam-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/icam-1表达载体,转染BEL7402细胞,实时定量PCR和免疫组织化学方法检测肝癌细胞中icam-1基因表达抑制情况。结果该实验已成功构建了针对I-CAM-1基因的pGenesil-1/icam-1质粒。实时定量PCR检测结果显示,BEL7402细胞经特异性siRNA作用后icam-1基因的表达受抑制,其Ct值由28.8降低到21.6,免疫组织化学结果显示:RNA干扰(RNAi)能特异而有效地抑制BEL7402细胞中icam-1基因的表达。结论构建的pGenesil-1/icam-1重组质粒能有效抑制icam-1基因在肝癌细胞株BEL7402中的表达,为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料。

摘要：目的:通过检测实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型脊髓中MMP-9、icam-1、HO-1的mRNA表达来研究苦参素对EAE的治疗作用。方法:选取40只大鼠随机分为EAE组、空白对照组、苦参素低剂量组和苦参素高剂量组。EAE组和苦参素两个剂量组注射豚鼠全脊髓匀浆(GPSCH)抗原乳剂免疫建立EAE模型。苦参素两个剂量组于免疫当天起鼠尾静脉注射苦参素注射液200 mg&#183;kg-1和100 mg&#183;kg-1。观察3组大鼠的发病情况,采用5分评分法对症状进行评分。设计和合成三条针对MMP-9、icam-1、HO-1mRNA的特异性引物,采用PCR技术检测苦参素治疗16 d后大鼠脊髓中MMP-9、icam-1、HO-1mRNA的表达。结果:EAE组平均症状评分(2.45&#177;0.36)高于苦参素治疗组(1.35&#177;0.21),且两者之间存在显著性差异(P<0.05)。与空白对照组比较,EAE组大鼠脊髓中MMP-9、icam-1的表达显著升高(P<0.01),而苦参素治疗组中MMP-9、icam-1的表达与EAE组比较有所降低(P<0.05)。与空白对照组比较,EAE组大鼠脊髓中HO-1的表达显著降低(P<0.05),而苦参素治疗组中HO-1的表达显著升高(P<0.01)。结论:苦参素能够通过降低MMP-9和icam-1mRNA的表达,并促进HO-1mRNA的表达而发挥对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用。

摘要：目的:通过局部运用重组水蛭素对大鼠皮肤撕脱伤中黏附因子CD11b/CD18及icam-1动态表达的研究,探讨重组水蛭素对皮肤撕脱的保护与该三项指标之间是否有密切关系,以及对撕脱皮瓣成活率的影响变化及作用机理。方法:设计为蒂在侧腹部的任意皮瓣,并给予牵拉证实为撕脱皮瓣后进行实验,实验组注射水蛭素40 IU(1 m L),对照组注射等量生理盐水,正常观察组不做任何处理,直接抽取外周血液及切取皮肤进行检测;实验组及对照组分别于6个时间点抽取外周血,运用流式细胞仪检测CD11b/CD18在中性粒细胞的阳性表达率,切取皮瓣远端组织运用免疫组织化学染色检测血管内皮细胞膜表面icam-1的表达并定量分析,综合了解三者的动态变化,留取的大鼠观察皮瓣愈合情况并计算撕脱皮瓣成活率。结果:术后两组皮瓣均出现充血水肿现象,虽然随着时间的推移实验组及对照组CD11b/CD18阳性表达都在上升,但是,局部运用水蛭素后黏附因子阳性表达率明显低于对照组(P<0.05);对照组icam-1阳性表达率明显高于实验组(P<0.01);经观察发现实验组皮瓣的愈合成功率较空白对照组有明显的提升。结论:局部运用重组水蛭素对大鼠皮肤撕脱伤具有有效减低血液中黏附因子CD11b/CD18及组织中icam-1的作用,减少组织炎症反应,改善缺血再灌注过程中对血管内皮细胞的损伤,从而显著提高皮肤撕脱伤后皮瓣的愈合率。

