摘要：目的构建igf1r基因的shrNA慢病毒载体,转染A549细胞鉴定沉默效率,观察其对A549细胞增殖能力的影响。方法设计igf1r干扰序列,与pGC-LV慢病毒载体重组形成shrNA表达载体,包装shrNA慢病毒颗粒,感染A549细胞,应用rT-PCr和Western blot检测igf1r干扰效果;细胞生长抑制实验、克隆形成实验及细胞周期检测评价其对A549细胞增殖的影响。结果成功构建了igf1r-shrNA重组慢病毒并高效感染A549细胞,igf1r mrNA及蛋白表达量分别下降74.51%,70.53%;细胞群体倍增时间显著延长,克隆形成能力显著降低,细胞周期阻滞于G0/G1期。结论本研究构建的重组慢病毒能显著抑制igf1r表达,抑制A549细胞增殖。

摘要：采用实时荧光定量PCr分析中外猪种各11个组织mrNA的差异表达,为进一步研究该基因差异表达的机制,根据人、鼠类胰岛素生长因子1受体(igf-1r)基因的5'调控区的保守序列设计引物扩增猪的5'调控区序列,并利用PCr-直接测序方法分析大花白及长大二元杂猪种的5'调控区的遗传多态性;生物信息学分析5'调控区的CpG岛。结果表明猪igf1-r的mrNA表达量在中外猪种的心脏中表达量均为最高,其次是肾脏,在肝脏的表达量差异不显著,在长大二元杂猪的心、肺、背肌、大脑、小脑、垂体表达量均极显著高于大花白猪,分别为6.06、52.56、7.70、2.43、3.63和41.38倍,而在胃、脾、肺的表达量极显著低于大花白猪;获得了1 355 bp的igf1-r 5'调控区序列,测序结果表明该区域在两猪种当中未发现遗传变异;CpG岛预测发现5'调控区存在长度分别是353 bp、603 bp及264 bp的3个CpG岛。

摘要：以胰岛素样生长因子受体 - 1基因为靶筛选抗肿瘤药物 .根据igf1rmrNA的二级结构设计了 9条反义寡核苷酸药物 ,以脂质体介导进行转染 ,MTT染色计算细胞生长抑制率 ,从中筛选出一条序列并对之进行优化 ,最后以最佳序列进行体外作用持续时间及体内细胞生长抑制率分析 .结果表明该序列在体内外具有良好的抗肿瘤活性 ,具有剂量依赖性关系 ,且对荷瘤裸鼠无明显的毒性 .