摘要：目的探索正交设计在实时定量PCR检测条件优化中的应用,找出扩增icam-1基因的最佳条件。方法建立大鼠皮肤损伤模型,采用正交设计实时定量PCR的各影响条件,提取损伤处皮肤组织总RNA反转录成cDNA,cDNA作为模板,通过特异性引物扩增icam-1基因。对扩增曲线和融解曲线制定评分标准,量化不同实验条件下的扩增结果并进行统计分析。结果退火温度、模板量和引物浓度直接影响扩增效果,但三因素间无相互作用。结果经统计学分析表明退火温度61℃、模板cDNA用量0.4μg和引物终浓度150μmol/L为实时定量PCR检测icam-1基因的最佳条件组合。结论正交设计是一种切实可行、快速经济的实时定量PCR检测条件优化方法。

摘要：目的构建人细胞间黏附分子1(icam-1)慢病毒干扰载体,包装病毒后,感染人乳腺癌细胞MCF-7并检测干扰效果。方法针对人icam-1基因设计并合成3条靶向短发夹RNA(shRNA)干扰序列(icam-1 shRNA1、icam-1 shRNA2和icam-1 shRNA3)以及一个阴性对照序列(NS),将其克隆入载体p LKO.1-SP6-PGK-GFP中,测序正确后利用3个质粒病毒包装系统(干扰质粒载体-ps PAX2-p MD2.G)转染HEK293T细胞并包装慢病毒。收获病毒上清并测定病毒滴度。将所获病毒感染MCF-7细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测干扰效率。结果菌落PCR结果显示目的片段成功插入p LKO.1-SP6-PGK-GFP载体中,DNA测序证实无误。将所制备之慢病毒感染MCF-7细胞,qRT-PCR和Western blot结果证实icam-1 shRNA3组icam-1 mRNA和蛋白水平有明显下降。结论成功构建了人icam-1基因shRNA慢病毒干扰载体,包装慢病毒后,感染MCF-7细胞可引起icam-1表达下调。

摘要：通过人工建立血栓闭塞性脉管炎大鼠模型,结合病理学切片结果,利用荧光定量PCR和ELISA方法检测病变组织中的icam-1、Vcam-1和血清中的血栓素B2(TXB2)、抗内皮细胞抗体(AECA)的含量。结果表明清髓愈疽丹能够通过有效地降低icam-1、Vcam-1、TXB2、AECA的含量,抑制淋巴细胞、白细胞的浸润和血小板的黏附聚集,阻止血液高凝状态的形成;延缓损伤内皮处免疫复合物的形成,从而减轻病变部位的炎症与损伤,因此能抑制血栓的形成,对TAO有确实的疗效。

摘要：背景:目前,有很多关于预处理诱导脑缺血耐受及其可能机制的报道,如脑缺血预处理、吸氧、针灸、异氟醚预处理等,国外一些研究也已证实肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)能诱导脑缺血,但机制尚未阐明。迄今,大鼠脑缺血再灌注损伤中TNF-α预处理的影响作用及其机制尚不十分清楚。目的:探讨TNF-α预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及可能机制。设计:完全随机设计,对照实验研究。地点和材料:实验地点为哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心。材料:健康雄性Wistar大鼠60只,体质量200～300g,完全随机分为TNF-α0.05μg组、0.5μg组、1.0μg组及对照组,每组15只大鼠。实验动物由哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心提供,显微器械、25μL微量进样器及微动脉夹均购自上海仪欣医疗器械公司,日本产钓鱼线(直径0.17mm),恒温箱,数码相机,北航图像分析系统,PBS液,重组大鼠肿瘤坏死因子-α(购自美国Sigma公司),CD54,GFAP试剂盒、相应二抗及DAB染色试剂盒皆购自武汉博士德生物工程有限公司,10g/L四氮唑红(TTC)及实验室常规使用材料等。干预:采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型(阻断大鼠大脑中动脉血流),并予以改良。在脑缺血前48h,给大鼠小脑延髓池内注射不同剂量的TNF-α(0.05μg,0.5μg,1.0μg)

摘要：背景：内皮功能紊乱见于已确诊的2型糖尿病，也有可能在发展为糖尿病之前出现。目的：在最初无糖尿病的妇女中，明确血浆内皮功能紊乱的生物学标志(E-选择素、细胞问粘附分子1[intercellular adhesion molecule 1，icam-1]和血管细胞粘附分子1[vascular cell adhesion molecule1，VCAM-1])水平升高是否可预测2型糖尿病的发生。设计和地点：护士健康研究(Nurses’Health Study)中之前瞻性、窠式病例对照研究。护士健康研究于1976年启动，目前仍在进行中。参试者：在1989—1990年最初入选的121700名妇女中，有32826人提供了血标本。基线时无糖尿病、心血管疾病或癌症的参试者中，至2000年有737人发生糖尿病。根据年龄、空腹状态以及种族情况选择匹配的对照组(n=785)。主要观察指标：通过不同基线E-选择素、icam-1和VCAM-1水平确定临床诊断2型糖尿病的危险性。结果：基线时病例组生物学标志的中位值与对照组比较明显升高(E-选择素，61．2比45．4ng/mL；icam-1，264．9比247．0 ng/mL；VCAM-1：545．4比526．0 ng／mL[P值均≤0．004])。在logistic回归分析模型中，在匹配标准条件下，在校正体重指数(body mass index，BMI)、糖尿病家族史、吸烟、饮食积分、酒精摄入、活动指数以及绝经后使用激素情况后，发现E-选择素和icam-1水平升高可以预测糖尿病的发生。最高5分位与最低5分位比较，校正后发生糖尿病的相对危险度E-选择素为5．43(95％可信区间[confidence interval，CI]，3．47～8．50)，icam-1为3．56(95％ CI，2．28～5．58)，VCAM-1为1．12(95%，CI，0．76—1．66)。以腰围取代BMI进行校正或进一步校正基线C-反应蛋白、空腹胰岛素和糖化血红蛋白A1c水平，或排除于最初4年期间随访诊断糖尿病的病例，均未改变其相关性。结论：内皮功能紊乱可以预测女性2型糖尿病的发生，而且独立于其他已知的危险因素(包括肥胖和亚临床炎症)。

摘要：背景:研究发现脑缺血后多形核白细胞(polymorphonuclearleukocyte,PMNL)与微血管内皮细胞(capillaryendothelialcell,CEC)间的黏附增多,应用抗细胞间黏附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,I-CAM-1)抗体可减轻神经元的缺血性损伤。但是目前还没有直接的证据表明抗-icam-1抗体可以抑制PMNL与CEC间的黏附过程。目的:观察脑缺血再灌注后PMNL与CEC间的黏附性变化,探讨应用抗-icam-1抗体对脑缺血再灌注后PMNL与CEC间黏附性的影响。设计:完全随机设计。地点和对象:实验地点设在第三军医大学大坪医院神经内科实验室。以成年雄性Wistar大鼠作为实验动物,分为对照组(n=4)、假手术组(n=6)、脑缺血再灌注组(n=10)和治疗组(n=10)。干预:假手术组、脑缺血再灌注组和治疗组大鼠分别于假手术和再灌注4,12,24h后抽取静脉血2～4mL。治疗组大鼠于缺血再灌注后1h静脉注射抗icam-1抗体(1mg/kg)。用右旋糖酐沉淀法和Percoll密度梯度离心法分离出PMNL,加入培养的CEC,1h后进行微管吸吮检测。主要观察指标:PMNL与CEC间的黏附力和黏附应力。结果:脑缺血再灌注4h后PMNL和CEC间的黏附力和黏附应力明显升高,并于12h达到高峰。治疗组大鼠在各时间点的黏附力犤4h:(14.3&#177;0.6)N,12h:(16.2&#177;0.8)N,24h:(13.7&#177;0.5)